长链非编码RNA THOR调节肾细胞癌细胞的生物学功能及其机制研究

发布时间：2020-12-05 22:36

　　研究背景与目的:肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）的发病率近年来呈快速增长的趋势,已严重威胁人类的健康。几乎所有肾细胞癌对化疗和放疗不敏感,而近来靶向治疗的兴起,为治疗肾细胞癌开启了全新的道路。长链非编码RNA（Longnoncoding RNAs,LncRNAs）可通过多种机制广泛参与基因表达的调控。最近发现的一种新的非常保守的长链非编码RNA THOR与恶性肿瘤的发生发展相关。本文研究了 THOR在肾细胞癌细胞中的表达及其生物学功能,并探讨其可能的机制,以期为寻找新的治疗靶点提供理论依据。研究方法和内容:1.qPCR检测THOR在人肾细胞癌组织、肾细胞癌细胞株（786-0、A498、ACHN及原代人肾细胞癌细胞）的表达,并检测THOR在癌旁肾组织、HK-2和原代人肾上皮细胞中的表达情况。2.针对786-0细胞株,分别运用siRNA敲减、CRISPR/Cas9敲除THOR的表达后,qPCR检测THOR;细胞计数检测细胞生长;MTT法检测细胞存活;克隆形成试验、BrdU ELISA法检测细胞增殖。针对原代人肾细胞癌细胞,HK-2和原代人肾上皮细胞,运用siRN... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－１?ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在肾癌组织与癌旁组织中的表达情况（＊ｐ＜０．０５）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?－１?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＬｎｃＲＮＡ?ＴＨＯＲ?ｉｎ?ｒｅｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｃａｒｃｉｎｏｍａ?ａｎｄ?ａｄｊａｃｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（＊ｐ＜０．０５）??

Ｎ：?Ｓｕｒｒｏｕｄｉｎｇ?ｒｅｎａｌ?ｔｉｓｓｕｅｓ??Ｔ：?ＲＣＣ?Ｔｕｍｏｒ?ｔｉｓｓｕｅｓ??图１－１?ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在肾癌组织与癌旁组织中的表达情况（＊ｐ＜０．０５）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?－１?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＬｎｃＲＮＡ?ＴＨＯＲ?ｉｎ?ｒｅｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｃａｒｃｉｎｏｍａ?ａｎｄ?ａｄｊａｃｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（＊ｐ＜０．０５）??１．２．２?ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在不同细胞株中的表达情况??观察到ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在人肾细胞癌组织中具有特异性表达后，我们接下??来检测肾细胞癌细胞中的ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ表达情况。结果显示在肾小管上皮细??胞株ＨＫ－２?（“ＨＫ－２”）及原代人肾小管上皮细胞（“Ｅｐｉ”）中未检测到ＬｎｃＲＮＡ??ＴＨＯＲ表达。在３种肾细胞癌细胞株（７８６－０，?Ａ４９８和ＡＣＨＮ）中ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ??有表达，其中在７８６－０细胞系中表达量相对较高，在２种不同原代人肾细胞癌??细胞（“ＲＣＣ１”和“ＲＣＣ２”）中１＾１＾人１１１０１１也有表达，上述各细胞株与１？：－２??比较差异均具有统计学意义（＊ｐ＜０．０５）。（图１－２）??２３??

计学意义（＊ｐ＜０．０５）。其中ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９编辑作用后细胞生长能力受抑制程度最??高。无意义转染对照细胞（ｓｉ－Ｃ）与未转染的亲代对照细胞（Ｐａｒｅｎｔａｌ）相比，培??养第９６小时时活细胞计数值无明显差异。（图２－２）??３７??

【参考文献】：
期刊论文
[1]Long Non-coding RNA MEG3 Induces Renal Cell Carcinoma Cells Apoptosis by Activating the Mitochondrial Pathway[J]. 王淼,黄韬,罗刚,黄超,肖行远,汪良,蒋国松,曾甫清.  Journal of Huazhong University of Science and Technology(medical Sciences). 2015(04)
[2]Cancer statistics: updated cancer burden in China[J]. Wanqing Chen.  Chinese Journal of Cancer Research. 2015(01)



本文编号：2900204