双硫仑抑制膀胱肿瘤细胞ALDH1A1的表达并增强其顺铂敏感性

发布时间：2020-05-17 16:33

【摘要】：目的:全球范围内,每年有将近150000人死于膀胱癌。目前,针对进展期膀胱,主要有内腔镜和开放手术、局部或系统性免疫治疗、放化疗等治疗方案,尽管这些治疗策略已经改善了治疗效果并延长了膀胱癌患者的生存期以及生活治疗,但该疾病仍然无法完全治愈而且还要具有高复发风险,并治疗预后均不太理想。近些年来学者们发现,有一群未或低分化的膀胱肿瘤细胞,他们称之为膀胱肿瘤干细胞,他们认为肿瘤的复发与不良预后与膀胱肿瘤干细胞有关。现如今已有许多关于膀胱肿瘤干细胞分子标志物的研究被发表,CD44、Ck5、CD47、ALDH等分子被认为是肿瘤干细胞的分子标志物,科学家们基于这些分子标志物的研究,为膀胱癌的治疗提供新的研究方向与方法。将旧药重新用于新用途,例如在针对肿瘤的临床治疗中使用旧药去达到抑癌效果是一个非常有吸引力的,令人兴奋的领域。双硫仑就是类似的一个很好的例子。双硫仑由于其独特的已知特性,低成本,低副作用和对不同癌症的高选择性以及与其他药物的协同活性而被重新用作潜在的抗癌药物。而且双硫仑抑制肿瘤细胞的机制之一就是作为ALDH的抑制剂。本次实验探讨双硫仑对膀胱肿瘤中ALDH1A1表达的影响及其增强肿瘤细胞对顺铂敏感性的潜在机制。方法:将实验分为对照组和双硫仑(DSF)组。检索相关数据库,查询ALDH1A1膀胱癌标本中的表达情况。提取EJ细胞与SV-HUC-1细胞的mRNA,检测两者ALDH1A1的表达情况。采用克隆形成实验检测DSF对膀胱肿瘤细胞成团能力的影响。提取DSF干预组与对照组膀胱肿瘤细胞RNA,采用实时荧光定量PCR检测DSF处理后,肿瘤细胞内ALDH1A1及其他干性相关基因的表达差异。通过划痕实验检测DSF干预后0H以及24H时,DSF对膀胱肿瘤细胞迁移能力的影响。流式周期检测DSF干预后对于膀胱肿瘤细胞周期的影响。利用CCK8法以及流式检测细胞凋亡方法检测DSF对肿瘤细胞顺铂敏感性的影响。结果:DSF组膀胱肿瘤细胞的克隆成球数目明显低于对照组。对照组和DSF组克隆形成后,用结晶紫将球团染色,溶解结晶紫后,两组溶液570nm的吸光度分别为0.884±0.022和0.490±0.027,差异有明显统计学意义(P0.001)。与正常尿路上皮细胞SV-HUC-1相比,膀胱癌EJ细胞中ALDH1A1的表达量明显增高,差异具有统计学意义(P0.001)。与对照组相比,DSF组中细胞的ALDH1A1的表达水平明显下调,NOTCH2,SHH等干细胞基因的表达亦有下调,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,DSF干预后的膀胱肿瘤细胞的迁移能力明显下降。与对照组相比,DSF干预后的膀胱肿瘤细胞处于G1期的数量明显增加,而S期细胞数量下降。顺铂联合DSF与单用顺铂两种方法分别对膀胱肿瘤细胞干预24h,测得顺铂的中位杀细胞浓度分别为8umol和32umol,差异亦具有统计学意义(P0.05),说明在DSF干预后的膀胱肿瘤细胞对顺铂变得敏感。结论:膀胱癌组织较癌旁组织有较高的ALDH1A1表达。膀胱癌细胞ALDH1A1表达高于正常尿路上皮细胞。双硫仑作为ALDH的抑制剂,可通过降低膀胱肿瘤细胞内ALDH1A1的表达,影响膀胱肿瘤细胞的迁移、克隆形成能力以及影响细胞周期等表型,并且增强了膀胱肿瘤细胞对于顺铂的敏感性。
【图文】：

