哈欠（睡意）与睡眠的相关性及四逆散冻干粉干预作用的研究

发布时间：2017-09-13 19:45

  本文关键词：哈欠（睡意）与睡眠的相关性及四逆散冻干粉干预作用的研究

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【摘要】：目的：明确哈欠(睡意)与睡眠的相关性并对四逆散冻干粉对哈欠(睡意)与睡眠相关性的干预作用进行研究。方法：1.哈欠模型的复制选取雄性SD大鼠30只,随机分为空白对照组与模型组。两组实验动物在脑立体定位和麻醉条件下,将微量注射导管埋植于其脑内的PVN区域内,术后动物恢复2天,于第三天9：00-13：00,将微量注内管插入导管内,向模型组大鼠脑内PVN区域微量注射0.3μL含有50ng NMDA的林格氏溶液,空白组大鼠给予相同剂量的林格氏溶液,以0.3 μL/min的速度注射1 min,留针1 min后,取出微量注射内管。利用高清录像仪分别记录给药后1h内空白组与模型组大鼠的哈欠次数,复制大鼠哈欠的模型。2.哈欠与睡眠的相关性研究2.1哈欠对大鼠脑内VLPO区神经元中Fos蛋白表达的影响选取雄性SD大鼠30只,随机分为空白对照组与模型组,灌胃给予蒸馏水(10 mL/kg)7天。两组实验动物于第5天在脑立体定位和麻醉条件下,将微量注射导管埋植于其脑内的PVN区域内,术后动物恢复2天,于第8天9：00-13：00,将微量注射内管插入导管内,向模型组大鼠脑内PVN区域微量注射0.3 μL含有50 ng NMDA的林格氏溶液,空白对照组大鼠给予相同剂量的林格氏溶液,以0.3μL/min的速度注射1min,留针1 min后,取出微量注射内管。利用高清录像仪分别记录给药后1h内空白对照组与模型组大鼠的哈欠次数。记录完成后,两组大鼠立即以生理盐水及4%多聚甲醛灌流取脑,经脱水(5%、10%、20%蔗糖溶液)、固定(4%多聚甲醛)、OCT包埋后,用冷冻切片机将大鼠脑组织切片,利用免疫组化技术(SP法)分别测定空白对照组与模型组大鼠脑内VLPO区神经元中Fos蛋白的表达水平。2.2哈欠对大鼠脑内促睡眠相关因子含量的影响选取雄性SD大鼠30只,随机分为空白对照组与模型组,灌胃给予蒸馏水(10 mL/kg)7天。两组实验动物于第5天在脑立体定位和麻醉条件下,将微量注射导管埋植于其脑内的PVN区域内,术后动物恢复2天,于第8天9：00-13：00,将微量注射内管插入导管内,向模型组大鼠脑内PVN区域微量注射0.3μL含有50 ng NMDA的林格氏溶液,空白对照组大鼠给予相同剂量的林格氏溶液,以0.3μL/min的速度注射1min,留针1 min后,取出微量注射内管。利用高清录像仪分别记录给药后1h内空白对照组与模型组大鼠的哈欠次数。记录完成后,立即取大鼠新鲜脑组织,冰水中研磨、匀浆,经低温离心机(3000 r/min, 10min)离心后,取上清液,利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定空白对照组与模型组大鼠脑内一氧化氮合酶(NOS)、白介素-2(IL-2)等促睡眠相关因子含量,利用硝酸还原酶法测定两组大鼠脑内一氧化氮(NO)含量。3.四逆散冻干粉对哈欠与睡眠相关性的影响3.1 四逆散冻干粉对哈欠模型大鼠哈欠次数与脑内VLPO区神经元中Fos蛋白表达的影响选取雄性SD大鼠15只,作为给药组,灌胃给予四逆散冻干粉剂(10mL/kg)7天。两组实验动物于第5天在脑立体定位和麻醉条件下,将微量注射导管埋植于其脑内的PVN区域内,术后动物恢复2天,于第8天9：00-13：00,将微量注射内管插入导管内,向给药组大鼠脑内PVN区域微量注射0.3 μL含有50ng NMDA的林格氏溶液,以0.3μL/min的速度注射1 min,留针1 min后,取出微量注射内管。利用高清录像仪分别记录给药后1h内给药组大鼠的哈欠次数。记录完成后,动物立即以生理盐水及4%多聚甲醛灌流取脑,经脱水(5%、10%、20%蔗糖溶液)、固定(4%多聚甲醛)、OCT包埋后,用冷冻切片机将大鼠脑组织切片,利用免疫组化技术(SP法)测定给药组大鼠脑内VLPO区神经元中Fos蛋白的表达水平。3.2 四逆散冻干粉对哈欠模型大鼠脑内促睡眠相关因子含量的影响选取雄性SD大鼠15只,作为给药组,灌胃给予四逆散冻干粉剂(10nL/kg)7天。两组实验动物于第5天在脑立体定位和麻醉条件下,将微量注射导管埋植于其脑内的PVN区域内,术后动物恢复2天,于第8天9：00-13：00,将微量注射内管插入导管内,向模型组大鼠脑内PVN区域微量注射0.3 gL含有50 ng NMDA的林格氏溶液,空白对照组大鼠给予相同剂量的林格氏溶液,以03μL/min的速度注射1 min,留针1 min后,取出微量注射内管。利用高清录像仪分别记录给药后1h内给药组大鼠的哈欠次数。