膀胱癌分子标志物基质金属蛋白酶1的可溶性表达和尿液中的活性分析

发布时间：2017-10-16 00:35

  本文关键词：膀胱癌分子标志物基质金属蛋白酶1的可溶性表达和尿液中的活性分析

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【摘要】：通过分离人胚胎肾细胞(HEK293)中基质金属蛋白酶1(MMP1)基因序列,利用基因工程技术在大肠杆菌中表达并纯化了包涵体复性的MMP1;采用融合表达硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx A)的方法获得了可溶性的MMP1-Trx A复合蛋白,在Trx A蛋白和MMP1活性中心之间引入了一个肠激酶切割位点,通过酶切作用获得可溶性MMP1。明胶酶谱分析法对体外表达的MMP1和体内(尿液中)MMP1进行了分析比较。结果表明,Trx A蛋白能够显著提高MMP1的可溶性,且可溶性MMP1的明胶降解活性是复性的MMP1降解活性的1.54倍,与尿液中的MMP1的明胶酶降解活性相当。因此,明胶酶谱法是一种有效的、高灵敏的MMP1检测方法,所表达的可溶性MMP1为小分子探针筛选提供了更可靠的分子靶点。
【作者单位】： 吉林大学中日联谊医院泌尿外科;吉林大学中日联谊医院内分泌科;吉林省军队离退休干部疗养中心;
【关键词】： 膀胱癌生物标志物 基质金属蛋白酶 分子探针筛选 明胶酶谱
【分类号】：R737.14
【正文快照】： 1引言目前,由膀胱癌引起的男性致死率处于上升趋势。尽管对膀胱癌的诊断和治疗技术已有了很大提高,但膀胱癌患者的生存率仍然不佳,迫切需要针对膀胱癌术后复发的诊断技术[1]。寻找新型膀胱癌标志物,开发非侵入性、高敏感性和特异性、操作简便、费用低廉的检测技术,将提高膀胱

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本文编号：1039635