兰州大学硕士学位论文 双硫仑抑制膀胱肿瘤干细胞 ALDH1A1 的表达并增强其顺铂敏感性第三章 结果3.1 膀胱癌中 ALDH1A1 表达情况肌肉浸润性膀胱癌内 ALDH1A1 的表达高于非肌肉浸润性膀胱癌，肿瘤的ALDH1A1 的表达水平亦与患者的总体生存率相关：通过检索 Oncomine（https://www.oncomine.org）和 GEPIA 等数据库发现，肌肉浸润性膀胱癌内ALDH1A1 基因的表达高于非肌肉浸润性膀胱癌（图 1a）； ALDH1A1 表达水平较高的膀胱癌患者，其总体生存率降低（图 1b）。

2 膀胱癌 EJ 细胞与正常尿路上皮细胞中 ALDH1A1 表达情况。预后膀胱癌 EJ 细胞中 ALDH1A1 基因表达情况制膀胱肿瘤细胞内 ALDH1A1 基因的表达水平：被 2500nm，膀胱肿瘤细胞内 ALDH1A1 mRNA 表达水平明显降低（P量为对照组的 3.6 倍（图 3）。说明，DSF 抑制了膀胱癌 E的表达。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R737.14

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 闫帅;张赞;杨巍;樊青春;李孝忠;;铥激光在膀胱肿瘤治疗中的心得体会[J];航空航天医学杂志;2019年03期

2 成燕;;浅谈膀胱肿瘤患者的疾病获益感[J];世界最新医学信息文摘;2019年26期

3 李坤;高伦祥;;经尿道膀胱肿瘤电切术和开放手术治疗膀胱肿瘤的疗效对比[J];临床医药文献电子杂志;2019年32期

4 郎斌;;长链非编码RNA在膀胱肿瘤中的研究进展[J];现代泌尿生殖肿瘤杂志;2017年05期

5 朱存乐;李传洪;王峰;张宝鹏;罗锋;王晋龙;;西藏地区膀胱肿瘤单中心回顾性临床分析[J];西藏医药;2017年06期

6 祝子清;何露;伍庄;吕艳;吴顺理;郑新民;;经尿道等离子“V”型电极膀胱肿瘤整块切除术的临床研究(附29例报告)[J];现代泌尿生殖肿瘤杂志;2018年03期

7 高永亮;;经尿道电切术治疗表浅膀胱肿瘤70例报告[J];实用中西医结合临床;2017年05期

8 钟晔;刘健;;经尿道膀胱肿瘤电切术联合膀胱灌注对膀胱肿瘤的治疗价值评估[J];大家健康(学术版);2015年22期

9 陈志雄;潘翔男;刘永昌;;经尿道双极电切术联合吡柔比星膀胱灌注治疗浅表膀胱肿瘤的临床疗效[J];中国药物经济学;2015年04期

10 马占通;;经尿道膀胱肿瘤电切术治疗膀胱肿瘤84例的疗效观察[J];临床医药文献电子杂志;2015年12期

相关会议论文 前10条

1 杨晓峰;;膀胱肿瘤微创、精准和靶向外科诊疗的科学问题和研究策略[A];中国中西医结合学会泌尿外科专业委员会第十四次全国学术会议暨2016年广东省中西医结合学会泌尿外科专业委员会学术年会论文集[C];2016年

2 肖家全;张琦;刘锋;祁小龙;章越龙;毛夏娃;章伟;毛祖杰;张大宏;;窄光膀胱镜联合钬激光治疗膀胱肿瘤(附3例报告)[A];2009年浙江省男科、泌尿外科学术年会论文汇编[C];2009年

3 王锡斌;邹阳阳;;超声引导对膀胱肿瘤穿刺活检的临床价值[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年

4 魏强;郑硕;李响;李虹;杨宇如;王佳;曾浩;韩平;王坤杰;石明;卢一平;范天勇;陈宗福;;近十一年华西医院泌尿外科膀胱肿瘤住院病人的构成情况[A];第十六届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2009年

5 丁小波;粱朝朝;蒋云仙;叶元平;刘明;邢江n\;张贤生;郝宗耀;周俊;樊松;邰盛;王克孝;;膀胱肿瘤数据库的建立、意义与资料分析[A];第十六届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2009年

6 余升;;经尿道双极等离子体电切治疗浅表膀胱肿瘤15例[A];2013年贵州省泌尿外科学术会议论文汇编[C];2013年

7 汤富刚;吕江红;寿金朵;徐海珊;杨倩;唐海林;潘美;林莎;方凡;赵博文;;腔内超声对膀胱肿瘤诊断价值的研究[A];2005年浙江省超声医学学术年会论文汇编[C];2005年

8 余贤明;;经尿道膀胱肿瘤电切术治疗膀胱肿瘤[A];贵州省医学会泌尿外科分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年

