秋水仙碱治疗斯氏狸殖吸虫感染大鼠肝脏损伤的分子机制研究

发布时间：2017-07-07 23:13

  本文关键词：秋水仙碱治疗斯氏狸殖吸虫感染大鼠肝脏损伤的分子机制研究

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【摘要】：[目的]建立斯氏狸殖吸虫感染所致的大鼠肝脏损伤模型,研究细胞凋亡与肝脏损伤的分子机制,探讨秋水仙碱治疗后细胞凋亡相关因子的改变,揭示秋水仙碱是否通过抑制细胞凋亡途径缓解肝脏的损伤。[方法]SD大鼠48只,随机分为6组,即正常组,模型组,三氯苯达唑治疗组,秋水仙碱低剂量治疗组,秋水仙碱中剂量治疗组,秋水仙碱高剂量治疗组。除正常组外,每只大鼠腹腔注射10个斯氏狸殖吸虫囊蚴进行感染建立动物模型,正常组腹腔注射等量生理盐水,感染建模8周后,除正常组与模型组外,其余每组按照200mg/kg/d的剂量三氯苯达唑灌胃,连续灌胃4天后,秋水仙碱低剂量治疗组(0.15 mg/kg/d)、秋水仙碱中剂量治疗组(0.20 mg/kg/d)和秋水仙碱高剂量治疗组(0.25 mg/kg/d)秋水仙碱灌胃8周。治疗完成后,各组麻醉处死大鼠,取肝脏组织HE染色判断肝脏损伤程度,QPCR和Western boltting检测细胞凋亡途径相关因子(caspase-3、Bcl-2、Bax、细胞色素C)的表达。[结果]HE染色肝组织病理形态显示：模型组与正常组比较,肝脏细胞水肿变性较为明显,肝细胞浸润较重,肝血窦狭窄,汇管区炎性细胞增多；正常组组与模型组、三氯苯达唑治疗组比较,肝脏细胞水肿变性、浸润减轻,炎性细胞减少；秋水仙碱治疗组中,炎性的病理学特征进一步缓解,存在剂量依赖性。QPCR结果表明：在模型组中,促细胞凋亡的因子caspase-3、细胞色素C和Bax的mRNA的表达较正常组增加,抗细胞凋亡因子bcl-2的表达降低；秋水仙碱治疗后,caspase-3、细胞色素C和Bax的mRNA表达下调,其中caspase-3、细胞色素C的mRNA表达存在剂量依赖性,Bax的mRNA表达与治疗剂量无明显关系,同时bcl-2的mRNA表达上调,具有剂量依赖性。Western Boltting结果揭示：caspase-3、细胞色素C和Bax的蛋白表达在模型组与三氯苯达唑治疗组均高于正常组,bcl-2蛋白的表达低于正常组；秋水仙碱治疗后,caspase-3、细胞色素C和Bax的蛋白的表达较模型组降低,其中caspase-3,细胞色素C在秋水仙碱治疗后中随着治疗剂量的升高,其表达量逐渐降低,Bax在秋水仙碱治疗组中表达量与治疗剂量无明显关系,bcl-2蛋白表达在秋水仙碱治疗中随着治疗剂量的增加而升高。[结论]1.斯氏狸殖吸虫可以导致肝脏炎性反应及肝细胞水肿变性。2.斯氏狸殖吸虫导致肝脏炎性反应可能通过诱导肝细胞的凋亡,从而引起肝脏的损伤。3.三氯苯达唑对斯氏狸殖吸虫导致的肝脏细胞凋亡无明显影响,因此,三氯苯达唑杀虫后进行进一步抗细胞凋亡治疗仍有必要。4.秋水仙碱缓解斯氏狸殖吸虫导致的肝脏损伤与抑制肝细胞凋亡有关。在0.15 mg/kg/d至0.25 mg/kg/d的剂量区间内,其抑制凋亡与剂量呈正相关关系。5.秋水仙碱抑制肝细胞凋亡可能通过抑制线粒体介导细胞凋亡途径。
【关键词】：斯氏狸殖吸虫 细胞凋亡 秋水仙碱 肝脏损伤
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R532.22
【目录】：

• 本文主要英汉缩语对照表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 引言10-12
• 材料与方法12-26
• 结果26-47
• 讨论47-50
• 结论50-51
• 存在问题51-52
• 展望52-53
• 参考文献53-56
• 综述56-64
• 参考文献60-64
• 攻读期间发表文章64-65
• 致谢65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 吕鹏;罗和生;余保平;;大鼠肝纤维化模型中肝细胞凋亡及其调控基因的表达[J];世界华人消化杂志;2001年02期

2 金超;邓勇;樊海宁;王海久;;肝纤维化的研究进展[J];中国现代医药杂志;2011年11期

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本文编号：532212