记录完成后,动物立即以生理盐水及4%多聚甲醛灌流取脑,经脱水(5%、10%、20%蔗糖溶液)、固定(4%多聚甲醛)、OCT包埋后,用冷冻切片机将大鼠脑组织切片,利用免疫组化技术(SP法)测定给药组大鼠脑内VLPO区神经元中Fos蛋白的表达水平。结果：1.哈欠模型的复制实验结果表明,与空白组相比,模型组大鼠脑内PVN中注射NMDA后1h内,哈欠次数极显著增加,二者之间存在着极显著的差异(P0.01)。2.哈欠与睡眠的相关性研究2.1哈欠对大鼠脑内VLPO区神经元中Fos蛋白表达的影响实验结果表明,经7天灌胃给予蒸馏水后,与空白组相比,模型组大鼠脑内PVN中注射NMDA后1h内,哈欠次数极显著增加,二者之间存在着极显著的差异(P0.01)；实验结果表明,与空白组相比,模型组大鼠脑内PVN中注射NMDA后1 h,VLPO区神经元中Fos蛋白表达量极显著增加,二者之间存在着极显著的差异(P0.01)2.2哈欠对大鼠脑内促睡眠相关因子含量的影响实验结果表明,与空白组相比,模型组大鼠脑内PVN中注射NMDA后1 h,脑内NO含量极显著增加,二者之间存在着极显著的差异(P0.01)；脑内NOS含量无明显变化,二者之间无显著的差异(P0.05)；脑内IL-2含量极显著降低,二者之间存在着极显著的差异(P0.01)。3.四逆散冻干粉对哈欠与睡眠相关性干预作用的研究3.1四逆散冻干粉对哈欠模型大鼠哈欠次数与脑内VLPO区神经元中Fos蛋白表达的影响实验结果表明,与模型组相比,给药组大鼠脑内PVN中注射NMDA后1h内,哈欠次数显著增加,二者之间存在着显著的差异(P0.05)；实验结果表明,与模型组相比,给药组大鼠脑内PVN中注射NMDA后1 h,VLPO区神经元中Fos蛋白表达量显著增加,二者之间存在着显著的差异(P0.05)。3.2四逆散冻干粉对哈欠模型大鼠脑内促睡眠相关因子含量的影响实验结果表明,与模型组相比,给药组大鼠脑内PVN中注射NMDA后1h,脑内NO含量显著增加,二者之间存在着显著的差异(P0.05)；脑内NOS含量极显著增加,二者之间存在着极显著的差异(P0.01)；IL-2含量无明显变化,二者之间无显著的差异(P0.05)。结论：1、哈欠(睡意)与睡眠之间存在着相关性。其相关性表现为：哈欠(睡意)能提高睡眠中枢(VLPO)区域神经元的活性,同时也能提高具有诱导睡眠发生作用的相关因子(NO)的含量。2、四逆散冻干粉能显著地增加哈欠(睡意)的发生,并能提高睡眠中枢(VLPO)区域神经元的活性,同时也能提高具有诱导睡眠发生作用的相关因子(NO、NOS)的含量。
【关键词】：哈欠 睡意 四逆散 VLPO 睡眠
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 缩略语表4-5
• 中文摘要5-9
• ABSTRACT9-13
• 前言13-14
• 文献综述14-26
• 1. 哈欠的简介14-18
• 2. 睡意的简介18
• 3. 哈欠与睡意18-19
• 4. 睡意与睡眠19-20
• 5. 睡眠中枢(VLPO)与促睡眠相关因子的简介20-21
• 6. 四逆散的研究现状21-24
• 7. 本课题研究思路与技术路线24-26
• 实验部分26-54
• 第一部分 大鼠哈欠模型的复制26-31
• 1. 实验材料26-27
• 2. 实验条件27
• 3. 实验方法27-29
• 4. 结果29-30
• 5. 小结30-31
• 第二部分 哈欠与睡眠的相关性研究31-44
• 一、哈欠对大鼠脑内VLPO区神经元中Fos蛋白表达的影响31-37
• 1. 实验材料31-32
• 2. 实验条件32
• 3. 实验方法32-35
• 4. 结果35-36
• 5. 小结36-37
• 二、哈欠对大鼠脑内睡眠相关因子含量的影响37-44
• 1. 实验材料37-38
• 2. 实验条件38
• 3. 实验方法38-40
• 4. 结果40-43
• 5. 小结43-44
• 第三部分 四逆散冻干粉对哈欠(睡意)与睡眠相关性的影响44-54
• 一、四逆散冻干粉对哈欠模型大鼠哈欠次数与脑内VLPO区神经元中Fos蛋白表达的影响44-49
• 1. 实验材料44-46
• 2. 实验条件46
• 3. 实验方法46-47
• 4. 结果47-48
• 5. 小结48-49
• 二、四逆散冻干粉促进大鼠哈欠(睡意)与睡眠的机制研究49-54
• 1. 实验材料49-50
• 2. 实验条件50
• 3. 实验方法50-51
• 4. 结果51-52
• 5. 小结52-54
• 讨论54-57
• 结论57-58
• 参考文献58-62
• 致谢62-63
• 攻读硕士学位期间发表的论文63-65
• 个人简历65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 赵志谨;桂林古本《伤寒杂病论》四逆散方证刍议[J];国医论坛;1988年01期

