去泛素化酶24基因在小鼠睾丸精子发生过程中的表达特征
【图文】：
L的睾酮处理24h。弃培养液，每孔加入100～200μl稀释好的裂解液，－80℃避光保存培养板。按双荧光素酶报告基因检测试剂盒说明书(Promega)进行检测，统计分析检测数据。1．8统计学分析数据以多个重复实验的x±s表示，不同组之间的数据差异性检验是采用软件SPSS20．0，通过独立样本t检验或者One/Two-wayANO-VA分析，后以Fisher配对检验。P≤0．05为显著性差异。2结果2．1USP24在不同周龄野生型小鼠睾丸中的表达小鼠出生后2周内USP24基因表达水平很低，3周表达量开始升高，，并维持相近表达水平至第8周。见图1。图1USP24在不同周龄的小鼠睾丸组织中的表达qPCＲ结果显示，USP24基因在小鼠出生后3周开始高表达(n=4)Figure1．ExpressioncharacteristicsofUSP24inthemousetes-tisatdifferentpostnatalweeksＲesultsofreal-timePCＲshowedanincreasedexpressionofUSP24mＲNAat3postnatalweeks(n=4)．2．2USP24在AＲKO小鼠睾丸中的表达野生型成年小鼠中USP24荧光信号主要与睾丸生精小管管腔中的成熟精子共定位，AＲKO小鼠睾丸中USP24荧光信号低，且定位不清晰。见图2。2．3USP24在各周龄野生型小鼠睾丸中的表达定位USP24荧光信号在1周和2周较弱，3～4周时开始增强。第6周及第8周时出现极强的荧光信号点，与睾丸生精小管中的精子共定位。见图3。2．4USP24在小鼠精子中的表达定位免疫荧光结果显示，从小鼠附睾中分离的成熟精子做涂片，USP24主要定位于精子头部的后端。见图4。2．5USP24的转录活性受AＲ调控双荧光素酶报告基因实验结果显示，睾酮刺激下，USP24启动子的转录活性显著升高(P＜0．01)。见图5。图2USP24在野生型和AＲKO成年小鼠睾丸中的表达特征细胞核以Hoechest染成蓝色，USP24为红色(n=4)。Bar=50μmFigure2．Expr
械某墒炀鄶庸捕ㄎ唬s襅O小鼠睾丸中USP24荧光信号低，且定位不清晰。见图2。2．3USP24在各周龄野生型小鼠睾丸中的表达定位USP24荧光信号在1周和2周较弱，3～4周时开始增强。第6周及第8周时出现极强的荧光信号点，与睾丸生精小管中的精子共定位。见图3。2．4USP24在小鼠精子中的表达定位免疫荧光结果显示，从小鼠附睾中分离的成熟精子做涂片，USP24主要定位于精子头部的后端。见图4。2．5USP24的转录活性受AＲ调控双荧光素酶报告基因实验结果显示，睾酮刺激下，USP24启动子的转录活性显著升高(P＜0．01)。见图5。图2USP24在野生型和AＲKO成年小鼠睾丸中的表达特征细胞核以Hoechest染成蓝色，USP24为红色(n=4)。Bar=50μmFigure2．ExpressioncharacteristicsofUSP24inthetestesofthewild-typeandAＲKOmicedetectedbyimmunofluorescenceCellnucleiwerestainedbluebyHoechstandUSP24labeledred(n=4)．Bar=50μm．中华男科学杂志2017年11月第23卷第11期NatlJAndrol，Vol．23，No．11，November2017·965·
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