糖皮质激素对阿霉素肾病大鼠牙周组织影响的研究

发布时间：2018-11-04 09:50

【摘要】：目的建立阿霉素肾病大鼠模型并给予大剂量糖皮质激素干预,通过检测牙周致炎因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及龈下牙龈卟啉单胞菌(P.g),探讨牙周炎与肾病及糖皮质激素应用之间的相关性,为肾病患者的口腔治疗提供实验依据。方法60只SPF级健康、雄性WISTAR大鼠,随机分为两组:正常组、肾病组,每组30只。肾病组采用间隔1周2次尾静脉注射盐酸阿霉素4mg/kg建立大鼠阿霉素肾病模型,正常组以同样方法注射生理盐水4mg/kg。注射完成4周后将造模大鼠共30只置于代谢笼内收集24h尿液,用BCA蛋白定量试剂盒检测尿蛋白,同期将两组大鼠各随机抽取10只处死,摘取肾脏制作病理切片。造模成功后剩余40只大鼠,随机数字表法将正常组20只大鼠分为空白对照组、糖皮质激素组,每组10只;肾病组20只大鼠分为阿霉素肾病组、阿霉素肾病+激素灌胃组,每组10只。糖皮质激素组及阿霉素肾病+激素灌胃组建模后给予甲泼尼龙30 mg/(kg·d)灌胃,每日一次,连续10周,空白对照组及阿霉素肾病组给予等体积生理盐水灌胃。灌胃结束后将各组大鼠处死取样本检测:1.采取大鼠龈沟液,ELISA法检测各组样本龈沟液中IL-6、TNF-α水平;2.切取大鼠一侧上颌骨磨牙区牙周组织,制作上颌骨磨牙牙体牙周联合切片;3.取大鼠龈下菌斑,设计P.g特异性引物,利用SYBR Green I实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测样本中P.g的检出率和检出量。结果1.IL-6、TNF-α结果:糖皮质激素组、阿霉素肾病组、阿霉素肾病+激素灌胃组龈沟液中IL-6、TNF-α含量均高于空白对照组(P0.05),其中阿霉素肾病+激素灌胃组IL-6、TNF-α的含量明显高于其余三组(P0.01),糖皮质激素组与阿霉素肾病组的IL-6、TNF-α含量无统计学差异(P0.05);2.大鼠牙周组织切片光镜观察:空白对照组牙周膜纤维排列整齐无紊乱现象,无炎症细胞浸润,牙槽嵴顶无吸收;阿霉素肾病组牙周组织有少量炎症细胞浸润,牙周纤维排列稍有紊乱;糖皮质激素组沟内上皮和固有层可见炎细胞浸润,牙周纤维排列紊乱,毛细血管数目增多,扩张充血;阿霉素肾病+激素灌胃组牙周纤维排列紊乱,牙槽嵴顶可见破骨细胞,相对于其他组别牙周炎表现最为严重;3.qRT-PCR结果:阿霉素肾病+激素灌胃组大鼠龈下菌斑中P.g检出量高于其他三组(P0.05),阿霉素肾病组大鼠的P.g检出量高于空白对照组及糖皮质激素组(P0.05),空白对照组与糖皮质激素组大鼠的P.g检出量之间无统计学差异(P0.05);检出率:空白对照组及糖皮质激素组大鼠龈下菌斑中P.g的检出率分别为40%、50%,阿霉素肾病组与阿霉素肾病+激素灌胃组大鼠的P.g的检出率均为90%,高于空白对照组和糖皮质激素组(P0.05)。结论1.本实验制造的大鼠模型为慢性肾病模型,符合本实验要求,制造方法较为成功;2.阿霉素肾病大鼠存在牙周异常,大剂量糖皮质激素干预后会使牙周异常加重,牙周炎与肾病及糖皮质激素的应用之间存在相关性;3.肾病患者应定期进行牙周健康检查,用于指导治疗及用药情况。
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【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R692;R781

【参考文献】