碘伏冲洗对中枢神经细胞毒性的基础研究

发布时间：2017-07-08 00:17

  本文关键词：碘伏冲洗对中枢神经细胞毒性的基础研究

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【摘要】：目的本基础性实验研究拟通过大鼠的体内试验,探索不同浓度的碘伏对脑组织的细胞毒性,以及稀释后的碘伏在预防及治疗颅内感染中应用的安全性。方法使用60只健康的雄性Wistar大鼠,净重300±10g,将60只大鼠随机分为3组,每组20只,分别标记为0.05%碘伏组、0.025%碘伏组及盐水对照组。用10%水合氯醛对三组大鼠行腹腔麻醉后,行右额开颅(模拟人右额开颅),剪开颅骨,在显微镜下分别剪开各层脑膜,将各组大鼠脑组织暴露出来,面积约1.5cm×1.5cm,分别用浓度为0.05%碘伏、0.025%碘伏及生理盐水反复冲洗大鼠脑皮层表面5分钟,再用盐水反复冲洗脑表面5分钟,用骨腊将骨窗封闭,行切口缝合。将三组Wistar大鼠置于同等条件及环境下饲养14天后,用4%多聚甲醛溶液将三组大鼠的脑组织行灌注,制成蜡块,将蜡块水平横切制成石蜡切片,并行HE染色后,在光镜下观察脑皮层神经细胞的变化;用免疫组化染色方法检测Caspase-3及Cleaved-PARP的表达情况;行TUNEL检测法观察大鼠神经细胞的凋亡状况,对上述各项指标进行统计学分析,研究两种不同浓度的碘伏行脑皮层表面冲洗对大鼠脑神经细胞的细胞毒性。结果用浓度0.05%的碘伏对大鼠脑皮层表面冲洗后14天,可见神经元细胞排列紊乱无序,神经细胞数量减少,间质水肿,可见部分神经元细胞发生凋亡,甚至变性、坏死;用浓度0.025%碘伏冲洗大鼠脑皮层表面后14天,可见神经细胞排列稍紊乱,纹理明显,神经细胞数量稍减少,间质水肿较轻微,可见少数神经元细胞凋亡,未见明显的神经元细胞变性、坏死;在大鼠脑组织表面用生理盐水冲洗后14天,镜下可见大鼠神经元细胞整齐有序的排列,无明显间质水肿,未见神经细胞变性、坏死,极少数神经元细胞凋亡。用两种不同浓度的碘伏冲洗大鼠脑皮层表面后14天,其Caspase-3和Cleaved-PARP的阳性表达率均高于生理盐水组。浓度0.05%碘伏组中大鼠脑组织Caspase-3和Cleaved-PARP表达的阳性率与生理盐水组相比有统计学差异(P0.05),0.025%碘伏组Caspase-3蛋白、Cleaved-PARP阳性表达同生理盐水组无统计学意义(P0.05)。应用TUNEL检测法观察三组大鼠脑皮层组织神经细胞凋亡情况,可见脑细胞间质水肿,胶质细胞、神经元细胞肿胀,发生凋亡的细胞主要是神经元细胞,集中在冲洗区,凋亡细胞在免疫荧光显微镜下呈现明显的绿色荧光,统计各组中TUNEL细胞的阳性率,并对数据进行分析总结:TUNEL细胞阳性率:0.05%碘伏组0.025%碘伏组生理盐水组(P0.05)。结论分别用0.05%、0.025%碘伏及生理盐水对Wistar大鼠脑皮层表面行冲洗后14天,浓度0.05%碘伏可造成大鼠神经元细胞间质水肿,部分细胞发生变性、坏死,部分神经元细胞发生凋亡,这会对大鼠脑组织带来一定的损伤,甚至影响中枢神经功能;浓度0.025%碘伏对大鼠脑皮层细胞的损伤较0.05%碘伏较轻微,在神经外科治疗中,可将浓度0.025%碘伏用于颅内感染的预防及治疗,浓度为0.05%的碘伏对脑神经细胞的损伤较重,可用于治疗严重的颅内感染,如脑脓肿等。由于本次实验仅进行了两组碘伏浓度的研究,且观察时间14天,其他浓度的碘伏溶液对脑组织的损伤及远期影响仍需继续研究探索。
【关键词】：碘伏 细胞毒性 细胞凋亡 颅内感染
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R741
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文缩略表10-11
• 引言11-14
• 第1章 临床研究14-37
• 1.1 材料与方法14-21
• 1.1.1 实验材料14-15
• 1.1.2 实验方法15-20
• 1.1.3 统计学分析20-21
• 1.2 结果21-27
• 1.2.1 光镜下观察经HE染色的大鼠脑皮层细胞的形态学变化21-22
• 1.2.2 免疫组化染色检测各组切片中Caspase-3 和Cleaved-PARP表达情况22-26
• 1.2.3 TUNEL法检测 0.05%碘伏组、0.025%碘伏组及生理盐水组中大鼠脑冲洗区细胞的凋亡情况26-27
• 1.3 讨论27-33
• 1.3.1 碘伏的理化性质及其应用27-29
• 1.3.2 碘伏引起大鼠脑神经元细胞凋亡的机制29-33
• 1.4 结论33-34
• 参考文献34-37
• 第2章 综述37-49
• 2.1 碘伏37-46
• 2.1.1 碘伏的种类37-38
• 2.1.2 碘伏的理化性质38
• 2.1.3 碘伏的杀菌机制38-39
• 2.1.4 碘伏的杀菌效果39
• 2.1.5 碘伏的细胞毒性39-40
• 2.1.6 碘伏消毒剂在临床上的应用40-41
• 2.1.7 碘伏在预防及治疗颅内感染中的应用41-46
• 参考文献46-49
• 结论49-50
• 致谢50-51
• 导师简介51-52
• 作者简介52-53
• 学位论文数据集53

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本文编号：532400