肾草酸钙及尿酸结石基质蛋白的质谱鉴定与分析

发布时间：2017-12-10 15:27

  本文关键词：肾草酸钙及尿酸结石基质蛋白的质谱鉴定与分析

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【摘要】：目的:初步探讨不同肾结石内的蛋白质组成差异,为后续进一步探索结石内蛋白质在结石形成中的作用及其相关分子机制奠定基础。方法:收集2013年6月至2014年12月我院通过输尿管镜、经皮肾镜和腹腔镜等手术方式取石术后临床上尿路结石标本共150例。经三蒸水清洗20次、超净工作台晾干结石、充分碾磨结石标本后,取微量(约500ug)结石粉末,采用结石红外光谱分析仪分析结石组成成分;同时取1g结石粉末,加5ml RIPA蛋白裂解液溶解蛋白,经冷冻干燥浓缩蛋白,通过凝胶电泳技术对样品蛋白质进行分离及纯化,并采用考马斯亮蓝染色鉴别蛋白分子量大小;通过胶内酶解后再抽提出肽段,经液相色谱电离串联质谱(LC-ESI-MS/MS)技术鉴定蛋白质成份,并对质谱结果进行GO、Pathway初步的生物信息学分析。结果:1、在150例上尿路结石中,其中草酸钙结石33例,尿酸结石12例,草酸钙合并碳酸钙结石66例,草酸钙合并尿酸结石19例,草酸钙合并磷酸钙20例。2、SDS-PAGE电泳结果表:33例草酸钙结石内蛋白有3至4条蛋白带,主要集中70-100KD,17-26 KD;12尿酸结石内的蛋白质有5-6条蛋白带,主要集中70-100KD,30-40 KD,17-26 KD。3、蛋白质谱结果:草酸钙结石内有88种蛋白,尿酸结石内有283种蛋白;GO分析、pathway结果表明:结石内以结合功蛋白为主,占草酸钙结石蛋白总数的45.8%,占尿酸结石蛋白总数的44.34%。其中以S100A8、S100A9、纤维连接蛋白、角蛋白等炎症相关蛋白最具功能研究意义。结论:1、不同结石成份,结石内蛋白质组成及含量不同。2、相同结石成份,结石内蛋白质组成及含量略有差异。3、草酸钙结石内有88种蛋白,尿酸结石内含有283种蛋白
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R691.4

【参考文献】

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1 陈志强;余哠;;尿石症病因诊断及预防[J];临床外科杂志;2008年11期

2 邓穗平;欧阳健明;;肝素和硫酸乙酰肝素抑制草酸钙结石形成的化学基础[J];化学世界;2006年08期

3 陈志强,姚林方,叶章群;特发性草酸钙结石研究现状[J];临床泌尿外科杂志;2005年05期

4 钟玖平,欧阳健明,郑文杰,沈玉华,谢安建;硫酸软骨素A对草酸钙晶体生长和聚集的影响[J];化学世界;2003年02期

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本文编号：1274998