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SERPINA1在肾癌中的表达及相关临床意义

发布时间:2020-06-09 14:56
【摘要】:目的:采用液质联用技术从肾癌中筛选出多种差异蛋白,从中选择SERPINA1,进而探讨SERPINA1在各种类型肾癌(主要是肾透明细胞癌)中的表达情况及相关临床意义。方法:1、液质联用技术构建肾癌的差异蛋白表达谱:(1)收集肾癌标本,这些肾癌标本必须是经病理明确诊断的、在手术中切除得到的肾癌标本,将上述标本制备成多肽混合物。(2)采用分离系统为液相色谱、检测系统为质谱的液相色谱-质谱联用技术检测上述标本中的蛋白,构建肾癌的差异蛋白表达谱;(3)对在肾癌中多种高表达的蛋白进行筛选,同时查阅相关资料,从中选取SERPINA1作为目的蛋白来进行研究和阐述。选取36例患者手术中切除得到的肾癌组织及相对应的癌旁组织标本,这些肾癌患者在术前均未接受放疗、化疗等任何治疗手段。2、通过免疫印迹(Western Blot)的方法证实SERPINA1在相应组织中的表达情况;3、免疫组织化学方法验证SERPINA1在肾癌组织中的表达情况:经病理明确诊断为透明细胞肾癌的患者,取其癌组织切片,经石蜡封片保存,采用免疫组织化学的实验方法分别检测SERPINA1在患病组(阳性组)和对照组(阴性组)中的表达情况,染色后,通过显微镜下观察患病组及对照组,明确SERPINA1的表达情况,进一步了解SERPINA1与肾癌患者临床病理之间的联系。结果:1.通过液相色谱-质谱联用技术,我们在肾癌组织中得到41个差异蛋白,其中,有36个蛋白为上调表达,5个蛋白为下调表达,我们的目标蛋白SERPINA1为其中一个上调表达蛋白。2.通过免疫印迹实验可证明:相比于癌旁组织,在肾癌组织中,SERPINA1的表达量明显升高。3.在我们选择的11例肾癌患者的免疫组化实验中,肾癌患者组织切片经染色后相比于阴性对照明显表达。结论:1.SERPINA1在肾癌组织中的表达量较癌旁组织明显升高。2.SERPINA1在肾癌患者癌组织中呈高表达。
【图文】:

可分,蛋白


图 2. 1由图可知 SERPINA1 可分泌 SEC16B、CNIH1、CNIH2、CHIHCastro[6]等人的研究表明,人类 CNIH 补充了酵母中 Erv14p 的缺失免疫荧光实验表明[7]人和果蝇的蛋白质主要定位于内质网,在内质中与未成熟相关。tgf -蛋白首先作为 I 型跨膜蛋白合成,具有细胞EGF 核心区域,这是受体结合和激活所必需的。从 ER 转运后,外被移除,在高尔基体的分泌通路中产生一种可溶性形式。CNIH 过达导致 tgf -蛋白保留在 ER 中。Castro[6]等人研究的结论是,,cornich蛋白是 tgf -蛋白选择性转运和成熟所必需的。CNIH1 高表达于肝脏十二指肠、肾脏等多种器官。Utku[8]等人通过 Northern blot 分析

抗体


图 4.1 肾癌组织中 SERPINA1 阳性表达(10图 4.2 肾癌组织中 SERPINA1 阴性对照(10化实验可知,加入 SERPINA1 抗体
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R737.11

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本文编号:2704853

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