维生素D对烟草致癌物诱发肺癌发生影响的实验研究

发布时间：2017-09-02 05:25

  本文关键词：维生素D对烟草致癌物诱发肺癌发生影响的实验研究

  更多相关文章： 肺癌 肺癌模型 维生素D 环氧合酶2 人骨形态发生蛋白2

【摘要】：目的探讨维生素D对烟草致癌物诱发肺癌发生的影响方法1采取灌胃的方式给予Balb/c小鼠补充维生素D。维生素D以无水乙醇作为溶剂,最终乙醇浓度为5%。实验分为空白组(补充5%的乙醇溶剂)、10IU维生素D组(补充维生素D10IU/kg/d)、20IU维生素D组(补充维生素D20IU/kg/d)、40IU维生素D组(补充维生素D40IU/kg/d)。4周后,化学发光法检测血清维生素D。2免疫组化检测骨形态发生蛋白2(BMP-2)和环氧合酶2(COX-2)在人体肺癌和癌旁组织中的表达。3用NNK 100mg/kg一次腹腔注射A/J小鼠建立肺癌模型。NNK以生理盐水为溶剂。维生素D以无水乙醇作为溶剂,最终乙醇浓度为5%。在注射NNK前一周开始给予不同干预,直到实验结束。实验分为空白组(腹腔注射生理盐水+补充5%的乙醇溶剂)、NNK组(腹腔注射NNK+补充5%的乙醇溶剂)、20IU维生素D干预组(腹腔注射NNK+补充维生素D20IU/kg/d)、40IU维生素D干预组(腹腔注射NNK+补充维生素D40IU/kg/d)。注射NNK后16周,麻醉状态下,眼球取血,检测血清维生素D和钙。对小鼠肺部肿瘤进行计数,计算肺癌发病率和发病数。对胃、肝、肾、肺等脏器进行HE染色,行病理分析。免疫组化检测小鼠肺肿瘤BMP-2和COX-2蛋白的表达。4用B(a)P50mg/kg/次灌胃Balb/c小鼠,一周两次,连续五周,共计10次,建立肺癌模型。B(a)P以橄榄油为溶剂。实验分为空白组(灌胃橄榄油+补充5%的乙醇溶剂)、B(a)P组(灌胃B(a)P+补充5%的乙醇溶剂)、20IU维生素D干预组(灌胃B(a)P+补充维生素D20IU/kg/d)、40IU维生素D干预组(灌胃B(a)P+补充维生素D40IU/kg/d)。第一次给予B(a)P后30周统一处死小鼠。检测指标同3。结果1维生素D喂饲4周后,小鼠血清维生素D有所上升。空白组、10、20、40IU维生素D组血清维生素D(ng/ml)分别为7.24±0.22、7.82±0.33、8.98±0.56、12.04±1.98。2 BMP-2和COX-2蛋白均在细胞质中表达。BMP-2在肺癌组织中的阳性表达率为77.8%(35/45),在癌旁组织中无表达(0/12)；COX-2在肺癌组织中的阳性表达率为71.1%(32/45),癌旁组织中阳性表达率为8.3%(1/12)。3 NNK组、20IU维生素D干预组、40IU维生素D干预组A/J小鼠肺癌发病率均为100%,肺癌发病数分别为1.80+0.84、1.60±0.89、1.60±0.55(p0.05)。各组均未见高钙血症和小鼠肾脏损伤。与NNK组相比40IU维生素D干预组和20IU维生素D干预组的体重增长受到抑制(p0.05)；肺癌组织中BMP-2、COX-2蛋白的表达由高到低分别为NNK组、20IU维生素D干预组、40IU维生素D干预组(p0.05)。4 B(a)P组、20IU维生素D干预组、40IU维生素D干预组Balb/c小鼠肺癌发病率均为100%,肺癌发病数分别为11.90±2.77、5.40+1.90、2.404-1.35(p0.05)。与B(a)P组相比40IU维生素D干预组和20IU维生素D干预组的体重增长受到抑制(p0.05)；肺癌组织中BMP=2、COX-2蛋白的表达由高到低分别为B(a)P组、20IU维生素D干预组、40IU维生素D干预组(p0.05)。结论1经胃肠道给予小鼠补充维生素D是一种安全有效的方法。2 BMP-2和COX-2蛋白在肺癌组中表达增高,进一步研究两者在肺癌中的作用对于肺癌的防治具有重要意义。3维生素D(20IU/kg/d)、40IU/kg/d)对NNK诱发A/J小鼠肺癌的发病率和发病数没有影响,但是维生素D能抑制BMP-2和COX-2在肺癌中的表达。说明维生素D在不影响肿瘤发病率和发病数的情况下,仍然能通过抑制肿瘤标记物的表达而发挥抑癌作用。4维生素D(20IU/kg/d)、40IU/kg/d)对B(a)P诱发Balb/c小鼠肺癌的发病率没有影响,但是对肺癌发病数有抑制作用。维生素D对肺癌发病数的抑制作用一定程度上与抑制BMP-2和COX-2的表达相关。5维生素D(20IU/kg/d)、40IU/kg/d)可以在发挥抑癌作用的同时不产生高钙血症、肾脏损伤等副作用,为维生素D应用于临床研究维生素D对肺癌的防治提供理论依据。
【关键词】：肺癌 肺癌模型 维生素D 环氧合酶2 人骨形态发生蛋白2
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 中文摘要6-10
• 英文摘要10-16
• 前言16-21
• 参考文献18-21
• 第一部分 维生素D胃肠补充对小鼠血清维生素D的影响21-25
• 1 材料与方法21-23
• 2 结果23
• 3 讨论23-24
• 参考文献24-25
• 第二部分 人体肺癌组织中BMP-2和COX-2蛋白表达及意义25-30
• 1 材料与方法25-27
• 2 结果27-28
• 3 讨论28-29
• 参考文献29-30
• 第三部分 维生素D对NNK诱导A/J小鼠肺癌发生的实验研究30-43
• 1 材料与方法30-33
• 2 结果33-38
• 3 讨论38-41
• 参考文献41-43
• 第四部分 维生素D对B(a)P诱导Balb/c小鼠肺癌发生的实验研究43-53
• 1 材料与方法43-44
• 2 结果44-50
• 3 讨论50-52
• 参考文献52-53
• 全文总结53-54
• 文献综述54-65
• 参考文献60-65
• 致谢65-66
• 攻读硕士学位学位期间发表的文章66