2 李湘涛;;动物为什么打哈欠?[J];大自然;2011年02期

3 方永奇;莫镇涛;;脑能量代谢调节机制研究新进展[J];广州中医药大学学报;2011年03期

4 阎寒;;大脑能量水平与框架效应关系的实证研究[J];社会心理科学;2013年04期

5 刘长云,王海明,陈坚,季红光;一氧化氮对睡眠-觉醒周期的调控[J];中国行为医学科学;2001年04期

6 张宏金,杨军,俞梦孙,吴锋,王青青,徐先荣,陈同欣,赵显亮,成奇明,周玉彬,金璋瑞,刘娟;一种鉴定飞行员睡眠呼吸暂停低通气综合征的新方法[J];中华航空航天医学杂志;2004年02期

7 华贝;;疲劳度检测[J];知识就是力量;2008年09期

8 赵定亮;单风平;;白细胞介素-2最新研究进展[J];微生物学杂志;2013年04期

中国博士学位论文全文数据库 前6条

1 张树明;四逆散有效组分改善睡眠作用的机制研究[D];黑龙江中医药大学;2010年

2 李越峰;四逆散改善睡眠作用药效物质基础研究[D];黑龙江中医药大学;2009年

3 李玉萍;以果蝇为模式生物的四逆散改善睡眠作用及作用机制研究[D];黑龙江中医药大学;2009年

4 颜明明;Fos蛋白与睡眠内稳态调控机制研究[D];复旦大学;2010年

5 张乔;四逆散的有效组分改善睡眠作用的5-HT机制研究[D];黑龙江中医药大学;2012年

6 张瑾;大鼠腹外侧视前区腺苷对睡眠—觉醒节律调控的研究[D];安徽医科大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前8条

1 于爽;大鼠睡眠不同时相与中缝核5-HIAA含量的相关性与四逆散改善睡眠的机制研究[D];黑龙江中医药大学;2010年

2 刘立;四逆散对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠实验的影响[D];黑龙江中医药大学;2002年

3 王正浩;基于人脸识别技术的睡意监测系统研究[D];华东师范大学;2004年

4 朱维莉;四逆散对正常及失眠大鼠睡眠时相的影响[D];黑龙江中医药大学;2004年

5 陈金保;四逆散方证研究及临床应用规律探讨[D];中国中医科学院;2007年

6 陈彦峰;睡意对脑电信号的影响[D];兰州理工大学;2013年

7 刘风华;基于心电脉搏信号的睡意检测与识别方法研究[D];兰州理工大学;2013年

8 李胜男;四逆散改善睡眠作用的有效组分体内代谢过程的研究[D];黑龙江中医药大学;2014年

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本文编号：845559