电针对高血压前期大鼠T淋巴细胞亚群及TLR4信号通路影响的研究

发布时间：2017-09-21 18:47

  本文关键词：电针对高血压前期大鼠T淋巴细胞亚群及TLR4信号通路影响的研究

  更多相关文章： 高血压前期 脾虚证 电针 T淋巴细胞亚群 TLR4信号通路

【摘要】：目的:本实验通过8%NACL高盐饲养建立大鼠高血压前期模型,然后电针刺激DAHL盐敏感大鼠“足三里”、“曲池”穴,观察DAHL盐敏感大鼠血压、外周血中CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞百分比及脾脏巨噬细胞中TLR4信号通路中TOLL样受体4(TOLL-LIKE RECEPTOR 4,TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF-RECEPTOR ASSOCIATION FACTOR6,TRAF-6)、转录激活因子蛋白1(ACTIVATOR PROTEIN-1,AP-1)M RNA的表达,评价针刺调节免疫系统对低度炎症反应高血压前期血压的影响,并进一步探讨针刺“足三里”、“曲池”穴的降压机制及高血压前期与机体免疫功能低下的关系。材料与方法:10只7周龄雄性DAHL盐抵抗大鼠(DAHL SALT RESISTANT RATS,DR)设为正常对照组;将30只7周龄雄性DAHL盐敏感大鼠(DAHL SALT SENSITIVE RATS,DS)采用随机数字表法分为3组,每组10只,分别是模型组(每日仅捆绑15MIN)、针刺组(捆绑大鼠后针刺双侧“曲池”穴、“足三里”穴3-5MM,采用疏密波,频率2HZ,电针刺激20MIN,以针柄轻微微震颤为适中,每日1次,每周6次)、非经非穴组(捆绑大鼠后针刺双侧“足三里旁开1-2MM”、“上臂内前缘三角肌和二头肌交接处”3-5MM,采用疏密波,频率2HZ,电针刺激20MIN,以针柄轻微微震颤为适中,每日1次,每周6次)。首先8%NACL高盐饲养并采用智能无创血压计每天监测大鼠血压,1周后升高至高血压前期水平。停止高盐改为普通饲料饲养,连续电针治疗4周,并用智能无创血压计每周测量大鼠血压,观察四组大鼠尾动脉收缩压,当血压降至正常水平时,停止针刺。治疗结束后进行取材,收集各组大鼠血液2ML,抽入含有乙二酸四乙酸(ETHYLENEDIAMINETETRAACETIC ACID DISODIUM SALT,EDTA)的抗凝采血管中,上下颠倒8-10次,6小时内采用流式技术上机处理;另采用10%水合氯醛腹腔麻醉(3ML/KG体重)大鼠并将其捆绑,并用0.5%碘伏涂抹,用剪刀划开皮肤,剪开腹膜并充分暴露脾脏,取脾脏组织约50MG加入1M L TRIZOL试剂于EP管内,于-80℃冰箱保存备用,提取脾组织总RNA,逆转录后分别加入相应引物,扩增大鼠TLR4、TRAF-6及AP-1基因,内参设为β-ACTIN。用实时定量PCR方法检测脾脏中TLR4、TRAF-6、AP-1M RNA的表达。数据采用SPSS17.0软件进行单因素方差分析,组间两两比较采用LSD法分析,结果以均数±标准差(X±S)表示,P0.05被认为有显著性差异。结果:1针刺对DAHL盐敏感大鼠尾动脉收缩压的影响观察发现针刺治疗前,模型组、针刺组、非经非穴组大鼠血压均高于正常组,有显著统计学意义(P0.01),而模型组、针刺组、非经非穴组三组之间比较没有统计学意义(P0.05);治疗1周后,与模型组相比,针刺组和非经非穴组大鼠尾动脉收缩压均下降,并有统计学意义(P0.01),但非经非穴组与针刺组没有统计学意义(P0.05);治疗2周后,与模型组相比,针刺组和非经非穴组大鼠收缩压显著下降,有统计学意义(P0.01),与非经非穴组相比,针刺组疗效更显著,降压效果更好,具有统计学意义(P0.05);治疗3周后,大鼠尾动脉收缩压持续下降,与模型组相比,针刺组和非经非穴组具有显著统计学差异(P0.01),与非经非穴组相比,针刺组疗效更显著,降压效果更好,具有统计学意义(P0.05);治疗4周后,针刺组、非经非穴组的大鼠尾动脉收缩压达到一定的稳定期,与模型组相比具有显著统计学差异(P0.01),与非经非穴组相比,针刺组疗效更显著,降压效果更好,具有统计学意义(P0.05)。2针刺对DAHL盐敏感大鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响与模型组相比,针刺组CD4+T淋巴细胞百分比明显下降(P0.05),非经非穴组CD4+T淋巴细胞百分比也有所下降(P0.05),正常组和模型组的T淋巴细胞百分比没有明显差异(P0.05);与模型组相比,针刺穴位后CD8+T淋巴细胞百分比降低(P0.05),且针刺组和非经非穴组CD8+T淋巴细胞百分比皆比正常组有所下降(P0.05)。3针刺对DAHL盐敏感大鼠脾脏TLR4信号通路的影响TLR4M RNA与模型组相比,针刺组和非经非穴组基因表达显著降低(P0.01),且四组间有明显的差异(P0.01);TRAF-6M RNA与模型组相比,针刺组和正常组基因表达显著下降(P0.05),但模型组和非经非穴组没有显著差异(P0.05);AP-1的M RNA与模型组相比,针刺组和非经非穴组基因表达显著降低(P0.01),且四组间存在明显的差异(P0.01)。结论:1针刺对DAHL盐敏感大鼠具有降压作用,可使高血压前期的血压恢复至正常水平。2高血压前期大鼠体内存在淋巴细胞激活的炎症状态,针刺可改善脾气虚所致的低度炎性高血压前期大鼠的免疫功能紊乱程度。
【关键词】：高血压前期 脾虚证 电针 T淋巴细胞亚群 TLR4信号通路
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R245
【目录】：

• 中文论著摘要4-7
• 英文论著摘要7-10
• 英文缩略语10-11
• 前言11-14
• 材料与方法14-21
• 实验材料14-15
• 实验方法15-21
• 实验结果21-25
• 讨论25-33
• 结论33-34
• 本研究创新性的自我评价34-35
• 参考文献35-40
• 综述40-50
• 参考文献46-50
• 在学期间科研成绩50-51
• 致谢51-52
• 个人简历52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 童明宏;邵俊;陈燕红;邢颖;;CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞水平在胃癌患者外周血中的变化[J];检验医学;2012年06期

2 冯俊;王爱玲;杨春;王静;余元勋;;高血压病患者外周血单核细胞Toll样受体4的表达[J];中华高血压杂志;2007年12期

，

本文编号：896280