Nampt在糖尿病发病过程中对肾脏细胞NF-κBp65和Sirt1的调控及相互关系

发布时间：2017-11-21 02:07

本文关键词：Nampt在糖尿病发病过程中对肾脏细胞NF-κBp65和Sirt1的调控及相互关系

【摘要】：目的:通过检测糖尿病发病过程中Nampt,NF-κBp65,Sirt1基因表达变化,探讨Nampt对NF-κBp65和Sirt1基因的调控作用,为揭示糖尿病肾病的发病机理和新的治疗方法提供理论依据。方法:1.应用高浓度葡萄糖(35mmol/L)1640培养基培养NRK-52E细胞,在不同培养时间(0h,24h,48h,72h,96h,120h)提取各组蛋白,用蛋白质印记技术检测细胞内Nampt,NF-κBp65,Sirt1基因的蛋白表达情况;在培养过程中,观察细胞的形态学变化,同时免疫荧光技术检测细胞中Nampt,NF-κBp65和Sirt1基因的表达情况。2.通过2型糖尿病SD大鼠模型研究,应用免疫组化方法检测胰腺和肾脏中Nampt,NF-κBp65和Sirt1的蛋白表达,综合评价Nampt与NF-κBp65和Sirt1基因表达的关系,分析其在糖尿病及糖尿病肾病发病之间的作用及其相互关系。结果:1.NRK-52E细胞在高浓度葡萄糖环境中,Nampt随着培养时间延长,表达量明显升高,此时NF-κBp65表达也随之增加,而Sirt1的蛋白表达水平则随着Nampt表达的增加而逐渐降低;形态学观察发现,与对照组比较,高浓度葡萄糖培养的NRK-52E细胞,细胞核体积明显变大,细胞呈现出不规则的变化;荧光显微镜下发现,Nampt在细胞内表达明显增加,且胞浆和胞核中均见有表达,NF-κBp65蛋白表达也明显增强,此时Sirt1表达则低于正常糖浓度组;NF-κBp65表达随着Nampt蛋白的增加而增加,而Sirt1表达随着Nampt蛋白的增加而降低;2.在2型糖尿病模型大鼠的胰腺组织中,在胰岛中Nampt、NF-κBp65和Sirt1均见有表达,模型组中Nampt和NF-κBp65表达明显高于正常对照组,而Sirt1的表达低于正常对照组;在肾脏组织中,Nampt,NF-κBp65和Sirt1蛋白主要表达于肾小管和肾小球部位部分有表达,其中Nampt和NF-κBp65明显高于对照组,而Sirt1蛋白表达则低于对照组。结论:1.在高糖浓度培养的NRK-52E细胞中Nampt、NF-κBp65增加,而Sirt1表达则明显降低;2.在2型糖尿病模型SD大鼠胰腺和肾脏组织中,Nampt,Nampt和NF-κBp65表达增加,Sirt1蛋白表达减少。在糖尿病及糖尿病肾病的发病中,Nampt可能作为关键因子在调节NF-κBp65和Sirt1蛋白表达方面发挥中作用。
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.2;R692.9

【参考文献】

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1 Kultigin Turkmen;Ali Karagoz;Adem Kucuk;;Sirtuins as novel players in the pathogenesis of diabetes mellitus[J];World Journal of Diabetes;2014年06期

2 田华;张松峰;尤丽菊;宋玮;沈永杰;;姜黄素对糖尿病肾病大鼠肾脏炎症损伤的保护作用[J];细胞与分子免疫学杂志;2013年11期

3 周红坚;周园媛;;氧化应激与线粒体功能障碍和胰岛素抵抗的关系[J];中国临床医生;2013年08期

4 李淑梅;;糖尿病肾病的治疗研究进展[J];中国煤炭工业医学杂志;2011年07期

5 王学智;邢冰;柴国禄;;糖尿病肾病患者血清内脂素与肾素血管紧张素系统的关系[J];黑龙江医药科学;2011年03期

6 郑斌;李长红;王振;李振海;柴国禄;;糖尿病肾病血清内脂素水平变化与氧化应激相关分析[J];中国误诊学杂志;2011年09期

7 金南惠;廖元江;高小玲;郭勇;马爱景;文燕;;氯沙坦对糖尿病肾病患者氧化应激的影响[J];中国误诊学杂志;2010年15期

8 沙杜鹃;徐运;;SIRT1的神经保护机制[J];国际脑血管病杂志;2009年02期

9 吴永贵,林辉,钱浩,赵珉,周典,梁维龙;PKC抑制剂LY333531对大鼠糖尿病模型肾组织氧化应激的影响[J];安徽医学;2004年05期

10 何冰,韩萍,吕先科;2型糖尿病患者急性时相蛋白与糖尿病肾病的关系[J];中华内分泌代谢杂志;2003年04期