同型半胱氨酸在小鼠高血压脑出血中的作用及机制研究

发布时间：2017-07-31 13:02

  本文关键词：同型半胱氨酸在小鼠高血压脑出血中的作用及机制研究

  更多相关文章： 同型半胱氨酸 高血压脑出血 小鼠 生存曲线 H型高血压 脑出血 叶酸 小鼠 高血压脑出血 血管病变 内弹性膜

【摘要】：目的：心、脑血管疾病已经成为我国的第一大死因,中国现有脑卒中至少700万,脑卒中造成重大健康负担。脑出血是脑卒中的常见类型,霍勇等在07年的研究发现高同型半胱氨酸型高血压约占我国人群的75%,目前关于高同型半胱氨酸血症与缺血性脑卒中关系的研究较多,但针对出血性卒中的研究相对较少,且存在争议。因此本研究在动物水平上直接升高血中同型半胱氨酸水平,以观察同型半胱氨酸对出血性卒中的影响。方法：采用8月龄的雄性C57BL/6小鼠进行实验。本实验总共分为四组：第一组为同型半胱氨酸(Hcy)+血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)；第二组为Hcy+AngⅡ+ N-硝基-L-精氨酸甲酯基精氨酸(L-NAME)组；第三组为AngⅡ+L-NAME组；第四组为AngⅡ组。AngⅡ用来提升小鼠血压,L-NAME为精氨酸合酶抑制剂,用于诱导脑出血的发生。小鼠首先使用含有Hey的水喂养6周,之后后背皮下包埋含有AngⅡ的ALZET微渗透压泵,同时水中喂养L-NAME。Hey浓度为1.8g/L; AngⅡ的浓度为1000ng/kg/min;L-NAME的浓度为100mg/kg/day。在小鼠出现脑卒中的行为学现象时将其麻醉处死,部分小鼠行影像学检查,取大脑和血清保存。饲养时间总共为18周。通过绘制生存曲线来描述同型半胱氨酸与脑卒中的关系。同时采用BP-2000测量小鼠血压；全自动生化分析仪测量小鼠血中Hcy浓度；MR监测小鼠的出血位点位置；利用HE染色测量小鼠出血面积；利用免疫组化染色计算出血位点血管的平滑肌细胞个数。结果：小鼠喂养Hcy 6周后血清中Hcy浓度升高到23.07umol/L,18周后小鼠血清中平均Hcy浓度为41.51umol/L;血压在170-180mmHg之间。各组间小鼠因脑出血死亡的个数为：Hey+AngⅡ组2只;Hcy +AngⅡ+ L-NAME组10只；AngⅡ+ L-NAME组10只;AngⅡ组0只。Hey+AngⅡ+L-NAME组与AngⅡ+ L-NAME组的生存曲线p值为0.162。AngⅡ+Hcy+L-NAME组与AngⅡ+L-NAME组没有差异,提示同型半胱氨酸对脑出血的发生也没有促进作用。结论：结果显示高同型半管氨酸对高血压小鼠脑出血的发生没有影响。目的：H型高血压约占我国成年高血压患者的75%,高水平的血浆同型半胱氨酸(Hcy)是心脑血管疾病的独立危险因素。现有研究表明,通过服用叶酸降低同型半胱氨酸水平能够降低脑卒中的发病率,但对单纯的出血性脑卒中的作用存在争议。因此,本研究在动物水平上探讨叶酸是否能够降低出血性脑卒中的风险。方法：八个月的C57BL/6小鼠分为H型高血压脑出血组(20只)和H型高血压脑出血+叶酸组(17只)。在小鼠出现脑卒中行为学现象时将小鼠处死取血和大脑组织保存并进行HE染色及免疫组化染色确定小鼠的出血位点。18周后将所有小鼠处死,通过SPSS19.0分析小鼠的K-M曲线对比两组之间的关系。结果：通过行为学及最终的病理检测,发现H型高血压组10只死于脑出血,H型高血压+叶酸组13只死于脑出血。经过生存曲线对比H型高血压组和H型高血压+叶酸组发现两组之间没有差异,p=0.127。结论：叶酸不能降低H型高血压小鼠发生出血性脑卒中的风险。目的：高血压脑出血是脑卒中的常见类型,尽管其发病率较缺血性卒中低,但其发病凶险,预后较差,目前对高血压条件下脑血管病理改变并导致出血知之甚少,本研究拟通过高血压脑出血小鼠模型研究高血压脑出血血管病变机制。方法：将8个月的雄性C57BL/6小鼠分为两组,一组高血压脑出血组,另一组是正常对照组,每组10只。在小鼠出现脑卒中行为学现象时将小鼠处死并将大脑组织保存,制作石蜡切片。采用HE染色确定出血位点,采用弹力纤维染色观察出血部位血管的结构及病理变化。结果：经HE染色找出出血位点,在脑出血组中共发现14个出血位点,选择出血位点旁边切片进行弹力纤维染色。搜索出血血管及其附近的10个血管。再脑出血中找到140个血管,对照组中相同位置的140个血管。经弹力纤维染色发现脑出血部位血管存在破裂,内弹性膜出现拉直、张力消失以及内弹性膜部分缺失的现象；同时,也发现了血管壁向内破裂,导致假腔存在的现象。结论：本研究发现弹性内膜的变化可能与高血压小鼠脑出血的发生相关。
【关键词】：同型半胱氨酸 高血压脑出血 小鼠 生存曲线 H型高血压 脑出血 叶酸 小鼠 高血压脑出血 血管病变 内弹性膜
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R743.34
【目录】：

