激活素A在微血管内皮细胞转分化中作用的实验研究

发布时间：2020-04-10 06:11

【摘要】：目的:明确激活素A(Activin A,ACT A)对微血管内皮细胞转分化(endothelial mesenchymal transition,EndMT)的影响及卵泡抑素(follistatin,FS)的干预作用。方法:体外培养成人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),MTT法检测不同浓度rh-ACT A、rh-FS刺激内皮细胞后的增殖率变化;将细胞分为5组:对照组(C组)、TGF-β组(T组)、ACT A组(A组)、TGF-β+FS组(T+F组)、ACT A+FS组(A+F组),光学显微镜下观察细胞形态学变化,再采用免疫细胞化学染色和Western蛋白印迹技术观察ACT A和TGF-β对HUVEC细胞α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、VE-钙黏蛋白(VE-cad)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响以及FS的干预作用。结果:1.与0ng/mL ACT A组相比,10、30、60、100 ng/mL ACT A组的增殖活性均增加(F=22.768,P0.001),其中30 ng/mL ACT A组的增殖率最高,单独给予FS对细胞增生无明显影响(F=0.437,P=0.781),但FS能拮抗ACT A对内皮细胞生长的促进作用,呈剂量依赖性(F=15.270,P0.001)。2.免疫细胞化学染色和Western蛋白印迹结果示:ACT A刺激内皮细胞后,ACT A组与对照组相比,α-SMA和FN的表达增加,而VE-Cad的表达减少(均P0.05),与TGF-β组相比,α-SMA、FN和VE-Cad的表达差异无统计学意义(均P0.05);FS可阻断ACT A的上述效应(P0.05),而对TGF-β的作用无明显影响(P0.05)。ACT A+FS组与ACT A组相比,α-SMA和FN的表达减少,同时VE-Cad的表达增加(均P0.05)。TGF-β+FS组与TGF-β组比较,α-SMA、FN和VE-Cad的表达差异无统计学意义(均P0.05)。结论:ACT A可诱导微血管内皮细胞转分化及FN的合成,FS可通过阻断ACT A的转分化作用,产生内皮细胞保护作用。
【图文】：

山西医科大学硕士学位论文2 结 果CT A、FS 对 HUVEC 细胞增殖率的变化：CT A 对 HUVEC 细胞生长有明显的促进作用，在 30ng/ml 促增殖作用最到 100ng/ml 时，促进细胞增生的作用反而减弱（F=22.768，P<0.001）S 对细胞增生无明显影响（F=0.437，P=0.781）；但 FS 能拮抗 ACT A长的促进作用，呈剂量依赖性（F=15.270，P<0.001），见图 1。图 1 不同浓度 ACT A 和 FS 对细胞增殖率的影响

图 1 不同浓度 ACT A 和 FS 对细胞增殖率的影响 A 和 TGF-β 对 HUVEC 细胞形态的影响细胞呈卵圆形状，实验组 ACT A 组和 TGF-β 组作用细胞 72h 后微变化，细胞形态明显变为长梭形；TGF-β+FS 组与 TGF-β 组比化；ACT A+FS 组与 ACT A 组细胞比较，，ACT A 这种效应可被
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R692

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本文编号：2621860