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李哲，，王玉民，郭红梅，候天慧，周慧;多环芳烃诱发实验动物肺癌模型[J];山西医药杂志;1994年04期

2 孙志超;董伟华;肖湘生;朱瑞民;陈墨繁;王智;;犬传染性性病肿瘤肺癌模型的建立和生物学特性的观察[J];介入放射学杂志;2010年12期

3 李辉;段凤英;;转基因小鼠肺癌模型的研究和应用[J];广东医学;2011年24期

4 徐忠建;周素军;鲁植艳;;数字影像学检查在大鼠肺癌模型中的应用[J];医学新知杂志;2005年04期

5 余天明,袁爱芳,喻伦银,胡雪峰,余峰,夏东,刘铭球;大鼠肺癌模型诱癌前处周血淋巴细胞染色体改变过程的研究[J];湖北医科大学学报;1999年04期

6 曹喜才,刘勇,徐乃勋,王晓东,马卫军,杨海贤,白景文,李斌,石建光,李卫东,刘淑萍,刘安甫;犬肺癌模型制作与支气管动脉造影[J];中华放射学杂志;2003年10期

7 储德节;潘春峰;郭水根;王静;余竹元;;肺炎衣原体诱发肺癌模型的建立[J];中国临床医学;2012年03期

8 佘佐亚;罗殿中;邝晓聪;孙忠亮;;绿色荧光蛋白转基因小鼠肺癌模型的建立[J];环境与健康杂志;2012年08期

9 陈锦润;杨立民;张震;王维;赵珍;;3,4-苯并芘支气管灌注构建猪肺癌模型的实验研究[J];昆明医科大学学报;2013年12期

10 薛强,屈谦,杜永洪,李崇雁,文爽,曹友德,范炜,白晋,伍烽,王智彪;兔VX_2肺癌模型的建立及生物学特性观察[J];中华实验外科杂志;2001年05期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 孙志超;董伟华;肖湘生;;犬肺癌模型的建立及制作方法的优化[A];中华医学会第十八次全国放射学学术会议论文汇编[C];2011年

2 孙志超;;犬肺癌模型的建立及制作方法的优化[A];2012年浙江省放射学术年会论文集[C];2012年

3 王东坤;黄云超;陈安宁;雷玉洁;陈小波;;树

本文编号：776646