石墨烯经NF-κBp65信号通路介导人肾小球足细胞上皮间质转分化

发布时间：2020-05-06 06:53

【摘要】：背景与目的近期侯凡凡及其团队研究发现:长期暴露于雾霾当中会增加膜性肾病的发病率,但其内在的发病机制如何却未有说明,既往文献也无报道。但是既往报道表明作为肾小球毛细血管网过滤血液的最后一道关卡,足细胞的结构受损和蛋白尿的出现密切相关,特别是临床上以大量蛋白尿为主的肾小球肾炎,如膜性肾病(MN)、糖尿病肾病(DN),微小病变肾小球肾炎(MCD)等病理类型,并在肾脏病进展中扮演重要角色。其中足细胞上皮间质转分化(EMT)在足细胞损伤中起着重要的作用。本研究目的:石墨烯是一种完全由碳原子组成二维纳米材料,因其由炭元素组成及纳米级粒子直径的物理性质,可以作为PM2.5的模型之一来探究雾霾引起膜性肾病的内在机制。方法(1)体外培养足细胞石墨烯以浓度0、10、20、40ug/ml的浓度刺激足细胞24h;(2)实时定量PCR及Western BLOT检测EMT相关上皮表型蛋白ZO-1、Nephrin、E-cadherin及间质表型蛋白α-SMA、Desmin的m RNA及蛋白表达,Western BLOT检测信号通路蛋白NF-κBp65表达(3)在20ug/ml石墨烯中加入NF-κB特异性抑制剂BAY 11-7082后,实时定量PCR及Western BLOT检测EMT相关蛋白Nephrin、E-cadherin及α-SMA、Desmin m RNA及蛋白表达(4)免疫荧光染色法观察各个浓度石墨烯刺激下Nephrin和α-SMA足细胞EMT相关表型蛋白的变化。结果与对照组相比不同石墨烯浓度刺激下信号通路蛋白NF-κBp65的蛋白表达升高,EMT相关蛋ZO-1、Nephrin、E-cadherin表达量下降,RT-PCR检测上述蛋白m RNA表达量与蛋白表达一致;α-SMA、Desmin分子蛋白及m RNA表达量升高。与20ug/ml石墨烯浓度相比,使用NF-κBp65信号通路特异性抑制剂BAY11-7082后EMT相关蛋白Nephrin、E-cadherin表达量升高,α-SMA、Desmin表达量下降,RT-PCR检测上述蛋白m RNA表达量与蛋白表达一致结论石墨烯经NF-κBp65信号通路促进肾小球足细胞上皮间质转分化,抑制NF-κB信号通路能够抑制足细胞上皮间质转分化。
【图文】：

石墨烯对足细胞Nephrin，，α-SMA免疫荧光的影响（细胞免疫荧光200）
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R692

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本文编号：2650869