泄浊解毒、活血通络中药对糖尿病肾病大鼠的肾保护作用及对肾组织PKC和TGF-β1的影响

发布时间：2017-08-21 13:15

  本文关键词：泄浊解毒、活血通络中药对糖尿病肾病大鼠的肾保护作用及对肾组织PKC和TGF-β1的影响

  更多相关文章： 泄浊解毒-活血通络中药 糖尿病肾病 Real-Time PCR 免疫组化 PKC TGF-β1

【摘要】：目的:本研究应用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)复制糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠模型,给予泄浊解毒、活血通络中药及厄贝沙坦对该模型进行干预,通过观察大鼠的尿蛋白、生化指标、肾脏病理形态学变化及肾组织蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达水平,来探讨泄浊解毒、活血通络中药的肾保护作用及可能机制。方法:健康雄性SD大鼠85只,体重160-180g,适应性饲养一周,测定血糖和尿蛋白均为阴性后,随机选取15只为正常组(NG),其余70只为造模组。正常组予以普通饲料喂养,造模组予以高糖高脂饲料喂养,12周后造模组给予腹腔注射STZ35mg/kg,正常组大鼠予以腹腔注射相应剂量的枸橼酸缓冲液。72小时后尾静脉测随机血糖≥16.7mmol/L为模型复制成功,死亡和血糖不达标的大鼠予以剔除。模型复制成功的大鼠随机分为模型组(MG)17只、中药组(ZG)17只、西药组(XG)17只、加方组(中药联合西药组)(JG)16只。治疗组予相应药物溶液灌胃,正常组与模型组予相当量的生理盐水,共给药16周。分别于给药期间第4周、8周、12周末测体重、血糖及尿蛋白。于给药第16周末,留取大鼠24小时尿液,测定24小时尿蛋白定量,动物麻醉状态下腹主动脉取血检测生化指标,摘取右侧肾脏并称重,留取肾脏标本进行光镜、电镜、免疫组化和Real-Time PCR观测。结果:1各组大鼠的体重、右肾重及肾脏肥大指数KI(kidney hypertrophy index)(KI=右肾重/体重)与正常组相比,各治疗组和模型组体重显著减轻(P0.05),模型组与各治疗组相比体重无明显差异(P0.05);各组大鼠的右肾重无显著差异(P0.05);各组大鼠的肾脏肥大指数比较,模型组和各治疗组明显高于正常组(P0.05),模型组与各治疗组相比没有明显差异(P0.05)。2各组大鼠的24 h尿蛋白定量(UTP)各治疗组和模型组的24 h尿蛋白定量比正常组明显升高(P0.05),各治疗组比模型组明显降低(P0.05);各治疗组之间比较,加方组的24 h尿蛋白定量比中药组和西药组降低(P0.05);中药组和西药组相比无明显差异(P0.05)。3各组大鼠的血清总蛋白(TP),白蛋白(ALB)比较各治疗组和模型组血清总蛋白和白蛋白比正常组均降低(P0.05),各治疗组的血清总蛋白和白蛋白比模型组明显升高(P0.05);各治疗组之间比较,加方组血清总蛋白和白蛋白比中药组和西药组升高(P0.05);中药组和西药组相比无明显差异(P0.05)。4各组大鼠血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)的比较各治疗组和模型组的TC,TG比正常组显著升高(P0.05),各治疗组的TC,TG比模型组明显降低(P0.05);各治疗组之间比较,加方组的TC,TG低于中药组和西药组(P0.05);中药组和西药组相比无明显差异(P0.05)。5各组大鼠血肌酐(Scr),尿素氮(BUN)的比较正常组、模型组、西药组、中药组及加方组之间大鼠的血清肌酐和尿素氮水平无明显差异(P0.05)。6各组大鼠糖化血红蛋白(Hb A1c)的比较各治疗组和模型组的的糖化血红蛋白水平比正常组明显升高(P0.05),加方组和中药组的糖化血红蛋白水平低于西药组和模型组(P0.05),加方组和中药组相比无明显差异(P0.05),模型组和西药组之间无明显差异(P0.05)。7肾脏病理形态学观察7.1光镜观察正常组大鼠肾小球结构完整清晰,未见明显肥大,肾小球毛细血管基底膜无增厚,系膜组织无增生,基质无明显改变。模型组大鼠肾小球肥大,基底膜明显增厚,系膜基质增多。与正常组相比,各治疗组大鼠肾小球均有程度不同的病理改变,程度较模型组轻。各治疗组之间相比无明显差别。7.2电镜观察正常组大鼠的肾小球毛细血管基底膜均匀无增厚,结构清晰,足突分布均匀、无融合;模型组大鼠的肾小球毛细血管基底膜增厚,内皮细胞明显增生,伴有足突广泛融合。各治疗组出现程度不同的病理改变,较模型组为轻。各治疗组之间相比无明显差别。8大鼠肾组织TGF-β1 m RNA表达情况的比较与正常组相比,各治疗组和模型组TGF-β1m RNA的表达明显增加(P0.05);与模型组相比,各治疗组TGF-β1m RNA的表达均明显降低(P0.05);各治疗组之间比较,加方组TGF-β1m RNA的表达低于中药组和西药组(P0.05),中药组和西药组相比无明显差异(P0.05)。9免疫组化染色法检测肾组织PKC、TGF-β1表达PKC、TGF-β1在正常组、模型组和各治疗组中均有表达,两者表达部位均主要位于肾小管上皮细胞,而在肾小球内只有少量表达或基本无表达。与正常组相比,各治疗组和模型组PKC、TGF-β1的表达明显增加(P0.05);与模型组相比,各治疗组PKC、TGF-β1的表达均明显降低(P0.05);治疗各组间比较,加方组PKC、TGF-β1的表达低于中药组和西药组(P0.05),中药组和西药组相比无明显差异(P0.05)。结论:1泄浊解毒、活血通络中药可以降低大鼠尿蛋白排泄及血糖、血脂水平,提高血清总蛋白、白蛋白水平,减轻肾脏病理改变,延缓DN病理的进展。2泄浊解毒、活血通络中药可以有效抑制DN基底膜增厚及系膜基质增生,从而保护肾脏,其机制可能与抑制肾组织PKC、TGF-β1过度表达有关。3泄浊解毒、活血通络中药与厄贝沙坦疗效相当,联合应用效果更佳。
【关键词】：泄浊解毒-活血通络中药 糖尿病肾病 Real-Time PCR 免疫组化 PKC TGF-β1
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 英文缩写11-12
• 前言12
• 材料与方法12-20
• 结果20-23
• 附图23-36
• 附表36-41
• 讨论41-46
• 结论46-47
• 参考文献47-51
• 综述 TGF-β1与糖尿病肾病的关系及中医药研究进展51-57
• 参考文献55-57
• 致谢57-58
• 个人简历58

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郑亚萍;刘春杰;;赤芍对早期糖尿病肾病大鼠肾脏AngⅡ、ET-1、PKC及TGF-β_1的影响[J];当代医学;2012年23期

2 黄敏,唐德q，

本文编号：713081