9 黄晓飞;吴晓风;潘克宁;;10例膀胱肿瘤的诊治分析[A];2007年贵州省医学会泌尿外科分会学术年会论文汇编[C];2007年

10 胡晓华;张子扬;彭煜;;膀胱肿瘤的手术方式探讨[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

相关重要报纸文章 前10条

1 代廷荣;无痛血尿要防肿瘤[N];中国石油报;2003年

2 张超群 范晓莉;建立膀胱肿瘤免疫治疗动物模型[N];中国医药报;2005年

3 张纾难;中医临床禁忌系列讲座：淋证[N];中国中医药报;2003年

4 程树元;血尿，，人体发出的警告[N];中国中医药报;2004年

5 安徽省怀宁县医院医疗服务中心 黄芳;尿潴留的简易外治[N];中国中医药报;2009年

6 孙震鹏;膀胱肿瘤术后灌注前别喝水[N];卫生与生活报;2008年

7 孙健邋胡琼珍;腹腔镜下成功根治小儿膀胱肿瘤[N];健康报;2008年

8 东南大学附属中大医院泌尿外科 陈明　(主任医师) 吴叶青;膀胱肿瘤需要做哪些检查[N];家庭医生报;2008年

9 健康时报特约记者 刘东邋邹争春;可抑制膀胱肿瘤复发[N];健康时报;2007年

10 北京同仁医院泌尿外科主任医师 刘跃新;膀胱肿瘤早诊新技术[N];健康报;2009年

相关博士学位论文 前10条

1 石小军;PD-1阻断联合SA-GM-CSF膜锚定膀胱肿瘤干细胞疫苗治疗转移性膀胱癌及机制研究[D];南方医科大学;2018年

2 张庆松;miR-3619-5p通过作用于β-catenin和CDK2并且激活p21~(WAF1/CIP1)基因抑制膀胱肿瘤[D];华中科技大学;2018年

3 郑凯;Angiostatin对膀胱肿瘤新生血管抑制作用的实验研究[D];第四军医大学;2004年

4 郑连文;BCL-2反义寡核苷酸治疗膀胱肿瘤的研究[D];吉林大学;2004年

5 杨登科;结核杆菌Ag85B/IL-2融合蛋白的原核表达、纯化及其对膀胱肿瘤免疫治疗效应的研究[D];第三军医大学;2004年

6 罗军;NF-κB在膀胱肿瘤细胞抑制T淋巴细胞功能中的作用研究[D];第三军医大学;2004年

7 刘海涛;分泌IL-2和IFN-α2a的基因重组卡介苗构建和抗膀胱肿瘤实验研究[D];复旦大学;2005年

8 胡向农;未甲基化CpG寡核苷酸诱导人PBMC抗膀胱肿瘤细胞的实验研究[D];四川大学;2005年

9 郭启振;Survivin在膀胱肿瘤早期诊断，预后判断以及细胞凋亡方面的作用[D];中国医科大学;2006年

10 李杜渐;单核细胞趋化因子在卡介苗诱导膀胱局部抗肿瘤免疫反应中的作用及机制[D];四川大学;2004年

相关硕士学位论文 前10条

1 谢汉平;经尿道激光剜除术与电切术治疗非肌层浸润性膀胱癌的临床研究[D];湖北中医药大学;2019年

2 张涛;双硫仑抑制膀胱肿瘤细胞ALDH1A1的表达并增强其顺铂敏感性[D];兰州大学;2019年

3 郭伟;薯蓣皂苷元对膀胱肿瘤细胞的抑制作用的研究[D];武汉大学;2017年

4 孔小川;M1型巨噬细胞通过抑制NF-κB信号通路逆转M2型巨噬细胞诱导的膀胱肿瘤上皮间质转化[D];安徽医科大学;2018年

5 刘坤;超声对膀胱肿瘤诊断价值的评估[D];大连医科大学;2018年

6 王亚辉;膀胱肿瘤病灶内miR-21的表达量变化及其与癌细胞侵袭、血管新生的潜在相关性研究[D];兰州大学;2018年

7 王登殿;姜黄素通过下调Shh信号通路抑制膀胱肿瘤干细胞活性[D];安徽医科大学;2018年

8 于维冯;女性膀胱肿瘤术后预后的相关影响因素研究[D];青岛大学;2018年

9 于国强;肌层浸润性膀胱癌的保膀胱综合治疗[D];河南科技大学;2017年

10 徐晓东;基于微流控共培养条件下膀胱肿瘤细胞能量代谢特点的研究[D];青岛大学;2015年

本文编号：2668852