MG132对高糖条件下肾小管上皮细胞SnoN蛋白表达及纤维化效应的影响

发布时间：2020-03-04 19:38

【摘要】：目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对高糖培养条件下肾小管上皮细胞核转录共抑制因子Sno N蛋白表达的影响,探讨MG132减轻高糖状态下肾小管纤维化病变的作用及可能机制。方法:将体外培养的NRK-52E细胞分为正常组(NG)、高糖组(HG)和不同浓度MG132预处理后高糖培养组(HG+MG132),采用免疫荧光双染的方法观察E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肾小管上皮细胞中的表达和分布,用Western blotting方法检测Sno N、Samd泛素化调节因子2(Smurf2)、Arkadia、E-cadherin、α-SMA和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)等目标蛋白的相对表达量。结果:与NG组相比,HG组肾小管上皮细胞E-cadherin和Sno N表达减少(P0.05),而α-SMA、Col-Ⅰ、Smurf2和Arkadia表达增多(P0.05);与HG组相比,不同浓度MG132预处理肾小管上皮细胞后高糖培养,可见肾小管上皮细胞中Sno N和E-cadherin蛋白表达显著上调(P0.05),而α-SMA和Col-Ⅰ蛋白的表达显著下调(P0.05),并且这种效应呈量效依赖性,但MG132预处理对Smurf2和Arkadia的表达无影响。结论:MG132可对抗高糖介导的肾小管上皮细胞的纤维化效应,其机制可能是通过减少Sno N蛋白的泛素化降解作用实现的。
【图文】：

Figure1．ImmunofluorescencestainingofE-cadherinandα-SMAinNＲK-52Ecellsafter48hincubatedwithhighconcentrationofglucose(×200)．DAPIstaining(blue)representscellnucleus．图1高糖处理48h后E-cadherin和α-SMA在NＲK-52E细胞的表达2MG132对NＲK-52E细胞SnoN蛋白表达的影响与NG组相比，HG组NＲK-52E细胞中的SnoN蛋白表达显著减少(P＜0.05);而随着MG132预处理浓度的增高，HG+MG132组的SnoN蛋白表达较HG组逐渐增多，差异显著(P＜0.05)，并呈剂量依赖性，见图2。Figure2．TheeffectsofMG132ontheproteinexpressionofSnoNinNＲK-52Ecellsunderdifferentconditions．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vsNGgroup;△P＜0.05vsHGgroup;#P＜0.05vs5μmol/LMG132+HGgroup．图2MG132对高糖培养NＲK-52E细胞SnoN蛋白表达的影响3MG132对高糖培养NＲK-52E细胞Smurf2和Arkadia蛋白表达的影响HG组NＲK-52E细胞中的Smurf2和Arkadia蛋白表达较NG组显著增多，，差异有统计学意义(P＜0.05);而MG132预处理对高糖环境培养的NＲK-52E细胞中的Smurf2和Arkadia蛋白表达没有影响，见图3。Figure3．TheeffectsofMG132ontheproteinexpressionofSmurf2andArkadiainNＲK-52Ecellsincubatedun-derdifferentconditions．Mean±SD．n=3．*P＜0.05vsNGgroup．图3MG132对高糖培养NＲK-52E细胞Smurf2及Arkadia蛋白表达的影响·66·

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