精索静脉曲张大鼠睾丸生精上皮细胞中自噬的研究
发布时间：2020-12-02 10:36
背景与目的:在生理或应激状态下,自噬通过及时降解细胞内受损的蛋白或细胞器等,在维持细胞稳定,调节细胞免疫,保持细胞干性对抗细胞衰老及凋亡中发挥重要作用。而自噬在精索静脉曲张的研究中鲜有报道。本实验通过精索静脉曲张大鼠模型,观察睾丸生精上皮细胞中细胞凋亡及自噬的表达情况,并进行相关性分析,为精索静脉曲张致不育机制研究提供新思路。方法:取40只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、VC组（VC造模组）、VC手术组（VC+手术治疗组）、假手术组,每组10只。正常对照组不做任何处理,VC组和VC手术组行精索静脉曲张造模,假手术组打开腹腔但不做任何处理。第30天时对VC手术组行左侧精索静脉高位结扎手术治疗。第60天时对所有组大鼠取左侧睾丸标本。睾丸组织行HE染色观察大鼠曲精小管结构变化;TUNEL染色观察生精上皮细胞凋亡情况;透射电子显微镜观察生精小管上皮细胞中自噬体、自噬溶酶体等;Western-blot,RT-PCT检测LC3和Beclinl水平的变化;采用Logistic回归对Western-blot中LC3-Ⅱ/Ⅰ与生精上皮细胞凋亡指数进行分析。结果:HE染色可见VC组中睾丸部分曲精小管结构...
【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１各组大鼠睾丸组织光学显微镜下形态学观察（ＨＥ，?ｌ〇ｘｌ〇）??
图Ｄ，睾丸组织状况则与图Ａ类似。??５．２透射电镜观察??通过透射电子显微镜观察各组生精上皮细胞（见图２），正常组、假手术组??中生精上皮细胞形态规则，较少见明显肿胀的细胞器；自噬小体，溶酶体及自噬??溶酶体也比较少见。ＶＣ组中可见部分生精上皮细胞形态欠佳，线粒体，内质网??等细胞器肿胀；另外其细胞中可见较多的自噻小体，成熟的自噬溶酶体。ＶＣ手??术组中细胞形态尚规整，线粒体等细胞器肿胀明显；自噬体、成熟的自噬溶酶体??也较为常见，但相对于ＶＣ组来说，数量相对要少，但要比正常组要明显多。??１１??
５．３ＴＵＮＥＬ染色观察??对各组睾丸组织进行ＴＵＮＥＬ染色，然后在４０ｘ１０倍镜下行“弓”字观察（见??图３）。正常组及假手术组中曲精小管规则，细胞丰富且有序排列，较少见生精??上皮细胞凋亡。而ＶＣ组及ＶＣ手术治疗组可见部分曲精小管变形明显，细胞稀??疏且排布混乱，凋亡细胞明显增多。但ＶＣ组睾丸曲精小管的破坏程度要比ＶＣ??手术治疗组更为严重。??根据表１各组生精上皮细胞凋亡指数可以看出，正常组与假手术组之间睾??丸细胞凋亡指数无显著差异（尸＞〇．〇５）。然而ＶＣ组中凋亡指数达２０．０６±２．３３°／〇??显著高于正常组的２．９６±０．８９％?（Ｐ＜０．０１）。ＶＣ手术治疗组的凋亡指数要明显低??于ＶＣ组，且差异具有统计学意义〇Ｐ＜?０．０１）。??１２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]通精灵对实验性精索静脉曲张大鼠精子DNA完整性与睾丸组织氧化应激的影响[J]. 杜宝昕,郑军状,刘冰,陶方泽,方跃坤,徐文丽,崔云. 中华男科学杂志. 2017(11)
[2]精索静脉曲张大鼠睾丸细胞自噬的初步研究[J]. 朱少明,余伟民,饶婷,阮远,李浩勇,杨潇,宁金卓,袁润,赵胜,程帆. 现代泌尿外科杂志. 2017(05)
[3]针挑治疗对精索静脉曲张不育患者血液流变指标及疗效的影响[J]. 陈栋,何肖,陈卓铭,胡雷,钟键,洪衍波,黄君,章岳娟,郑富仕. 中国中西医结合杂志. 2017(03)
[4]加味桂枝茯苓汤治疗肾虚血瘀型精索静脉曲张性不育患者疗效观察[J]. 黄小庆,苏劲松,徐云森,王晓文,郭宇明,严文兵,吴江平,龙云,招活,高荣芳. 中国实验方剂学杂志. 2017(08)
[5]精索静脉显微手术对改善精索静脉曲张患者精子质量的效果分析[J]. 刘刚,朝鲁,陈锐,崔志刚,刘小勇,宋笑童,刘淳,向瑜,韩文涛. 现代泌尿外科杂志. 2015(10)
[6]茶多酚对精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响[J]. 武政华,柯鑫文,冯少勇,张利,武进峰,程伟,成建军,张建东,张雁钢. 中华男科学杂志. 2015(08)
[7]EAU、AUA-ASRM、中国精索静脉曲张诊疗指南解读[J]. 王万荣,谭艳,谢胜,谢子平,欧阳海,李韬,康照鹏. 世界最新医学信息文摘. 2015(50)
[8]Bcl-2、CytC和caspase-3在实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞中的表达及意义[J]. 成建军,张雁钢,李超鹏. 中国医药导报. 2012(05)
[9]自噬与泛素化蛋白降解途径的分子机制及其功能[J]. 陈科,程汉华,周荣家. 遗传. 2012(01)
[10]精索静脉曲张患者血中儿茶酚胺浓度的变化[J]. 许宁,曹林升,薛学义,江涛,罗义麒. 现代泌尿外科杂志. 2007(05)
硕士论文
[1]精索静脉曲张与雄性激素水平的相关性研究[D]. 陈云斌.广西医科大学 2013
[2]精索静脉曲张对青春期大鼠生精细胞凋亡基因Bcl-2和Bax表达的影响[D]. 陈乐仲.汕头大学 2006
本文编号：2895176
【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１各组大鼠睾丸组织光学显微镜下形态学观察（ＨＥ，?ｌ〇ｘｌ〇）??
