生肌白玉膏对大鼠深Ⅱ度烫伤创面bFGF及TGF-β1表达的影响
本文关键词：生肌白玉膏对大鼠深Ⅱ度烫伤创面bFGF及TGF-β1表达的影响
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【摘要】：目的:通过观察生肌白玉膏对大鼠深Ⅱ度烫伤创面模型碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1),以及对烫伤大鼠创面修复的影响,研究生肌白玉膏在促进烫伤创面愈合中的作用及其作用机制。方法:SPF级健康SD大鼠128只,雌雄各半,适应性喂养1周后,对大鼠称重,按随机数字表分为空白组、模型组、药物对照组、实验组,每组32只;于烫伤前一天,大鼠背部剪毛、用普通脱毛膏脱毛1处,面积约为4cm×4cm大小,清水洗净,擦干。实验前大鼠禁食12小时,自由饮水。模型组、药物对照组及实验组(除空白组外)均按300 mg/kg腹腔注射水合氯醛(10%)以麻醉大鼠,然后将大鼠背部放至100℃的恒温水浴锅蒸气孔中保持5 s,经病理证实可造成深Ⅱ度烫伤。实验组造模后创面立即外敷生肌白玉膏1.0 g;药物对照组的创面外敷1.0 g美宝湿润烧伤膏,模型组只外用0.9%Na Cl(生理盐水);三组均按照1次/d定时换药,一直给药到处死前1 d;空白组大鼠则正常饲养,不施以任何的处理。共治疗3周,在造模后第3 d、第7 d、第14 d以及第21 d,分别观察与记录空白组与各实验组的创面愈合情况。采用图像分析软件测量各组的创面面积。取下创面的肉芽组织,制作组织石蜡切片,然后以HE法进行染色,并病理学观察。采用SABC免疫组化法测定各实验组创面的组新生肉芽组织中b FGF及TGF-β1的表达量并进行统计学分析。结果:实验结果表明,造模后,在第3 d、第7 d、第14 d以及第21 d,各组实验大鼠的创面面积均呈明显的减小趋势;生肌白玉膏组及美宝湿润烧伤膏组的创面收缩率在相同时间点内可见均明显地高于模型对照组,差异具有统计学意义(P0.01),生肌白玉膏组与美宝湿润烧伤膏组的创面愈合率则无明显差异(P0.05)。造模后第3 d,3组实验大鼠的伤口均主要表现为渗出及充血,较少见肉芽组织增生;造模后第7d,模型组大鼠未见明显毛细血管及上皮增生。生肌白玉膏组及美宝湿润烧伤膏组见大量毛细血管增生,有增生的成纤维细胞,见少量炎性细胞浸润,胶原开始形成,上皮细胞见少量增生。美宝湿润烧伤膏组同样见大量毛细血管、成纤维细胞增生,上皮细胞增生不明显。造模后第14 d及第21 d,模型组见形成少量肉芽组织,上皮细胞增生,较少见纤维细胞、胶原纤维排列的不规则。生肌白玉膏组、美宝湿润烧伤膏组可见肉芽组织形成较多,胶原形成明显纵行排列状,上皮细胞及成纤维细胞增生明显。造模后第3 d,3组实验大鼠的皮肤创面的肉芽组织中b FGF表达量基本相当,其差异不是很大,且有较高程度的阳性表达,呈(++)。造模后第7 d,模型组大鼠b FGF的阳性表达量开始下降,呈(+),而在生肌白玉膏组、美宝湿润烧伤膏组均有所上升,呈(+++)。造模后第14 d及第21 d,3组实验大鼠的b FGF的阳性表达量均呈下降趋势,模型组表达呈(㧟~+),但生肌白玉膏组、美宝湿润烧伤膏组b FGF的表达呈(+),但仍高于模型组。生肌白玉膏组、美宝湿润烧伤膏组与模型组比较均存在显著差异(P0.01),美宝湿润烧伤膏组与生肌白玉膏组比较结果无显著差异(P0.05)。造模后第3 d,3组实验大鼠皮肤创面肉芽组织中TGF-β1的表达量差异不大,水平大致相当,但均呈较高程度的阳性表达,呈(++)。造模后第7 d,模型组大鼠皮肤创面肉芽组织中TGF-β1的阳性表达量开始下降,呈(+),而生肌白玉膏组、美宝湿润烧伤膏组则均有所上升,呈(+++),且2组大鼠的TGF-β1阳性表达量均明显高于模型组。造模后第14 d及第21 d,3组实验大鼠皮肤创面肉芽组织中TGF-β1的阳性表达量均呈下降趋势,模型组表达呈(㧟~+),但生肌白玉膏组、美宝湿润烧伤膏组TGF-β1的表达呈(+),但仍高于模型组。生肌白玉膏组、美宝湿润烧伤膏组与模型组比较均存在显著差异(P0.01),美宝湿润烧伤膏组与生肌白玉膏组比较结果无显著差异(P0.05)。结论:(1)生肌白玉膏有明显的促进创面愈合作用,其能提高愈合速度,改善愈合质量,效果与美宝湿润烧伤膏相当;(2)生肌白玉膏促进创面愈合的机理可能与其调节皮肤创面组织中b FGF及TGF-β1的表达有关。
