顺铂对肾母细胞瘤细胞株体外影响的初步研究

发布时间：2020-11-08 16:27

　　 目的初步探讨不同浓度的顺铂(Cisplatin,DDP),对肾母细胞瘤瘤株的抑制作用,为相关的动物实验提供前期工作和一定的理论依据。方法1.CCK-8法检测细胞增殖活力:在96孔板上培养两癌株(SK-NEP-1/G401),按加入顺铂的量将癌株分为6组,于24,48,72h后加入CCK-8,测量其在450nm处的光密度(OD值),并进行统计学分析2.划痕实验检测细胞迁移能力:在24孔板上培养两癌株,按加入顺铂的量将癌株分为6组,用枪头比着直尺垂直划线,于0,24,48h观察细胞的迁移情况,拍照细胞迁移情况,计算划痕愈合率%=(0 h划痕区域像素-24、48 h划痕区域像素)/0 h划痕区域像素x100%,并进行统计学分析3.蛋白质免疫印迹(WB)测BAX蛋白含量:按加入顺铂的量将癌株分为6组,提取总蛋白,再用Western blot技术检测各组内的Bax蛋白和β-Actin蛋白的含量,计算Bax蛋白相对量,并进行统计学分析结果1.在接种细胞后的第24,48,72h,未加入顺铂组(0%组)的SKNEP-1/G401细胞在A450处OD值明显高于加入顺铂组(0.1%,0.2%,0.4%,0.8%及1.6%组)(p0.001),顺铂对SK-NEP-1/G401的增殖能力的最大抑制浓度为0.2%~0.4%。2.在接种细胞后的第0,24,48h,顺铂对SK-NEP-1/G401细胞在24h及48h的划痕愈合率具有明显差异(p0.001),顺铂对SK-NEP-1迁移能力的最大抑制浓度为0.2%~0.4%。3.顺铂影响后Bax表达增加,0.2%组和0,4%组与对照组相比差异明显(p0.001),顺铂引起SK-NEP-1中Bax蛋白明显增加的浓度为0%~0.2%;0.4%组与对照组相比差异明显(p0.001),0.2%组与0.4%组之间差异明显(p0.001),顺铂引起G401中Bax蛋白明显增加的浓度为0.2%~0.4%.结论1.顺铂能够抑制肾母细胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株增殖能力,顺铂对SK-NEP-1/G401的增殖能力的最大抑制浓度为0.2%~0.4%。2.顺铂能够抑制肾母细胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株迁移,顺铂对SKNEP-1迁移能力的最大抑制浓度为0.2%~0.4%。3.顺铂能够促进Bax蛋白的表达,可能是诱导细胞凋亡和癌行为能力降低的原因;顺铂引起SK-NEP-1中Bax蛋白明显增加的浓度为0%~0.2%,顺铂引起G401中Bax蛋白明显增加的浓度为0.2%~0.4%。4.顺铂对肾母细胞瘤SK-NEP-1/G401瘤株的抑制作用存在平台期
【学位单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R737.11
【部分图文】：

经不同浓度顺铂影响后各组肾母细胞瘤的增殖能力。根据两株细胞株的 CCK-8 实验结果,绘制细胞增殖曲线(A:SK-NEP-1;B:G401),在接种细胞后的第 1，2，3 天，未加入顺铂组(0％组)的 SK-NEP-1/G401 细胞在 A450 处 OD 值明显高于加入顺铂组(0.1％，0.2％，0.4％，0.8％及 1.6％组),差异具有统计学意义(p＜0.001)，提示顺铂能抑制肾母细胞瘤的增殖能力。A 中第 2 和 3 天，0.4％，0.8％及 1.6％组差异无统计学意义(p=0.115 和 p=0.499)，且 0.4％组与 0.2％组差异存在统计学意义(p=0.004和 p=0.003),提示顺铂对 SK-NEP-1 的增殖能力的最大抑制浓度为 0.2％～0.4％。B中各天中，0.4％，0.8％及1.6％组差异无统计意义(p=0.607，p=0.635，和 p=0.778)，且 0.4％组与 0.2％组差异存在统计学意义(p＜0.001，p=0.006和 p=0.001),提示顺铂对 G401 的增殖能力的最大抑制浓度为 0.2％～0.4％。

顺铂对肾母细胞瘤细胞株体外影响的初步研究 2016 级研究生硕士论文验验证顺铂影响后 SK-NEP-1/G401 细胞迁移能力的改变。划痕实验结果(A，C:SK-NEP-1;B，D:G401)，顺铂对 SK-NEP-1/G401 细胞在 24h 及 48h 的划痕愈合率具有明显的统计学意义(p＜0.001)，提示顺铂能够减弱肾母细胞瘤细胞迁移能力。A,C 中 24h 和 48h，0.4％，0.8％及 1.6％组差异无统计意义(p=0.945 和 p=0.901)，且 0.4％组与 0.2％组差异存在统计学意义(p＜0.001和 p＜0.001),提示顺铂对 SK-NEP-1 迁移能力的最大抑制浓度为 0.2％～0.4％。

瘤细胞株体外影响的初步研究 2016 级研提示顺铂引起 SK-NEP-1 中 Bax 蛋白明显增加的浓401 中 0.2 ％ 组 和 0.4 ％ 组 分 别 上 升 了 (1.053)％，0.2％组与对照组相比差异无统计学意义(p=0比差异有统计学意义(p＜0.001),及 0.2％组与 0.4 组(p＜0.001)，提示顺铂引起 G401 中 Bax 蛋白明显增％.
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本文编号：2875032