TCTP与糖尿病肾病足细胞上皮间质转化的关系
发布时间：2020-06-21 00:27
【摘要】：目的:探讨翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)在高糖环境下足细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)效应中的作用及信号通路。方法:细胞实验:分为四组,分别为正常对照组(LG,5.6mmol/l葡萄糖)、LG+TCTP(-/-)、高糖组(HG,40mmol/l 葡萄糖)、HG+TCTP(-/-),然后用免疫印迹法分别测量各组 nephrin、α-SMA、ZO-1、PI3K、p-AKT、p-mTOR、TSC2、TCTP 蛋白的表达,PCR检测TCTPmRNA的表达,免疫荧光法检测ZO-1、α-SMA蛋白的表达。动物实验:雄性DBA/2J小鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)40 mg/kg建立糖尿病模型。将小鼠分为四组,分别为正常对照组、正常对照组+TCTP(-/-)转染组、糖尿病组、糖尿病+ TCTP(-/-)转染组,6周后收集尿液标本及肾脏组织,应用免疫组织化学染色法观察各组TCTP蛋白的表达,应用免疫荧光染色观察Synaptopodin和TCTP蛋白的表达,应用电镜标本观察足细胞形态学变化。结果:1.高糖刺激的足细胞中TCTPmRNA及蛋白质的表达:与LG相比,HG组足细胞中TCTP mRNA表达明显增高(P0.05),TCTP mRNA的表达在6小时呈高峰。与LG相比,HG组足细胞中TCTP蛋白表达明显增高(P0.05),TCTP蛋白表达在24小时呈高峰。2.TCTP蛋白表达与足细胞裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)蛋白之间的关系:与LG组相比,HG组足细胞nephrin、Z0-1等SD蛋白表达明显减少(P0.05)。与HG组相比,HG+TCTP(-/-)组足细胞nephrin、Z0-1等SD蛋白表达增加(P0.05)。3.TCTP蛋白对足细胞EMT的影响:与LG组相比,HG组足细胞Z0-1蛋白表达明显减少、α-SMA蛋白表达明显增加(P0.05)。与HG组相比,HG+TCTP(-/-)组足细胞Z0-1蛋白表达增加,α-SMA蛋白表达减少(P0.05)。4.TCTP对EMT相关蛋白表达的影响:与LG组相比,HG组p-mTOR、PI3K、p-Akt蛋白表达明显增加,TSC2蛋白表达明显减少(P0.05)。与HG组相比,HG+TCTP(-/-)组p-mTOR、PI3K、p-Akt蛋白表达减少,TSC2蛋白表达增加(P0.05)。5.小鼠肾小球TCTP蛋白表达情况:与正常对照组相比,DM组TCTP蛋白在糖尿病肾病中足细胞中表达增加。6.肾小球足细胞形态变化:正常对照组足细胞足突完整,而DM组可见足突广泛融合,部分足细胞脱落,基底膜裸露,DM+TCTP(-/-)转染组可见仅有部分足突融合,其形态学变化较糖尿病组轻微。结论:1.高糖条件下足细胞中TCTP表达增加;2.抑制TCTP蛋白表达可改善高糖所介导的足细胞SD蛋白损伤;3.抑制TCTP蛋白表达可改善高糖所介导的足细胞EMT过程;4.TCTP通过PI3K-AKT-mToR信号通路介导足细胞EMT过程。
