在卡铂所致的大鼠急性肾损伤中肾损伤分子-1的表达及盐酸乙酰左卡尼汀对其保护作用的研究

发布时间：2018-03-11 13:06

本文选题：卡铂　切入点：急性肾损伤　出处：《河北联合大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的盐酸乙酰左卡尼汀作为机体自身可以分泌的物质它有强大的抗氧化损伤能力，而卡铂肾损伤的一个重要的机制便是通过氧化损伤导致肾小管细胞受损，但目前国内对这方面研究较少，本实验将通过建立卡铂导致肾损伤的动物模型，通过建立正常、肾损伤及药物治疗对照组模型进行实验研究，从而判断盐酸乙酰左卡尼汀对卡铂肾毒性的临床应用价值及肾损伤分子-1在诊断急性肾损伤过程中的意义。方法本实验将选用65只健康雄性SD（Sprague-Dawle）大鼠并进行随机分组，分为三个组：第一组正常对照组（CN）5只、第二组卡铂模型组（CP）30只、第三组盐酸乙酰左卡尼汀干预组（LC+CP）30只。正常对照组：每日给予腹腔注射生理盐水5ml/kg，连续4d，第5d时处死；卡铂模型组：每日给予腹腔注射生理盐水5ml/kg，，连续4d，第5d将卡铂干粉用生理盐水溶解为1mg/ml的液体，按照7mg/kg进行腹腔注射，注射卡铂溶液的雄性SD大鼠分别在第6h、12h、24h、48h、3d、5d时，随机抽取5只大鼠处死；盐酸乙酰左卡尼汀干预组：将盐酸乙酰左卡尼汀干粉用生理盐水溶解为100mg/ml的液体，按照500mg/kg进行腹腔注射，连用4d，第5d分别将卡铂干粉用生理盐水溶解为1mg/ml的液体，按照7mg/kg进行腹腔注射，用药后的雄性SD大鼠分别在第6h、12h、24h、48h、3d、5d后，随机抽取5只大鼠处死。所有大鼠处死时均做膀胱穿刺取尿留取尿液标本，测定尿液肾损伤分子-1，同时留取静脉血标本测定血清肌酐、血清肾损伤分子-1；同时取肾组织匀浆测定肾组织肾损伤分子-1及提取RNA做实时荧光定量PCR来测定Kim-1表达；取肾组织应用10%福尔马林固定，并行石蜡包埋做HE染色，以观察肾脏病理学改变。结果与正常对照组相比卡铂模型组的大鼠肌酐在1d时开始明显升高（P0.05），3d时增高速度减缓；同时卡铂模型组大鼠的尿及肾脏组织的肾损伤分子-1的含量较正常对照组在损伤6h便明显升高（P0.05），早于肾小管上皮细胞的形态学变化时间，并且随病程延长肾小管上皮细胞损伤加重浓度逐渐升高；实时定量PCR显示Kim-1基因的表达量较正常组明显明显上调，在肾小管细胞出现自我修复时仍维持在较高的表达水平，可能与促进肾小管细胞的修复有关；HE染色也表现出明显肾损伤，3d时损伤达到高峰，5d时可见肾小管上皮细胞的自我修复；盐酸乙酰左卡尼汀干预组的大鼠较卡铂模型组肌酐升高缓慢（P0.05），病理提示同时间段肾损伤较其减轻，尿及肾脏组织的肾损伤分子-1的含量也明显降低（P0.05），实时定量PCR提示较同时间段卡铂模型组Kim-1基因表达量下调。在卡铂导致的肾损伤大鼠中血清肾损伤分子-1测定无明显升高，同时经过分析提示各组及各个时间点大鼠之间无明显差异（P0.05）。结论1卡铂可引起大鼠以肾小管损害为主的急性肾损伤，并且随时间延长其损伤呈加重趋势；2在卡铂导致的大鼠急性肾损伤中，3d为重要的转折点，在此时间点肾组织损伤达到高峰；3卡铂导致的急性肾损伤过程中，肾损伤分子-1表达在6小时便开始出现，早于肾小管形态学损伤；4肾损伤分子-1在发生急性肾损伤的机体的尿液及肾组织中高表达，而且与肾损伤程度呈正相关；5血中肾损伤分子-1无明显升高可能与其重吸收入血较少有关；6尿肾损伤分子-1测定可以作为早期肾损伤检测的标志物，敏感性和特异性均较高，同时可以作为肾损伤程度的判断，优于传统的肌酐测定法；7盐酸乙酰左卡尼汀对卡铂所致大鼠的急性肾损伤有较好的保护作用。
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【学位授予单位】：河北联合大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R692.5

【参考文献】