usp22在肾癌中的表达及临床意义

发布时间：2017-04-08 10:05

  本文关键词：usp22在肾癌中的表达及临床意义，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的研究泛素特异肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22)在肾肿瘤发生时其在肿瘤组织及对应癌旁组织(距离肾肿瘤"g2CM)中的表达情况,并分析癌组织和癌旁组织中USP22的表达差异情况,结合临床病理资料,探讨其可能存在的因果关系,进而得出相关性意义。方法分析收集自2012年7月至2013年12月厦门大学附属第一医院泌尿外科肾癌根治手术切除的肿瘤标本59例,手术后病理回报确认恶性程度、淋巴结转移情况以及病理分级等病理临床数据。癌旁组织以及对应的癌组织各59例,其中癌旁组织取材于癌组织远端("g2CM)的癌旁肾组织,而癌组织则取材于未发生坏死的癌组织部分,癌组织是肉眼明显可分辨的,其中男性患者40人,女性患者19人,年龄约在30-91岁之间,平均58.2岁,而癌旁组织则是远离肿瘤的切缘。患者在接受肾癌根治手术前均未接受任何放疗或者化疗。在59例肾肿瘤标本中,肾透明细胞癌占主要。用Trizol抽提其中20例患者癌组织及相应癌旁组织总RNA,经逆转录及合成特异性引物行实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同病例USP22的基因表达;通过免疫组织化学(二步法)法检测59例病例标本的USP22蛋白表达细胞定位以及蛋白表达量情况;蛋白裂解液裂解其中20例患者对应癌组织及癌旁组织蛋白,进行蛋白免疫印迹(Western Blotting)检测,观察不同病例标本的数据差异并与临床资料相结合,进行相关分析,对比分析癌组织与癌旁组织USP22表达水平的差异。结果在59例肾肿瘤标本中,肾透明细胞癌占51例(86.4%),乳头状细胞癌占3例(5.1%),嫌色细胞癌1例(1.7%),梭形细胞癌1例(1.7%),肾上皮样血管平滑肌脂肪瘤1例(1.7%),嗜酸细胞腺瘤2例(3.4%)。经检测,在59例肿瘤标本中,免疫组化结果显示,癌旁组织组的阳性表达率高达93.2%,蛋白主要定位于胞质。癌组织的蛋白表达阳性率为47.5%,且表达强度较癌旁组织弱,差异具有统计学意义。其和Western Blotting、以及RT-PCR实验结果均一致,癌组织中的蛋白及m RNA的表达量与癌旁组织("g2CM)相比,未见上升,且与癌旁组织USP22的表达相比,其表达相对较少,差异具有统计学意义(P0.05)。与目前文献报道的USP22在人类肿瘤发生时其表达量上升的实验结果不相符。本实验的结果显示,在肾癌(透明细胞癌为主)发生时,USP22的表达并未明显升高,相反的是,相较于癌旁组织(距离肾肿瘤"g2CM)其表达量下降,结果具有统计学意义(P0.05)。结论USP22在肾癌(透明细胞癌为主)发生时,其表达量并未较癌旁组织(距离肾肿瘤"g2CM)升高。泛素特异肽酶22(USP22)视为一种潜在的肿瘤干细胞标记物,在人类许多肿瘤发生时其表达量会增加相应增加,可能上调了肿瘤组织中的某些肿瘤相关基因的,从而引起正常细胞发生癌变,但本实验结果表明,在肾肿瘤发生时,未检测到USP22的表达增高,鉴于其机制尚不清楚,需要进一步的实验来验证。
【关键词】：肾肿瘤 泛素特异肽酶22 免疫组织化学 实时定量PCR
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.11
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-16
• 1.1 USP22的发现及其分子结构9-10
• 1.2 USP22参与的基因转导及其调节10-11
• 1.3 USP22与人类肿瘤11-13
• 1.4 USP22与泌尿系统肿瘤13
• 1.5 肾肿瘤的病因13-14
• 1.6 本论文的思路、目的和意义14-16
• 材料与方法16-29
• 2.1 主要仪器16
• 2.2 生物材料16
• 2.3 主要试剂来源16-17
• 2.4 主要试剂配制17-19
• 2.5 实验方法19-28
• 2.6 统计学方法28-29
• 实验结果29-44
• 3.1 总RNA的提取，逆转录及RT-PCR实验结果29-34
• 3.2 免疫组织化学实验结果34-40
• 3.3 免疫印迹（western blotting）实验结果40-44
• 讨论44-48
• 结论48-49
• 参考文献49-53
• 文献综述53-62
• 参考文献59-62
• 致谢62-63

【参考文献】

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1 魏卓;肿瘤干细胞标志物usp22在人膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义[D];华中科技大学;2011年

  本文关键词：usp22在肾癌中的表达及临床意义，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：292609