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R587.2;R692.9
【图文】：
３．邋１．邋１高糖刺激的足细胞中ＴＣＴＰ邋ｍＲＮＡ及蛋白质的表达逡逑与ＬＧ相比，ＨＧ组足细胞中ＴＣＴＰ邋ｍＲＮＡ表达明显增高，户＜邋０．邋０５，有逡逑统计学差异，ＴＣＴＰ邋ｍＲＮＡ的表达在６小时呈高峰（见下图１邋）。与ＬＧ相比，逡逑ＨＧ组足细胞中ＴＣＴＰ蛋白表达明显增高，尸＜０．０５，有统计学差异，ＴＣＴＰ逡逑蛋白表达在２４小时呈尚峰。（见下图２）逡逑２．５「逦l:逡逑２邋－逦＋逦Ｔ逡逑＜邋ｊ逦幽逦＊逡逑１４邋ｉｌ逦ｉｌ逦＂ｉｒ逦－逡逑２ｈ逦６ｈ逦２４ｈ逡逑Ｈｏｕｒｓ逡逑图１邋ＴＣＴＰ邋ｍＲＮＡ在高糖刺激下足细胞中的时间依赖性表达逡逑注：＊ｐ〈０．邋０５邋ｖｓ邋ＬＧ逡逑ｔｃｔｐ逡逑S茫蘖脑隋澹撸幔悖簦椋铄义希蹋清危龋清澹龋清澹龋清澹龋清澹龋清澹龋清义希欤希恚椋铄澹欤希恚椋铄澹常埃恚椋铄澹插澹桢澹跺澹桢澹玻村澹桢澹矗稿澹桢义贤迹插澹裕茫裕械鞍自诟咛谴碳は伦阆赴械氖奔湟览敌员泶镥义希常保插澹裕茫裕械鞍妆泶镉胱阆赴芽赘裟ぃǎ螅欤椋翦澹洌椋幔穑瑁颍幔纾恚澹樱模╁义系鞍字涞墓叵靛义嫌耄蹋亲橄啾龋龋亲樽阆赴睿澹穑瑁颍椋睢ⅲ冢埃钡龋樱牡鞍妆泶锩飨约跎伲义希穑迹埃澹埃担型臣蒲Р钜臁Ｓ耄龋亲橄啾龋龋清澹澹裕茫裕校ǎ┳樽阆赴睿澹穑瑁颍椋睢㈠义希冢埃钡龋樱牡鞍妆泶镌黾樱穑迹埃澹埃担型臣蒲Р钜臁＃峦迹常ｅ义希保冲义
本文编号：2723198
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R587.2;R692.9
【图文】：
３．邋１．邋１高糖刺激的足细胞中ＴＣＴＰ邋ｍＲＮＡ及蛋白质的表达逡逑与ＬＧ相比，ＨＧ组足细胞中ＴＣＴＰ邋ｍＲＮＡ表达明显增高，户＜邋０．邋０５，有逡逑统计学差异，ＴＣＴＰ邋ｍＲＮＡ的表达在６小时呈高峰（见下图１邋）。与ＬＧ相比，逡逑ＨＧ组足细胞中ＴＣＴＰ蛋白表达明显增高，尸＜０．０５，有统计学差异，ＴＣＴＰ逡逑蛋白表达在２４小时呈尚峰。（见下图２）逡逑２．５「逦l:逡逑２邋－逦＋逦Ｔ逡逑＜邋ｊ逦幽逦＊逡逑１４邋ｉｌ逦ｉｌ逦＂ｉｒ逦－逡逑２ｈ逦６ｈ逦２４ｈ逡逑Ｈｏｕｒｓ逡逑图１邋ＴＣＴＰ邋ｍＲＮＡ在高糖刺激下足细胞中的时间依赖性表达逡逑注：＊ｐ〈０．邋０５邋ｖｓ邋ＬＧ逡逑ｔｃｔｐ逡逑S茫蘖脑隋澹撸幔悖簦椋铄义希蹋清危龋清澹龋清澹龋清澹龋清澹龋清澹龋清义希欤希恚椋铄澹欤希恚椋铄澹常埃恚椋铄澹插澹桢澹跺澹桢澹玻村澹桢澹矗稿澹桢义贤迹插澹裕茫裕械鞍自诟咛谴碳は伦阆赴械氖奔湟览敌员泶镥义希常保插澹裕茫裕械鞍妆泶镉胱阆赴芽赘裟ぃǎ螅欤椋翦澹洌椋幔穑瑁颍幔纾恚澹樱模╁义系鞍字涞墓叵靛义嫌耄蹋亲橄啾龋龋亲樽阆赴睿澹穑瑁颍椋睢ⅲ冢埃钡龋樱牡鞍妆泶锩飨约跎伲义希穑迹埃澹埃担型臣蒲Р钜臁Ｓ耄龋亲橄啾龋龋清澹澹裕茫裕校ǎ┳樽阆赴睿澹穑瑁颍椋睢㈠义希冢埃钡龋樱牡鞍妆泶镌黾樱穑迹埃澹埃担型臣蒲Р钜臁＃峦迹常ｅ义希保冲义
本文编号：2723198
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/mjlw/2723198.html
最近更新
教材专著
