输尿管不全梗阻平滑肌肌球蛋白及其重链mRNA表达的研究

发布时间：2020-07-02 20:47

【摘要】：目的:输尿管不全梗阻为泌尿外科常见疾病,梗阻后导致输尿管、肾盂扩张积水,但该病变过程中,输尿管本身的改变将先于肾脏,探讨不全性输尿管梗阻不同时间段平滑肌结构与功能改变,可为临床如何控制输尿管不全梗阻非手术治疗时间长短及输尿管不可逆性损害提供理论参。方法:将120只SD大鼠(雌雄各60只)随机分为阴性对照组、对照组、实验组;阴性对照组30只,对照组与实验组各45只,阴性对照组不实施干预措施,对照组麻醉后腹部切开,游离右侧输尿管下段约2.5cm,逐层缝合腹部切口;实验组参照腰大肌隧道包埋法实施右侧输尿管下段包埋,建立输尿管不全梗阻模型;术后各组1、2、3周分别随机处死部分大鼠,观察、照相并切取双侧肾、输尿管,阴性对照组每周处死10只,对照组与实验组每周处死15只。取梗阻部位以上输尿管,分为两部分,一部分部分存放于-80℃冰箱保存,另一部分用4%多聚甲醛固定后制作成为石蜡标本。通过观察、测量不同时间段输尿管直径,免疫组化定性检测输尿管平滑肌肌球蛋白表达量,RT-PCR定量检测平滑肌肌球蛋白重链mRNA表达量。结果:1.输尿管形态学改变肉眼观察:阴性对照组及对照组右侧输尿管未见明确粘连、梗阻、无明显增粗,实验组1、2、3周右侧输尿管包埋处粘连,包埋近端输尿管增粗,远端与对侧无明显差异,剪断远端见尿液溢出,梗阻3周组输尿管增粗较为明显,肾脏体积也明显增大;切除输尿管剖开见实验组管腔较对照组宽;镜下观察:阴性对照组及对照组各周输尿管壁无明显变化,炎症反应轻,少量炎细胞浸润;实验组1周:右侧输尿管壁增厚,部分平滑肌增生,可见少量纤维结缔组织增生;2周:右侧输尿管壁增厚明显,平滑肌层增厚、细胞增生、核增大,部分细胞排列紊乱,可见部分输尿管纤维化改变;3周:右侧输尿管壁变薄,单位横切面平滑肌减少,细胞核变小,肌细胞减少,大量纤维化结缔组织增生。2.输尿管直径变化阴性对照组、对照组及实验组各周右侧输尿管直径间存在差异,对照组与阴性对照组右侧输尿管直径比较无显著性差异(P0.05),二者与实验组各周比较存在显著性差异(P0.01);实验组随梗阻时间延长,梗阻近端输尿管扩张逐渐增加、直径逐渐增大,以第3周组最为显著,与其它周组比较差异有统计学意义(P0.01)。3.输尿管平滑肌肌球蛋白表达实验各组右侧输尿管平滑肌肌球蛋白均有不同程度的表达,阴性对照与对照比较差异无统计学意义(P0.05),二者与实验组比较差异有统计学意义(P0.01);实验组1、2周右侧梗阻近端输尿管平滑肌肌球蛋白表达量逐渐增加、2周时最明显,3周时却显著减少,其间差异有显著性(P0.01),且3周组表达低于阴性对照与对照组(P0.01)。4.输尿管平滑肌肌球蛋白重链mRNA表达阴性对照组、对照组及实验组各周均有不同程度的表达,彼此间存在差异,阴性对照与对照组间比较差异无显著意义(P0.05),二者与实验组各周比较差异有显著意义(P0.01);实验组1、2周右侧梗阻近端输尿管平滑肌肌球蛋白重链mRNA相对表达量显著高于阴性对照和对照组(P0.01);3周时右侧梗阻近端输尿管平滑肌肌球蛋白重链mRNA相对表达量却显著低于阴性对照和对照组(P0.01);实验组1、2、3周肌球蛋白重链m RNA相对表达量随着梗阻时间延长呈现先增加后降,1、2周增加,以2周时最明显,3周降低,显著低于1周组(P0.01)。结论:1.输尿管不全梗阻时间越长,输尿管平滑肌损害越重;2.输尿管不全梗阻持续过程中,平滑肌细胞肌球蛋白及其重链表达的变化与输尿管形态结构改变基本一致。3.输尿管不全梗阻超过2周,其形态学结构与分子水平的变化较明显。
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R693
【图文】：

图 1 实验各组不同时段左右输尿管及肾脏形态学变化：A1、2、3：阴性对照组 1、2、3 周；B1、2、3：对照组 1、2、3 周；C1、2、3：实验组 1、2、3 周。2.3 输尿管不全梗阻时段直径的变化阴性对照组、对照组及实验组 1、2、3 周输尿管直径用游标卡尺（0.05mm）测得结果为：阴性对照组 1 周 1.061±0.020，2 周 1.041±0.012，3 周 1.045±0.021；对照组 1 周 1.049±0.076，2 周 1.041±0.030，3 周 1.046±0.033；实验组 1 周 1.422±0.141，2 周 2.413±0.387，3 周 4.232±0.396。阴性对照与对照组各周比较，输尿管直径变化无显著性差异（P＞0.05）；实验组各周与对照组及阴性对照组比较，右侧输尿管梗阻近端直径变化有显著性差异（P＜0.01）；实验组 1、2、3 周右侧输尿管梗阻近端扩直径逐渐增大，以 3 周最明显，具有统计学意义（P＜0.01）（见表 4、图 2）。

△P<0.01；图 2 阴性对照组、对照组与实验组右侧输尿管直径平均值柱状图2.4 镜下观察HE 染色观察到输尿管形态学改变（见图 3、图 4）。阴性对照组及对照组右侧输尿管平滑肌细胞排列规律、完整，细胞核呈长椭圆形，无明显核异型，与实验组间差异较大；实验组 1 周，右侧输尿管壁稍增厚，平滑肌层为主，平滑肌细胞排列紊乱，可见部分细胞代偿性肥大，间质增生的纤维结缔组织延伸到细胞间，细胞间连续性及规律性被局部被破坏；2 周，右侧输尿管壁明显增厚，肌层明显增生肥厚，细胞排列紊乱，体积增大，胞核成长梭型，浆膜下部分纤维也有增生；3 周，右输尿管壁明显变薄，肌层明显，细胞萎缩，体积变小，细胞核变小变圆，大量纤维增生取代平滑肌。

【参考文献】

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本文编号：2738668