• 第一部分 高同型半胱氨酸血症并未增加高血压小鼠脑出血风险5-30
• 中文摘要5-6
• Abstract6-8
• 前言8
• 研究对象和方法8-17
• 一、研究对象8
• 二、实验材料8-11
• 三、实验方法11-17
• 研究结果17-23
• 一、小鼠脑出血模型构建成功17-18
• 二、血清同型半胱氨酸的浓度18
• 三、小鼠血压和体重18-19
• 四、小鼠死亡情况及生存曲线19-21
• 五、出血位点数量和出血面积21-22
• 六、出血部位血管平滑肌细胞数量22-23
• 讨论23-25
• 参考文献25-30
• 第二部分 叶酸对H型高血压小鼠脑出血的影响30-39
• 中文摘要30-31
• Abstract31-32
• 1 引言32
• 2 材料和方法32-33
• 2.1 实验动物32-33
• 2.2 H型高血压的形成33
• 2.3 实验方案33
• 2.4 同型半胱氨酸浓度测定33
• 2.5 血压测量33
• 2.6 样本采集33
• 2.7 出血检测33
• 2.8 统计分析33
• 3 实验结果33-35
• 3.1 同型半胱氨酸和叶酸浓度33
• 3.2 小鼠血压33-34
• 3.3 小鼠脑出血34-35
• 4 讨论35-37
• 参考文献37-39
• 第三部分 高血压小鼠脑出血血管内弹性膜的病理结构变化39-47
• 中文摘要39-40
• Abstract40-41
• 引言41
• 1 材料和实验方法41-43
• 1.1 实验动物41
• 1.2 实验方法41
• 1.3 血压测量41
• 1.4 样本采集41
• 1.5 出血检测41-42
• 1.6 病理检测42-43
• 2 实验结果43-44
• 3 讨论44-45
• 参考文献45-47
• 综述 脑出血基因多态性的研究进展47-61
• 引言49
• 1 凝血功能相关基因与脑出血49-50
• 2 脂蛋白相关基因50
• 3 血管重塑相关基因50-51
• 4 氧化还原反应相关基因51
• 5 炎症反应相关基因51-52
• 6 蛋白-受体相关基因52-53
• 7 GWAS研究与脑出血相关基因53
• 8 其他相关基因多态性53
• 9 小结与展望53-55
• 参考文献55-61
• 缩略词表61-64
• 致谢64-66
• 个人简历66-67

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 万和斌,殷瑞和,刘景萍;微侵袭治疗大出血量高血压脑出血32例报道[J];临床荟萃;2000年21期

2 张应春,徐圣奎;微创颅内血肿清除术治疗高血压脑出血(附32例报告)[J];临床荟萃;2000年23期

3 刘中洪,孙李法,黄鼎孝;高血压脑出血87例手术治疗[J];中国医师杂志;2000年S1期

4 刘伟英;高血压脑出血微创治疗的护理[J];山东医药;2001年12期

5 黄载文,曹传伟,宁世金;微创颅内血肿清除术治疗中重型高血压脑出血35例[J];中国神经精神疾病杂志;2001年03期

6 陈晓雷,耿军,陈硕朗;联合评分在高血压脑出血预后的评估及手术指征探讨中的应用[J];广州医学院学报;2001年03期

7 蒲智,龚措杰,薛松,吴科学;西藏高血压脑出血外科治疗的现状[J];西藏医药杂志;2001年02期

8 刘培英,王勇;外科治疗高血压脑出血临床体会[J];中华神经外科杂志;2002年03期

9 杨桐,苏平,徐全;高血压脑出血死亡因素分析[J];黑龙江医学;2002年08期

10 李党明,杨凯;微创颅内血肿清除术治疗高血压脑出血19例疗效分析[J];河南实用神经疾病杂志;2002年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 赵斌;;颅内血肿微创穿刺粉碎清除术治疗高血压脑出血25例[A];第二十五届航天医学年会暨第八届航天护理年会论文汇编[C];2009年

