ESPL1在前列腺癌中的表达及其预后价值
发布时间：2020-09-16 07:07
目的:研究ESPL1在前列腺癌中的表达情况,并分析其表达情况与临床病理特征的关系,探讨其作为前列腺癌的一种辅助肿瘤标记物的可能性。方法:通过下载Taylor数据库基因芯片数据筛选出与肿瘤预后密切相关的基因ESPL1。采用RT-PCR、Western-Blot分别检测ESPL1的mRNA水平和蛋白水平在5种前列腺细胞株(RWPE1、BPH、Lncap、PC3、DU145)中的表达,并在人前列腺组织芯片(50例前列腺组织,30例良性前列腺组织)进行免疫组织化学染色并对ESPL1基因蛋白的表达强度定量进行免疫组化评分。通过统计分析Taylor数据库和TCGA数据库中前列腺癌患者的临床特征及其预后与ESPL1表达水平的关系,采用Cox回归模型统计Taylor数据库中前列腺癌患者ESPL1mRNA表达与无生化复发生存时间的关系,采用单因素及多因素方差分析两者间的关系。利用慢病毒载体技术构建了ESPL1敲减的DU145细胞株(DU145-sh-ESPL1)及阴性对照细胞株(DU145-NC-ESPL1),并采用Western Blot等检测其转染效率,最后我们通过构建的细胞株进行细胞周期与增殖实验,检测ESPL1对前列腺癌细胞株细胞周期和增殖的影响。结果:在Taylor数据库基因芯片数据中统计分析ESPL1的核酸水平在前列腺癌组织(n=150)与非癌组织(n=29)的表达,结果显示ESPL1在前列腺癌组织中的表达增高(PCa=6.78±1.86 vs Benign=6.69±1.89,p0.001),差异具有统计学意义。在前列腺癌细胞株中,我们同样发现ESPL1 mRNA水平和蛋白水平的表达高于良性前列腺细胞株中的表达。前列腺组织芯片免疫组化结果显示:ESPL1在前列腺癌组织中呈高表达,而在良性前列腺组织中呈低等或中等表达(PCa=4.00±1.26 vs Benign=2.47±1.28,p0.001),差异具有统计学意义。在Taylor数据库和TCGA数据库中,我们发现ESPL1在前列腺癌的表达水平明显高于良性前列腺组织,且ESPL1的表达水平与前列腺癌的无生化复发生存率(p0.001),高Gleason评分(p0.001)、晚期病理分期(p0.001)及肿瘤无转移的(p0.001)显著相关。细胞周期实验结果显示:与对照组相比,敲减ESPL1后DU145细胞S+G2期明显降低。细胞增殖实验结果显示:与对照组相比,ESPL1敲减表达的细胞株中细胞的增殖能力显著减弱。结论:ESPL1在前列腺癌中的表达水平升高且与前列腺癌患者的临床特征及其预后显著相关,可能通过细胞周期参与细胞增殖促进前列腺癌的进展,具有作为促癌基因成为前列腺癌辅助标志物的潜力。
【学位单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R737.25
【部分图文】：
. Taylor 数据库中 ESPL1 在癌与非癌组织中核酸水平的表达情况sion of nucleic acid levels in ESPL1 between cancer and non-cancein Taylor databasen x±s 150 6.78±1.86 <0 29 6.69±1.891 在前列腺癌细胞株中核酸水平和蛋白水平表达胞株中 ESPL1 的 RT-PCR 检测结果 RT-PCR 实验检测 ESPL1 在前列腺癌细胞株（Lncap、PC细胞株（RWPE-1、BPH）中核酸水平的表达，结果发现株（PC3、DU145）中的表达高于良性前列腺细胞株（具有统计学意义（见图 1）。
遵义医科大学硕士学位论文 苏嘉明2.2.2 前列腺细胞株中 ESPL1 的 Western Blot 检测结果进一步我们通过 Western Blot 实验检测 ESPL1 在前列腺癌细胞株（Lncap、PC3、DU145）和良性前列腺细胞株（RWPE-1、BPH）中蛋白水平的表达，结果显示 ESPL1 在前列腺癌细胞株（PC3、DU145）中的表达高于良性前列腺细胞株（RWPE-1、BPH）（见图 2）。
图 3 ESPL1蛋白在癌组织与非癌组织中的表达情况。 A为组织芯片（TMA）全景缩略图；B为ESPL1在癌与非癌组织中免疫组化评分统计图；C为 ESPL1在Gleason score分组（GS＜8 VS GS≥8）中免疫组化评分统计图；D为ESPL1在良性前列腺组织中的染色情况；E和F均为ESPL1在前列腺癌组织中的染色情况（E图为GS＜8，F图为GS≥8）。Fig.3 Expression of ESPL1 protein in cancer tissues and non-cancerous tissues. A is apanoramic thumbnail of tissue microarray (TMA); B is a statistical chart of ESPL1immunohistochemistry scores in cancerous and non-cancerous tissues; C is ESPL1immunohistochemistry in the Gleason score group (GS<8 VS GS≥8) Score chart; D is thestaining of ESPL1 in benign prostate tissue; Both E and F are the staining of ESPL1 inprostate cancer tissue（E is GS＜8，F is GS≥8）.2.4 ESPL1 的 mRNA 表达量与 PCA 临床病理特征及预后的关系2.4.1 ESPL1 的核酸水平在前列腺癌组织的表达情况与临床病理特征的关系
本文编号：2819553
【学位单位】：遵义医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R737.25
【部分图文】：
. Taylor 数据库中 ESPL1 在癌与非癌组织中核酸水平的表达情况sion of nucleic acid levels in ESPL1 between cancer and non-cancein Taylor databasen x±s 150 6.78±1.86 <0 29 6.69±1.891 在前列腺癌细胞株中核酸水平和蛋白水平表达胞株中 ESPL1 的 RT-PCR 检测结果 RT-PCR 实验检测 ESPL1 在前列腺癌细胞株（Lncap、PC细胞株（RWPE-1、BPH）中核酸水平的表达，结果发现株（PC3、DU145）中的表达高于良性前列腺细胞株（具有统计学意义（见图 1）。
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图 3 ESPL1蛋白在癌组织与非癌组织中的表达情况。 A为组织芯片（TMA）全景缩略图；B为ESPL1在癌与非癌组织中免疫组化评分统计图；C为 ESPL1在Gleason score分组（GS＜8 VS GS≥8）中免疫组化评分统计图；D为ESPL1在良性前列腺组织中的染色情况；E和F均为ESPL1在前列腺癌组织中的染色情况（E图为GS＜8，F图为GS≥8）。Fig.3 Expression of ESPL1 protein in cancer tissues and non-cancerous tissues. A is apanoramic thumbnail of tissue microarray (TMA); B is a statistical chart of ESPL1immunohistochemistry scores in cancerous and non-cancerous tissues; C is ESPL1immunohistochemistry in the Gleason score group (GS<8 VS GS≥8) Score chart; D is thestaining of ESPL1 in benign prostate tissue; Both E and F are the staining of ESPL1 inprostate cancer tissue（E is GS＜8，F is GS≥8）.2.4 ESPL1 的 mRNA 表达量与 PCA 临床病理特征及预后的关系2.4.1 ESPL1 的核酸水平在前列腺癌组织的表达情况与临床病理特征的关系
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相关硕士学位论文 前1条
1 苏嘉明;ESPL1在前列腺癌中的表达及其预后价值[D];遵义医科大学;2019年
本文编号：2819553
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