MiR-130b通过TGF-β1通路调节自噬对糖尿病肾脏纤维化的作用和机制的研究

发布时间：2020-12-28 11:31

　　目的:糖尿病肾病（DN）又称糖尿病肾小球硬化症,糖尿病肾病（DN）是糖尿病最常见的微血管并发症,同时也是导致糖尿病患者致死的首位原因。DN的发病机制庞杂,参与调控的通路众多,在诊断上一般依赖尿微量白蛋白和肾脏组织活检,缺乏有效的、稳定的、非创伤性的检测方法。医治上给予降血糖和血压,仅能延缓DN的发展。而人工透析和肾脏移植治疗不仅代价高昂,而且应用上有局限性。随着对DN研究的深入,人们发现自噬与DN肾脏纤维化联系尤为密切。另一方面,miRNA是在机体稳定存在的、拥有高度组织特异性的小分子RNA,在DN发生发展过程中作用重大。本研究旨在通过建立db/db小鼠模型和人肾小球系膜细胞的培养,对miR-130b的表达、纤维化相关蛋白以及自噬活性水平进行研究,探讨miR-130b对DN的自噬与肾脏纤维化的影响,并对其靶基因进行预测,以揭示糖尿病肾病纤维化过程中的潜在机制,为DN的肾脏纤维化的预防和治疗提供新方向。方法:动物实验用db/db小鼠及C57BLKS小鼠建立糖尿病肾病模型和对照,监测各组小鼠的一般情况和指标,喂养结束后收集相应标本检测小鼠的空腹血糖、血肌酐等,并用HE和Masson染色观察... 

【文章来源】：河南科技大学河南省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 绪论
    1.1 研究背景与现状
    1.2 糖尿病肾病概述
    1.3 微小RNA与糖尿病肾病之间的关系
    1.4 自噬与糖尿病肾病之间的关系
    1.5 微小RNAs对自噬的调控
    1.6 miR-130b、TGF－β1、自噬与糖尿病肾病相关性分析及展望
第2章 Db/db小鼠糖尿病肾病模型的建立及相关因子表达
    2.1 研究对象与实验方法
        2.1.1 研究对象
        2.1.2 研究方法
    2.2 主要实验试剂
    2.3 主要仪器设备
    2.4 主要试剂配制
    2.5 小鼠的一般生化指标监测
    2.6 小鼠的肾组织病理学观察
    2.7 qRT-PCR检测
    2.8 小鼠肾组织蛋白的提取和浓度测定
    2.9 Western blot检测
第3章 Db/db小鼠实验结果及讨论
    3.1 .各组小鼠空腹血糖和血清肌酐的变化
        3.1.1 小鼠空腹血糖的变化
        3.1.2 小鼠血清肌酐的变化
    3.2 各组小鼠肾脏组织病理学变化
        3.2.1 HE染色结果
        3.2.2 Masson染色结果
        3.2.3 透射电镜观察各组小鼠结果
    3.3 各组小鼠肾脏miR-130b、纤维化因子FN,colI mRNA的表达情况
    3.4 免疫印迹法结果
    3.5 讨论
第4章 miR-130b对人肾小球系膜细胞自噬和纤维化的影响
    4.1 人肾小球系膜细胞（HMC）的分组情况及培养方法
        4.1.1 细胞种类及来源
        4.1.2 主要实验试剂
        4.1.3 主要实验仪器
        4.1.4 常用试剂配制
        4.1.5 细胞培养方法
        4.1.6 细胞实验分组情况
    4.2 Westernblot实验
    4.3 qRT-PCR实验
    4.4 JC-1 线粒体膜电位的检测实验
第5章 细胞实验结果及讨论
    5.1 各组HMC细胞miR-130b及纤维化因子mRNA表达情况
    5.2 各组HMC细胞纤维化相关蛋白的表达情况
    5.3 各组HMC细胞自噬水平的表达情况
    5.4 各组HMC细胞JC-1 线粒体膜电位的检测结果
    5.5 各组HMC细胞对miRNA-130b靶基因ACVR1 的表达情况
    5.6 讨论
第6章 小结
第7章 结论
参考文献
缩略语词汇表
致谢
攻读学位期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]糖尿病肾病发病机制的研究进展[J]. 刘蕊,戴岳.  药学与临床研究. 2018(03)
[2]2型糖尿病db/db小鼠肾脏动态病理特点[J]. 孙竹梅,梁伟时,康佳丽,孟徐兵,王建行,韩淑英.  吉林大学学报(医学版). 2018(03)
[3]microRNAs在糖尿病肾病中的研究进展[J]. 唐春银,李玲玉,武艳,袁晓环,崔晓丽,闫昭威.  牡丹江医学院学报. 2017(05)
[4]糖尿病肾病发病机制的研究进展[J]. 孙迎春,解汝娟.  医学综述. 2017(16)
[5]近五年中医药关于肾纤维化防治的研究回顾[J]. 杨兰,陈扬,何小平.  现代中西医结合杂志. 2017(20)
[6]TWEAK调控巨噬细胞外泌体中miRNA-7的表达抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移的研究[J]. 李栋,胡媛,吴安玥,邱兴堤,邱丽华.  上海交通大学学报(医学版). 2017(06)
[7]自噬与糖尿病肾病的研究进展[J]. 童楠,张宁.  世界中西医结合杂志. 2017(05)
[8]TGF-β1通过诱导自噬促进胃癌SGC7901细胞侵袭[J]. 郑翔,邓兵.  现代肿瘤医学. 2017(14)
[9]microRNA-130b促进三阴性乳腺癌细胞及其作用机制[J]. 金薇,罗祎,刘溦薇,陈国庆,周鸣.  外科理论与实践. 2017(01)
[10]MicroRNA在糖尿病肾病中的研究进展[J]. 肖艳华,何笑云,周素娴.  实用医学杂志. 2016(20)

博士论文
[1]自噬通过mTOR信号通路保护胃粘膜上皮细胞免于乙醇诱导的氧化损伤[D]. 常伟龙.华中科技大学 2016

硕士论文
[1]miR-130b调控TGF-β1/Smads信号通路对糖尿病肾脏纤维化的作用和机制研究[D]. 史景霞.河南科技大学 2018



本文编号：2943679