UNC5C基因截短突变体的克隆鉴定及其对肾癌细胞存活功能的初步研究

发布时间：2020-07-16 03:47

【摘要】：目的:通过实验发现UNC5C基因截短突变体对肾胞癌细胞存活功能的影响。方法:通过慢病毒感染构建野生型以及突变型肾癌稳定表达细胞株,进行一些列的功能实验以及凋亡指标检测。通过野生型与突变型共转染,探究此突变对野生型的影响。结果:通过数据库分析UNC5C在三种肾癌组织的表达均低于正常组织。根据TCGA数据库肾透明细胞癌的临床数据,我们发现UNC5C高表达患者预后好于低表达患者(P0.001)。通过Cbio在线分析我们发现存在14例患者于第491位氨基酸发生突变Q491Pfs*3,并且次突变为截短突变。我们对此阶段突变位点进行野生型与突变型的质粒构建,通过慢病毒感染构建构建野生型及突变型肾癌稳定表达细胞株,提取细胞总蛋白进行凋亡相关蛋白酶Caspase-3的蛋白电泳测定,我们发现UNC5C突变体相比野生型可以减少肾癌细胞凋亡。将野生型普通表达质粒与突变体普通表达质粒与ACHN细胞系共转染,收取全蛋白检测转染情况以及NTN1的表达。我们发现UNC5C突变体稳定其野生型的蛋白表达并诱导其配体NTN1的表达,证明此截短突变体能稳定UNC5C全长的表达并诱导NTN1的表达上升从而抑制肾癌细胞的凋亡。结论:UNC5C截短突变体稳定其野生型的蛋白表达并诱导其配体NTN1的表达,从而促进肾癌细胞的存活。本研究通过实验,进一步了解了依赖性受体UNC5C的截短突变的生物学效应,为研究其它截短突变位点研究提供思路。
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R737.11
【图文】：

UNcsc在肾透明细胞癌中的突变情况

蛋白电泳验证野生型与突变型的稳定表达细胞株

UNcsc的科研热度14UNCSC相关疾病研究同时，通过公共数据库统计，UNCSC相关疾病研究情况如图ZOUNcsc与癌症、阿尔兹海默病以及帕金森病杂弓密切相关

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 李双;张磊;王尚乾;秦超;殷长军;;肿瘤睾丸抗原乳酸脱氢酶C蛋白表达对肾癌细胞功能影响的实验研究[J];现代泌尿外科杂志;2015年10期

2 胡志全,王家菁,叶章群;赫赛汀联合干扰能对肾癌细胞的杀伤抑制作用[J];中华实验外科杂志;2005年08期

3 潘李珍，张漪;人体肾癌细胞培养1例报告[J];首都医科大学学报;1996年01期

4 夏国兴;;人类肾癌细胞的发生是双缺失机理所致?[J];国外医学.遗传学分册;1989年06期

5 Joe Palca;杨晓斌;;诱导肾癌细胞自杀[J];科技英语学习;2008年08期

6 朱致晖;谷江;张永春;杨清滔;杨永安;王楠;祝庆亮;;斯钙素蛋白1下调钙离子及缺氧诱导因子1α水平调控肾癌细胞抗缺氧增殖平衡[J];浙江大学学报(医学版);2014年05期

7 孙连桃;肖伟利;;巨噬细胞移动抑制因子在肾癌中的表达及对肾癌细胞侵袭能力的影响[J];重庆医学;2017年35期

8 杨凯钧;朱斌;潘卫兵;谢礼仁;;联合使用脱甲基化药物和紫杉醇对肾癌细胞的侵袭能力影响机制研究[J];河北医药;2016年24期

9 褚晗;于德新;张志强;黄韵;谢栋栋;王毅;张涛;陈磊;丁德茂;邹慈;闵捷;王大明;;siRNA沉默肾癌细胞EGFR基因对放疗敏感性影响的研究[J];临床泌尿外科杂志;2013年04期

10 杨风光;叶烈夫;林乐;李涛;何延瑜;张志文;郭应禄;;过氧化物酶体增殖激活物受体γ配体对肾癌细胞血管生成的影响[J];福建医药杂志;2009年06期

相关会议论文 前10条

1 王威;刘;董雪;徐香兰;沈彬;寇慧珠;刘涛;吴明明;虞颂庭;;钙粘蛋白E在肾癌细胞中的表达[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年

2 王楠;谷江;;京尼平对肾癌细胞的抑制作用及对解偶联蛋白2及线粒体解偶联影响的机制研究[A];2013年贵州省泌尿外科学术会议论文汇编[C];2013年

3 申文江;孙凌飞;孙新臣;朱丽红;邵彦;黄渊;;安替可对肾癌细胞的放射敏感性影响[A];第八届全国中西医结合肿瘤学术会议论文集[C];2000年

4 王志华;胡志全;叶章群;庄乾元;杨为民;陈志强;刘继红;;树突状细胞的体外扩增及培养上清液对肾癌细胞的作用[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

