环境雌激素壬基酚对雄鼠结肠黏膜雌激素受体β表达影响的研究

发布时间：2017-06-30 18:24

  本文关键词：环境雌激素壬基酚对雄鼠结肠黏膜雌激素受体β表达影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:拟通过动物实验研究壬基酚的拟雌激素样作用是否对雄鼠结肠黏膜雌激素受体β表达有影响。方法:1、实验分组:选用清洁级SD健康雄性大鼠60只,5周龄,体重(180±10)g。SD大鼠适应性饲养1周后,60只大鼠按随机原则分为5组各12只:(1)阴性对照组(C组玉米油灌胃)、(2)阳性对照组(D组雌激素灌胃)、(3)低剂量组(L组50mg/kg NP灌胃)、(4)中剂量组(M组100 mg/kg NP灌胃)、(5)高剂量组(H组200 mg/kg NP灌胃)。每组连续灌胃染毒60d,灌胃体积为每100g体重0.5 ml;阴性对照组每日给予等量的玉米油;雌激素组每日给予雌激素20μg/kg/d;灌胃60天后于末次灌胃24h后于10%水合氯醛1ml麻醉下剖腹采集雄鼠腹主动脉血液各10ml及盲肠黏膜组织。2、检测指标及方法:采集各组雄性大鼠动脉血高速离心取上清液于-20℃冰箱冻存、待检,收集各组盲肠黏膜组织一部分制成石蜡标本,一部分放-80℃冰箱冻存待检。1高效液相色谱(HPLC)法检测血清和盲肠黏膜中NP含量;2直接化学发光法检测血清雌激素(E2)浓度;3酶联免疫法(ELISA)检测血清雌激素受体β(ER-β)蛋白含量;4实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测盲肠黏膜中ER-βm RNA的表达;免疫组化SP法检测雄鼠盲肠黏膜中ER-β蛋白含量。5血清壬基酚(NP)含量与盲肠黏膜组织中雌激素受体β(ER-β)作相关分析。结果:1、各组雄性大鼠血清中NP含量有差异,实验染毒组NP含量较对照组升高,并且各实验染毒组随NP灌胃剂量增高血清NP含量升高越显著,P0.05,差异有统计学意义。2、各组雄性大鼠盲肠粘膜组织中NP含量有差异,实验染毒组NP含量较对照组升高,并且各实验染毒组随NP灌胃剂量增高盲肠黏膜组织中NP含量升高越显著,P0.05,差异有统计学意义。3、各组雄性大鼠血清中E2浓度有差异,实验染毒组E2浓度较对照组升高,并且各实验染毒组随NP灌胃剂量增高E2浓度升高越显著,P0.05,差异有统计学意义。4、各组雄性大鼠血清中ER-β蛋白含量有差异,各实验染毒组血清ER-β蛋白含量较对照组降低,并且各实验染毒组随NP灌胃剂量增高ER-β蛋白含量降低越显著,P0.05,差异有统计学意义。5、各组雄性大鼠盲肠黏膜组织中ER-βm RNA表达水平有差异,各实验染毒组ER-βm RNA表达水平较对照组降低,并且各实验染毒组随NP灌胃剂量增高ER-βm RNA表达水平降低越显著,差异有统计学意义,P0.05;各组雄性大鼠盲肠黏膜中ER-β蛋白含量有差异,各实验染毒组ER-β蛋白含量较对照组降低,并且各实验染毒组随NP灌胃剂量增高ER-β蛋白含量降低越显著,差异有统计学意义,P0.05。6、各实验染毒组雄性大鼠血清NP含量与盲肠ER-β蛋白光密度值和ER-βm RNA相对表达量之间均呈现出负相关性(相关系数分别为r=-0.44,r=-0.63),结果均具有统计学意义,P0.05。结论:1、NP可破坏雄性大鼠体内雌激素水平平衡。2、NP发挥其拟雌激素样作用可影响雄性大鼠盲肠黏膜ER-β表达,并下调ER-βm RNA和ER-β表达水平。3、NP对ER-β表达水平下调可能增加了盲肠黏膜恶变风险。
【关键词】：壬基酚 雌激素 盲肠粘膜 雌激素受体β
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R114
【目录】：

• 中英缩略词对照表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 实验材料12-14
• 实验方法14-22
• 结果22-31
• 讨论31-34
• 结论34-35
• 参考文献35-39
• 综述:雌激素受体β与大肠癌研究进展39-47
• 参考文献44-47
• 致谢47-48
• 作者简介48-49

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