【关键词】：生肌白玉膏 深Ⅱ度烫伤 创面愈合 bFGF TGF-β1
【学位授予单位】：甘肃中医药大学(原名：甘肃中医学院)
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：
- 摘要6-8
- ABSTRACT8-10
- 缩略词表10-11
- 前言11-12
- 第一部分 立题依据12-22
- 1 现代医学在创面治疗方面的最新研究进展12-18
- 1.1 现代医学对创伤愈合过程的认识12-14
- 1.2 现代医学对创伤愈合类型的认识14
- 1.3 现代医学对影响创面愈合因素的认识14-15
- 1.4 现代医学促进创面愈合的治疗现状15-18
- 2 中医学对创面修复的研究现状18-22
- 2.1 创伤病因的认识18
- 2.2 创伤病机的认识及治疗原则18-19
- 2.3 中药对创面修复的治疗现状19-22
- 2.3.1 中药促进创面愈合的作用机理研究19-20
- 2.3.2 中药方剂在创面愈合中的应用20-22
- 第二部分 实验研究22-33
- 第一章 大鼠深II度烫伤模型的制备22-24
- 1 大鼠深II度烫伤模型制备的方法22
- 2 材料与方法22-23
- 2.1 实验材料22
- 2.1.1 实验动物22
- 2.1.2 实验物品22
- 2.2 实验方法22-23
- 2.2.1 脱毛22-23
- 2.2.2 烫伤装置23
- 2.2.3 烫伤实施23
- 2.2.4 标本采集及病理检查23
- 3 结果23-24
- 第二章 实验研究24-33
- 1 实验材料24-25
- 1.1 实验动物24
- 1.2 实验药物24
- 1.3 试剂和仪器24-25
- 1.4 实验环境25
- 2 实验方法25-27
- 2.1 生肌白玉膏的制备25
- 2.2 实验分组25
- 2.3 给药25
- 2.4 取材25
- 2.5 组织切片制备25-26
- 2.5.1 固定与包埋25
- 2.5.2 HE常规组织学染色25-26
- 2.5.3 免疫组化染色26
- 2.6 观察指标与分析方法26-27
- 2.6.1 创面大体观察26-27
- 2.6.2 创面愈合率27
- 2.6.3 组织学观察27
- 2.6.4 创面肉芽组织中bFGF、TGF-β1 的阳性细胞的判断与检测27
- 3 数据的统计学处理27-28
- 4 实验结果28-32
- 4.1 各组创面愈合基本情况观察28
- 4.2 创面愈合率28-29
- 4.3 组织学光镜观察29
- 4.4 创面肉芽组织中bFGF、TGF-β1 水平的检测29-32
- 4.4.1 创面肉芽组织中bFGF水平检测29-31
- 4.4.2 创面肉芽组织中TGF-β1 水平检测31-32
- 5 结论32-33
- 第三部分 讨论33-37
- 1 生肌白玉膏方解33-34
- 2 生肌白玉膏对创面愈合的作用34
- 3 bFGF促进创面愈合的机理34-35
- 4 TGF-β1 促进创面愈合的机理35-37
- 第四部分 结语与展望37-38
- 1 结语37
- 2 存在的问题及展望37-38
- 参考文献38-46
- 在学期间表论文目录46-47
- 致谢47-48
- 附录48-52
- 附图 148-49
- 附图 249-50
- 附图 350-51
- 附图 451-52
- 附图 552
【参考文献】
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，本文编号：689869
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