姜黄素亚型B14对血管紧张素Ⅱ引起肾小管细胞损伤的保护作用及其机制

发布时间：2020-08-01 20:58

【摘要】：目的：观察姜黄素（Curcumin，Cur）亚型B14对血管紧张素II诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞（Human Kidney11,HK11）损伤的保护作用及其作用机制。方法：首先用细胞计数板和CCK-8比色法检测细胞的存活情况，以检验所选的姜黄素及其亚型B13、B14是否对HK11细胞具有毒害作用。然后用ELISA法检测不同浓度和不同时间条件下血管紧张素II对HK11细胞Cleaved caspase-3蛋白表达的影响，以确定建立最佳糖尿病肾病细胞模型的血管紧张素II浓度和培养时间。最后利用此模型研究姜黄素亚型B14对HK11细胞的保护作用及其机制。实验分为CON组、AngII组、B13组、Cur组、B14组、CON+PI3K抑制剂组、AngII+PI3K抑制剂组、B13+PI3K抑制剂组、Cur+PI3K抑制剂组、B14+PI3K抑制剂组，共十组。以ELISA法和Western-blot法检测Cleaved caspase-3的表达情况，实验重复三次。结果:细胞计数及CCK-8比色法结果显示姜黄素及其亚型B13、B14对HK11细胞均无毒害作用（P＞0.05）；以AngII250nM培养48h时，HK11细胞Cleaved caspase-3的表达量较空白组显著升高（p0.05)；姜黄素组和B14组的Cleaved caspase-3蛋白表达量下降，与AngII组相比差异具有显著性(p0.05），以B14组的细胞凋亡降低最为明显（p0.01）；给予PI3K抑制剂后，姜黄素+PI3K抑制剂组、B14+PI3K抑制剂组与姜黄素组、B14组相比Cleaved caspase-3表达量均升高(p0.05）。结论：姜黄素亚型B14对血管紧张素Ⅱ引起的HK11细胞损伤具有保护作用，且此种保护作用与PI3K信号通路有关。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.2;R692.9
【图文】：

姜黄素,亚型,细胞存活率,比色法

第 4 章结果4.1 姜黄素及其亚型 B13、B14 对细胞活性的影响为检验所选的姜黄素及其亚型 B13、B14 是否对 HK11 细胞具有毒害作用，我们使其分别与细胞共同孵育 24h，48h，72h，然后分别用 CCK-8 比色法和细胞计数法检测细胞的存活及增殖情况。具体实验分组和结果见和图 4.1、图 4.2。

姜黄素亚型B14对血管紧张素Ⅱ引起肾小管细胞损伤的保护作用及其机制

图.喇公明b刀妞

细胞,糖尿病肾病,血管紧张素,无毒害

根据研究结果，本实验所选的姜黄素及其亚型 B13、B14 对1 细胞均无毒害作用，与空白对照组（Control）相比，差异无显（P＞0.05），可以用于后续实验研究。糖尿病肾病模型的建立为建立糖尿病肾病的细胞模型，本实验以不同浓度的 AngII 分别培养基中进行培养，分别在不同的时间段用 ELISA 法检测ed caspase-3 蛋白表达情况。以最终确定最佳糖尿病肾病细胞模血管紧张素 II 浓度和培养时间。具体实验结果见图 4.3、图 4.4。

【参考文献】