图Ｄ，睾丸组织状况则与图Ａ类似。??５．２透射电镜观察??通过透射电子显微镜观察各组生精上皮细胞（见图２），正常组、假手术组??中生精上皮细胞形态规则，较少见明显肿胀的细胞器；自噬小体，溶酶体及自噬??溶酶体也比较少见。ＶＣ组中可见部分生精上皮细胞形态欠佳，线粒体，内质网??等细胞器肿胀；另外其细胞中可见较多的自噻小体，成熟的自噬溶酶体。ＶＣ手??术组中细胞形态尚规整，线粒体等细胞器肿胀明显；自噬体、成熟的自噬溶酶体??也较为常见，但相对于ＶＣ组来说，数量相对要少，但要比正常组要明显多。??１１??
５．３ＴＵＮＥＬ染色观察??对各组睾丸组织进行ＴＵＮＥＬ染色，然后在４０ｘ１０倍镜下行“弓”字观察（见??图３）。正常组及假手术组中曲精小管规则，细胞丰富且有序排列，较少见生精??上皮细胞凋亡。而ＶＣ组及ＶＣ手术治疗组可见部分曲精小管变形明显，细胞稀??疏且排布混乱，凋亡细胞明显增多。但ＶＣ组睾丸曲精小管的破坏程度要比ＶＣ??手术治疗组更为严重。??根据表１各组生精上皮细胞凋亡指数可以看出，正常组与假手术组之间睾??丸细胞凋亡指数无显著差异（尸＞〇．〇５）。然而ＶＣ组中凋亡指数达２０．０６±２．３３°／〇??显著高于正常组的２．９６±０．８９％?（Ｐ＜０．０１）。ＶＣ手术治疗组的凋亡指数要明显低??于ＶＣ组，且差异具有统计学意义〇Ｐ＜?０．０１）。??１２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]通精灵对实验性精索静脉曲张大鼠精子DNA完整性与睾丸组织氧化应激的影响[J]. 杜宝昕,郑军状,刘冰,陶方泽,方跃坤,徐文丽,崔云. 中华男科学杂志. 2017(11)
[2]精索静脉曲张大鼠睾丸细胞自噬的初步研究[J]. 朱少明,余伟民,饶婷,阮远,李浩勇,杨潇,宁金卓,袁润,赵胜,程帆. 现代泌尿外科杂志. 2017(05)
[3]针挑治疗对精索静脉曲张不育患者血液流变指标及疗效的影响[J]. 陈栋,何肖,陈卓铭,胡雷,钟键,洪衍波,黄君,章岳娟,郑富仕. 中国中西医结合杂志. 2017(03)
[4]加味桂枝茯苓汤治疗肾虚血瘀型精索静脉曲张性不育患者疗效观察[J]. 黄小庆,苏劲松,徐云森,王晓文,郭宇明,严文兵,吴江平,龙云,招活,高荣芳. 中国实验方剂学杂志. 2017(08)
[5]精索静脉显微手术对改善精索静脉曲张患者精子质量的效果分析[J]. 刘刚,朝鲁,陈锐,崔志刚,刘小勇,宋笑童,刘淳,向瑜,韩文涛. 现代泌尿外科杂志. 2015(10)
[6]茶多酚对精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响[J]. 武政华,柯鑫文,冯少勇,张利,武进峰,程伟,成建军,张建东,张雁钢. 中华男科学杂志. 2015(08)
[7]EAU、AUA-ASRM、中国精索静脉曲张诊疗指南解读[J]. 王万荣,谭艳,谢胜,谢子平,欧阳海,李韬,康照鹏. 世界最新医学信息文摘. 2015(50)
[8]Bcl-2、CytC和caspase-3在实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞中的表达及意义[J]. 成建军,张雁钢,李超鹏. 中国医药导报. 2012(05)
[9]自噬与泛素化蛋白降解途径的分子机制及其功能[J]. 陈科,程汉华,周荣家. 遗传. 2012(01)
[10]精索静脉曲张患者血中儿茶酚胺浓度的变化[J]. 许宁,曹林升,薛学义,江涛,罗义麒. 现代泌尿外科杂志. 2007(05)
硕士论文
[1]精索静脉曲张与雄性激素水平的相关性研究[D]. 陈云斌.广西医科大学 2013
[2]精索静脉曲张对青春期大鼠生精细胞凋亡基因Bcl-2和Bax表达的影响[D]. 陈乐仲.汕头大学 2006
本文编号：2895176
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