2 佘晓春;;高血压脑出血穿颅清除术41例临床体会[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

3 朱军;刁兴涛;王泉相;;高血压脑出血治疗研究[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

4 刘国栋;兰青;;各种手术治疗高血压脑出血的疗效分析[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

5 师林;;高血压脑出血患者死亡高危因素分析[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

6 曾素英;;微创颅内血肿清除术治疗高血压脑出血的护理体会[A];全国门、急诊护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2003年

7 肖莉;张志华;卓衍华;谭光林;焦林;杜平;;急诊绿色通道在抢救高血压脑出血患者中的价值[A];第十一次全国急诊医学学术会议暨中华医学会急诊医学分会成立二十周年庆典论文汇编[C];2006年

8 谢平;曾建辉;;微创颅内血肿清除术治疗高血压脑出血[A];农村中医药适宜技术交流及推广研讨会论文集[C];2006年

9 徐学华;黄财恕;林承怀;;高血压脑出血的外科治疗(附61例报告)[A];中国医师协会神经外科医师分会第二届全国代表大会论文汇编[C];2007年

10 陶春潮;栾国平;;高血压脑出血的外科治疗[A];中国医师协会神经外科医师分会第二届全国代表大会论文汇编[C];2007年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 匡远深;微创治疗高血压脑出血论文在美获奖[N];中国医药报;2009年

2 本报记者 慕欣;高血压脑出血：血量过多应手术[N];医药经济报;2011年

3 健康时报记者 冯丽安;高血压脑出血可手术[N];健康时报;2008年

4 陈汉桥;重型高血压脑出血治疗有新方法[N];中国医药报;2002年

5 袁俊荣;高血压脑出血多由不按时服药引起[N];大众卫生报;2004年

6 刘春谊;社区家庭病床治疗高血压脑出血[N];农村医药报（汉）;2008年

7 记者匡远深;显微术碎吸术治高血压脑出血有优势[N];健康报;2009年

8 承德市中心医院神经外科副主任 主任医师 教授 武焕颖;高血压脑出血的外科治疗[N];承德日报;2011年

9 陈琳 黄红云;高血压脑出血 可选置管引流[N];健康报;2006年

10 陈茂梁 徐世伟;脑室镜下治疗脑出血[N];中国医药报;2001年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 苗旺;雌激素对高血压脑出血患者内皮祖细胞的影响及其机制研究[D];中南大学;2008年

2 蒋永祥;弥散张量成像技术在基底节区高血压脑出血患者预后评估中的应用研究[D];重庆医科大学;2012年

3 陈现红;高血压脑出血临床回顾性分析及其脑水肿发生机制研究[D];第一军医大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王伟功;两种微创手术治疗基底节区高血压脑出血的疗效对比及与血清NSE相关性研究[D];福建中医药大学;2015年

2 杨凯;不同手术方式及手术时机治疗高血压脑出血的研究[D];泰山医学院;2014年

3 张艳利;TNF-α、VEGF及ET-1在高血压脑出血血肿周围脑组织中的表达及其相关性的研究[D];河北医科大学;2015年

4 唐黎;石河子市高血压脑出血流行病学特征及预后相关因素研究[D];石河子大学;2015年

5 田宝刚;弥散张量成像技术在基底节区高血压脑出血预后评估中的初步应用研究[D];河北医科大学;2015年

6 尹立山;UCH-L1、GFAP和MMP-9对高血压脑出血临床意义的研究[D];兰州大学;2015年

7 李克和;手术方式和手术时机的选择对不同部位高血压脑出血患者预后影响的临床研究[D];安徽医科大学;2015年

8 王乃超;高血压脑出血神经行为、影像及血清蛋白谱分析[D];昆明医科大学;2015年

9 张宏兵;高血压脑出血手术方式选择的临床研究[D];第四军医大学;2015年

10 周晋;微创双管置入治疗高血压脑出血的临床评价[D];华北理工大学;2015年

，

本文编号：599261