ATRA对肾小球硬化大鼠肾小球TRPC6表达的影响

发布时间：2019-10-14 10:30

【摘要】：目的:通过检测全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)干预前后肾小球硬化(glomerular sclerosis,GS)大鼠肾小球瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)的表达变化,探讨ATRA对肾小球TRPC6的影响。方法:采用健康8周龄SPF级雄性Wistar大鼠(体重180±20g),随机分为3组,假手术组(SHO)、模型组(GS)和治疗组(ATRA),每组20只。采用左侧肾切除加1周后尾静脉注射阿霉素(5mg/kg)的方法建立大鼠肾小球硬化(GS)模型。术前1天,ATRA组开始给予ATRA灌胃(15mg/kg),模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,每天1次,共12周,于造模12周末处死大鼠。肾脏病理切片采用苏木精-伊红染色(HE)和高碘酸-希夫氏染色(PAS)观察肾脏的形态学变化,PAS染色计算肾小球硬化指数(GSI),电镜下观察足细胞超微结构形态学变化。检测大鼠造模前后的尿蛋白含量,以及血肌酐、尿素氮的含量。免疫组织化学法检测肾小球TRPC6、TGF-β1和IV型胶原蛋白(Col-IV)的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肾小球TRPC6 m RNA的表达,免疫印迹法(WB)检测肾小球TRPC6的蛋白表达。结果:1.与SHO组比较,GS组大鼠PAS染色显示肾小球局灶节段性硬化,电镜下肾小球足细胞足突弥漫性融合、消失,GSI指数、尿蛋白含量及血肌酐、尿素氮含量均显著升高,提示阿霉素致GS大鼠模型成功建立;2.与GS组比较,ATRA组PAS染色显示大鼠肾小球硬化程度明显减轻,电镜下肾小球足突融合、消失的程度明显减轻,GSI指数、尿蛋白含量、血肌酐、尿素氮含量及均显著降低;3.与SHO组比较,GS组肾小球TGF-β1、Col-IV和TRPC6的蛋白表达均显著升高(P均0.05),TRPC6的m RNA表达显著升高(P0.05);4.与GS组比较,ATRA组大鼠肾小球TGF-β1、Col-IV和TRPC6的蛋白表达均显著下降,TRPC6的m RNA表达显著下降(P均0.05);5.相关性分析:肾小球TRPC6的蛋白表达与GSI指数、TGF-β1、Col-IV的蛋白表达均呈显著正相关(P均0.05)。结论:在GS大鼠中,肾小球TRPC6的蛋白表达及其m RNA表达显著升高参与了GS的发生;ATRA可能通过下调肾小球TRPC6的表达而达到减轻GS的作用。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R692

【参考文献】