5 张豪杰;许明;戎瑞明;朱同玉;;Twist2对肾癌细胞功能和肿瘤发展影响的可能的分子机制[A];中国中西医结合学会泌尿外科专业委员会第十四次全国学术会议暨2016年广东省中西医结合学会泌尿外科专业委员会学术年会论文集[C];2016年

6 张豪杰;许明;戎瑞明;朱同玉;;Twist2对肾癌细胞转移和侵袭的影响[A];中国中西医结合学会泌尿外科专业委员会第十四次全国学术会议暨2016年广东省中西医结合学会泌尿外科专业委员会学术年会论文集[C];2016年

7 张琼;陈玉凤;田熙熙;龙广凤;乔迎春;刘晓春;刘运德;申艳娜;;NLRP3在白藜芦醇杀伤786-O肾癌细胞过程中的作用的研究[A];第七届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛论文汇编[C];2016年

8 李金锋;王国民;戎瑞明;朱同玉;;SiRNA对肾癌细胞系COX-2基因的抑制作用及其质粒载体的构建[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

9 孙慧;车永胜;姜学军;;真菌次级代谢产物rasfonin促进肾癌细胞发生自噬、凋亡及程序性坏死[A];中国菌物学会2016年学术年会论文摘要集[C];2016年

10 丁晓飞;沈茂;严巧娣;陈光;;pVHL调控NEK-8维持肾癌细胞原纤毛结构稳定的机制研究[A];2013医学前沿论坛暨第十三届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2013年

相关重要报纸文章 前1条

1 记者 王丹;维生素C可让肾癌细胞因“饥饿”死亡[N];健康报;2014年

相关博士学位论文 前10条

1 周伟敏;PDK1通过PI3K/AKT信号通路介导肾细胞癌生物学行为及机制研究[D];南昌大学;2019年

2 高植鹏;PLK1通过磷酸化MCM3调控肾癌细胞增殖与凋亡的机制研究[D];中国医科大学;2019年

3 柯鑫文;miR-514a-3p靶向调控EGFR基因影响肾透明细胞癌生物学行为及机制研究[D];华中科技大学;2018年

4 刘鹊凌;CSN5通过稳定ZEB1介导肾癌细胞转移及EMT的机制研究[D];南昌大学;2018年

5 卢东源;p38IP在肾癌细胞中的功能[D];第二军医大学;2015年

6 潘周辉;RNA干扰缺氧诱导因子2基因对肾癌细胞株786-0影响的研究[D];浙江大学;2006年

7 毕建斌;肾癌细胞中环氧合酶-2的表达及非甾体类抗炎药NS398对肾癌细胞生长抑制作用的研究[D];中国医科大学;2006年

8 刘贺亮;转染p21～（WAF1/CIP1）基因对肾癌细胞促凋亡作用的研究[D];第四军医大学;1998年

9 杜贤进;蓝舌病毒湖北株选择性诱导肾癌细胞死亡及其机制的研究[D];武汉大学;2010年

10 陈少安;长链非编码RNA CCAT1沉默通过下调Livin蛋白水平途径促进肾癌细胞凋亡的机制研究[D];山东大学;2017年

相关硕士学位论文 前10条

1 邢昊天;UNC5C基因截短突变体的克隆鉴定及其对肾癌细胞存活功能的初步研究[D];中国医科大学;2019年

2 刘娅敏;A1CF-NKRF相互作用调节肾癌细胞中p65 Ser536磷酸化和IFN-β表达的分子机制研究[D];重庆医科大学;2019年

3 刘伊扬;LncRNA BX357664参与抑制肾透明细胞癌发生发展的作用机制探讨[D];南京医科大学;2016年

4 毕然;肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合穿心莲内酯对肾癌细胞的影响[D];吉林大学;2018年

5 刘忠强;14-3-3σ基因在肾癌细胞中的表达及其对细胞生物学特性的影响[D];中国医科大学;2018年

6 杨建宇;TGF-β1通过ERK和JNK信号通路诱导Fascin1表达促进肾癌细胞的迁移及侵袭[D];中国医科大学;2018年

7 张磊;基于3-氨基苯硼酸和细胞表面唾液酸特异连接作用的肾癌细胞检测新技术研究[D];重庆医科大学;2018年

8 吕不凡;肥大细胞对肾癌细胞侵袭迁移能力影响及机制的研究[D];重庆医科大学;2018年

9 钱洲楠;LncRNA PIK3CD-AS1在肾癌细胞中的功能和机制初步研究[D];江苏大学;2018年

10 何韬;miR-660-5p在肾细胞癌中的表达水平和功能研究[D];广州医科大学;2018年

本文编号：2757478