S100A2在肾透明细胞癌中的表达及功能研究

发布时间：2017-12-03 08:28

  本文关键词：S100A2在肾透明细胞癌中的表达及功能研究

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【摘要】：目的：S1 00A2是S100家族的一员,调节多种细胞内外的功能,如增殖、凋亡,分化等。近些年来,研究发现S100A2在肿瘤组织中的表达水平及其活性变化可能促进或抑制肿瘤的发生发展。多项研究表明S1 00A2在多种不同类型肿瘤组织中的表达存在异常,如结肠癌、喉鳞状细胞癌、头颈癌、前列腺癌、乳腺癌等,查阅相关数据库,发现有关于S100A2在肾透明细胞癌中的表达及其功能目前尚无研究报道。本课题主要探究S100A2在肾透明细胞癌的肿瘤组织和相应的瘤旁组织中的表达情况,研究S100A2对肾肿瘤细胞周期变化及增殖能力的影响,进而探讨S1 00A2在肾透明细胞癌发生中所起到的作用,为临床诊治肾肿瘤提供新的线索。方法：①实时定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测46例肾透明细胞癌及其相应的瘤旁组织中S100A2的mRNA表达水平,通过western-blot和免疫组织化学的方法S100A2蛋白在肾透明细胞癌及其相应的癌旁组织的表达水平;②Western-blot以及实时定量PCR检测人肾透明细胞癌细胞株769-P,786-O,OS-RC-2和正常肾小管上皮HK2细胞株中S100A2的mRNA及蛋白水平的表达；③通过构建过表达S100A2的慢病毒质粒,培育过表达S100A2的稳转786-0及769-P肾癌细胞株；④通过细胞周期实验及MTS实验分别检测正常的786-0及769-P及相应的稳转细胞株的周期及增殖情况。结果：①S100A2的mRNA水平在肾透明细胞癌肿瘤标本组织中的表达显著下调(p0.01),其相对应的组织蛋白水平与mRNA变化一致;②在肾透明细胞癌细胞株786-0、769-P、OS-RC-2中,S100A2的mRNA及蛋白表达水平比HK2细胞株低(p值均0.05),这与肿瘤标本中结果相一致；③我们构建成功了过表达S100A2质粒,并进行了慢病毒包装,培育出了过表达S1 00A2的肾透明细胞癌稳转细胞系786-0和769-P：④与正常及转染了空载体的786-O和769-P相比,过表达S100A2的细胞株MTS和细胞周期实验结果均显示细胞增殖能力明显下降。结论：在肾透明细胞癌中,100A2的异常低表达可能与肾透明细胞癌的发生有关,S100A2可能起着抑癌基因的作用。
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.11
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本文编号：1248056