8周中等强度运动对肥胖大鼠白色脂肪自噬的影响

发布时间：2017-08-22 04:10

  本文关键词：8周中等强度运动对肥胖大鼠白色脂肪自噬的影响

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【摘要】：研究目的：观察8周中等强度运动对肥胖大鼠白色脂肪组织自噬水平的影响,探讨运动促进脂肪分解的可能机制。研究方法：选取3周龄SPF级雄性SD大鼠,经8周适应性喂养,得11周龄肥胖大鼠20只,及同龄对照组大鼠20只。肥胖组及对照组都分为运动干预组和安静组,每组10只,运动干预组干预强度为60%-70%V02max。其中肥胖组在干预期间继续喂食高脂饲料(D12451),而对照组继续喂食标准对照饲料(D12450B)。运动组在适应性训练3天后,进行最大摄氧量测试,并根据测试结果制定第1周和第2周的训练强度。运动组每周训练5天,每天60分钟。在第2周训练结束后再对大鼠进行最大摄氧量测试,并根据测试结果制定第3周与第4周的训练方案,并以此类推。每周6下午测量大鼠体重。在第7周训练结束后测试大鼠体成分。最后一周训练结束后48h麻醉后取腹主动脉血、附睾周白色脂肪、肾周白色脂肪。Western blot测试附睾周、肾周白色脂肪LC3Ⅱ LAMP2、Beclinl蛋白表达。RT-qPCR测试附睾周、肾周白色脂肪LC3Ⅱ、LAMP2、 Beclinl的mRNA表达。研究结果：1、经过8周干预,肥胖运动组大鼠体重显著性低于肥胖安静组(p0.01),而对照运动组与对照安静组体重没有显著性差异；2、肥胖安静组附睾周与肾周白色脂肪LC3Ⅱ、Beclinl蛋白表达低于对照安静组,而LAMP2显著性低于对照安静组(p0.05),附睾周与肾周白色脂肪LC32Ⅱ、LAMP2、Beclinl的mRNA表达都低于对照安静组,但是没有显著性差异；3、肥胖安静组附睾周与肾周白色脂肪LC3Ⅱ、LAMP2蛋白表达显著性低于肥胖运动组(p0.05),而肥胖安静组附睾周与肾周白色脂肪LC3Ⅱ、LAMP2、Beclinl的mRNA表达都低于肥胖运动组；4、对照安静组附睾周与肾周白色脂肪LC3Ⅱ、LAMP2、Beclinl蛋白表达低于对照运动组,但没有显著性差异。研究结论：8周高脂饮食能够显著降低肥胖安静大鼠腹部白色脂肪自噬活性,而8周中等强度运动干预能够提高肥胖大鼠腹部白色脂肪自噬活性。
【关键词】：运动 肥胖 自噬 脂肪耗失 高脂饮食
【学位授予单位】：北京体育大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：G804.2
【目录】：

• 摘要5-6
• abstract6-10
• 1 前言10
• 2 文献综述10-24
• 2.1 自噬10-13
• 2.1.1 自噬的分类与功能10-12
• 2.1.1.1 自噬的分类10-11
• 2.1.1.2 自噬的功能11-12
• 2.1.2 细胞自噬与细胞凋亡12
• 2.1.3 细胞自噬的检测12-13
• 2.2 脂肪耗失13-20
• 2.2.1 脂滴(LDs)14-15
• 2.2.2 脂肪耗失15-20
• 2.2.2.1 脂肪耗失调控机制15-16
• 2.2.2.2 脂肪耗失过程特殊标记物16-19
• 2.2.2.2.1 Beclin117-18
• 2.2.2.2.2 LAMP-218
• 2.2.2.2.3 LC318-19
• 2.2.2.3 脂质对脂肪耗失的调节作用19-20
• 2.3 运动与自噬20-23
• 2.3.1 运动与骨骼肌细胞自噬20-22
• 2.3.2 运动与脂肪细胞自噬22-23
• 2.4 选题依据23-24
• 3 研究对象与方法24-34
• 3.1 研究对象与分组24-25
• 3.2 运动方案25
• 3.3 最大摄氧量测试25-26
• 3.4 体成分测试26
• 3.5 取材26-27
• 3.6 测试指标及方法27-33
• 3.6.1 血脂四项27
• 3.6.2 Westem blot法测试脂肪组织LC3、LAMP2、Beclinl 相对表达量27-29
• 3.6.2.1 组织蛋白液提取27
• 3.6.2.2 组织蛋白总蛋白量测定27-28
• 3.6.2.3 Western blot实验28-29
• 3.6.2.4 Western blot实验所用试剂29
• 3.6.3 RT-qPCR基因测定29-33
• 3.6.3.1 引物设计29-30
• 3.6.3.2 总RNA提取30-31
• 3.6.3.3 DNase I处理31
• 3.6.3.4 反转录31
• 3.6.3.5 Real-time PCR31-32
• 3.6.3.6 RT-qPCR所用试剂32-33
• 3.6.3.7 实验结果分析33
• 3.6.4 主要实验仪器33
• 3.7 统计方法33-34
• 4 研究结果34-40
• 4.1 8周中等强度运动干预对大鼠体重的影响34-35
• 4.2 7周中等强度运动干预对大鼠体成分影响35
• 4.3 8周中等强度运动对肥胖组和对照组血脂四项影响35-36
• 4.4 Western blot实验结果36-38
• 4.4.1 8周中等强度干预对附睾周白色脂肪自噬相关蛋白表达量的影响36-37
• 4.4.2 8周中等强度干预对大鼠肾周白色脂肪自噬相关蛋白表达量的影响37-38
• 4.5 RT-qPCR实验结果38-40
• 4.5.1 8周中等强度干预对睾周白色脂肪自噬相关基因表达的影响38-39
• 4.5.2 8周中等强度干预对肾周白色脂肪自噬相关基因表达量的影响39-40
• 5 分析讨论40-45
• 5.1 中等强度运动干预对大鼠体重及体成分的影响40-41
• 5.2 8周中等强度运动干预对大鼠血脂的影响41-42
• 5.3 8周中等强度运动干预对大鼠白色脂肪自噬活性的影响42-45
• 5.3.1 高脂膳食对大鼠白色脂肪自噬的影响42-43
• 5.3.2 8周中等强度运动对大鼠白色脂肪自噬的影响43-45
• 6 结论45-46
• 致谢46-47
• 参考文献47-54
• 附录54-58
• 个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果58

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本文编号：716958