膀胱灌注雷公藤甲素对大鼠膀胱癌的作用及其机制研究

发布时间：2017-11-22 23:00

  本文关键词：膀胱灌注雷公藤甲素对大鼠膀胱癌的作用及其机制研究

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【摘要】：目的研究膀胱灌注雷公藤甲素(TP)对大鼠膀胱癌的抑制作用及其可能机制。方法采用膀胱灌注N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导SD大鼠原位膀胱癌模型；观察膀胱灌注生理盐水(NS组)、雷公藤甲素(TP组)及丝裂霉素C(MC组)对大鼠膀胱肿瘤生长的作用及药物的毒副作用。通过称重法比较药物组与对照组(CL组)大鼠膀胱相对重量；采用组织切片HE染色法观察大鼠膀胱粘膜上皮的组织病理学形态改变及定量评分；采用TUNEL法检测药物治疗后大鼠膀胱组织肿瘤细胞的凋亡情况并计算凋亡指数；采用蛋白免疫印迹法测定药物治疗后大鼠膀胱组织肿瘤细胞凋亡相关蛋白Bax、Caspase3、Bcl-2及自噬相关蛋白Atg5、Beclin1、LC3的表达。结果 膀胱灌注MNU建立大鼠原位膀胱癌模型成功率为93.3%(28/30),实验大鼠死亡率为13.3%(4/30),第8周行病理学检查已可见原位膀胱癌的特征表现,且无明显远处转移病灶。雷公藤甲素组的大鼠的膀胱绝对重量(162.50±12.13mg)低于生理盐水组(177.00±13.82 mg,P0.05)和丝裂霉素组(164.50±8.45 mg,P0.05),其膀胱相对重量(0.49±0.05)低于生理盐水组(0.56±0.06,P0.05)和丝裂霉素组(0.51±0.05,P0.05),各组的大鼠最终体重无明显差异。与对照组相比,药物三组的组织切片HE染色法均表现大鼠膀胱原位癌的特征表现,且雷公藤甲素组的HE评分(2.13±0.95)低于生理盐水组(4.00±1.19,P0.05)和丝裂霉素组(3.06±0.62,P0.05)。TUNEL法检测雷公藤甲素组的凋亡指数均数为(32.30±8.16)%,高于对照组、生理盐水组及丝裂霉素组(P0.01)。蛋白免疫印迹法测定的Bax蛋白表达水平：雷公藤甲素组为(0.56±0.05),生理盐水组为(0.24±0.01),丝裂霉素组为(0.36±0.03),各组之间差异有统计学意义；各组Caspase3.Atg5.Beclinl及LC3-Ⅱ的蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与Bax蛋白相似。抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平：雷公藤甲素组为(0.38±0.05),生理盐水组为(0.68±0.03),丝裂霉素组为(0.48±0.04)；各组之间差异有统计学意义。结论 膀胱灌注MNU诱导大鼠原位膀胱癌是一种简单方便、诱癌时间短、毒副作用小,具有膀胱特异性的建模方法。膀胱灌注雷公藤甲素可以诱导大鼠膀胱癌细胞的凋亡及自噬,抑制大鼠膀胱癌的生长及其组织病理学的进展。
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.14

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 张翠香;刘建勋;董小霞;洪晓华;王杨慧;侯金才;付建华;张伟;;对凋亡细胞TUNEL染色操作中的体会[J];实验动物科学;2014年04期

2 梁国庆;陈春雷;陈伟杰;张晓峰;;茶多酚治疗N-甲基亚硝基脲诱发膀胱肿瘤的实验研究[J];天津医药;2013年09期

3 Xi-hua Yang;Lian-sheng Ren;Guo-ping Wang;Li-li Zhao;Hong Zhang;Zhen-guo Mi;Xihua Bai;;A New Method of Establishing Orthotopic Bladder Transplantable Tumor in Mice[J];Cancer Biology & Medicine;2012年04期

4 李云;许传亮;李志华;杨庆;顾正勤;王林辉;孙颖浩;;两种构建大鼠膀胱癌模型方法的比较研究[J];临床泌尿外科杂志;2008年10期

5 汤小燕;朱尤庆;陶文惠;魏柏;林小玲;;雷公藤内酯醇联合5-氟尿嘧啶对结肠癌的作用研究[J];中国医药;2008年01期

6 刘红耀,李晓东,米振国,王东文,李春华,李柄太,佟锦;N-甲基亚硝基脲的制备及其诱发膀胱肿瘤的作用[J];中华实验外科杂志;2000年06期

7 顾炜;徐耀庭;谢敏;李杜渐;黄汝强;许晓文;;N-甲基亚硝基脲诱导大鼠膀胱癌模型的动态观察[J];实验动物与比较医学;2011年01期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 姜华茂;紫杉醇诱导膀胱癌细胞凋亡和抑制膀胱肿瘤生长的实验研究[D];中国医科大学;2006年

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本文编号：1216318