M2型巨噬细胞对草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞凋亡的保护作用机制研究
发布时间：2020-12-29 07:45
目的明确人单核细胞（THP-1）细胞序贯诱导为M1型与M2型巨噬细胞的方法,探讨共培养条件下M2型巨噬细胞对草酸钙（CaOx）晶体诱导人肾小管上皮细胞（HK-2）氧化应激损伤及凋亡的保护作用机制。方法利用10ng/ml的佛波酯（Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA）诱导THP-1细胞24h为M0型巨噬细胞,100ng/ml的脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）及10ng/ml的干扰素-γ（Interferon-γ,IFN-γ）诱导M0型巨噬细胞48h向M1型巨噬细胞极化,20ng/ml的白介素-4（Interleukin-4,IL-4）及20ng/ml的白介素-13（Interleukin-13,IL-13）诱导M0型巨噬细胞48h向M2型巨噬细胞极化,采用实时荧光定量PCR检测CD68、TNF-α、IL-1β、IL-1ra、CD206mRNA,酶联免疫吸附测定（Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA）IL-6、IL-10,Western Blot测定转化生长因子-β（Transforming ...
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
巨噬细胞标志物CD68mRNA相对表达量（**P<0.01）
图 1-2：M1 型巨噬细胞标志物 TNF-α、IL-1βmRNA 相对表达量，A:各组细胞 TNF-αmRNA 相对表达情况；B:各组细胞 IL-1βmRNA 相对表达情况（**P<0.01）。Figure1-2：RelativeexpressionofTNF-αandIL-1βmRNAofM1macrophagemarkers,A:Relativeexpression of TNF-α mRNA in each group;B:Relative expression of IL-1β mRNA in each group(** P <0.01 ).1.3 M2 型巨噬细胞标志物 CD206、IL-1ra mRNA 相对表达量M1 型、M2 型巨噬细胞相对 M0 型巨噬细胞 CD206mRNA 相对表达情况：（2.44±0.80）倍、（9.13±2.10）倍，M2 型巨噬细胞 CD206 mRNA相对表达量显著高于 M0 型、M1 型巨噬细胞，差异有统计学意义（**P<0.01），见图 1-3-A。M1 型、M2 型巨噬细胞相对 M0 型巨噬细胞IL-1ra mRNA的相对表达量分别为（：2.41±0.82）倍、（6.33±1.54）倍，M2 型巨噬细胞 IL-1ra 相对表达量显著高于 M0 型、M1 型巨噬细胞，差异有统计学意义（**P<0.01），见图 1-3-B。
图 1-2：M1 型巨噬细胞标志物 TNF-α、IL-1βmRNA 相对表达量，A:各组细胞 TNF-αmRNA 相对表达情况；B:各组细胞 IL-1βmRNA 相对表达情况（**P<0.01）。Figure1-2：RelativeexpressionofTNF-αandIL-1βmRNAofM1macrophagemarkers,A:Relativeexpression of TNF-α mRNA in each group;B:Relative expression of IL-1β mRNA in each group(** P <0.01 ).1.3 M2 型巨噬细胞标志物 CD206、IL-1ra mRNA 相对表达量M1 型、M2 型巨噬细胞相对 M0 型巨噬细胞 CD206mRNA 相对表达情况：（2.44±0.80）倍、（9.13±2.10）倍，M2 型巨噬细胞 CD206 mRNA相对表达量显著高于 M0 型、M1 型巨噬细胞，差异有统计学意义（**P<0.01），见图 1-3-A。M1 型、M2 型巨噬细胞相对 M0 型巨噬细胞IL-1ra mRNA的相对表达量分别为（：2.41±0.82）倍、（6.33±1.54）倍，M2 型巨噬细胞 IL-1ra 相对表达量显著高于 M0 型、M1 型巨噬细胞，差异有统计学意义（**P<0.01），见图 1-3-B。
【参考文献】：
期刊论文
[1]M2型巨噬细胞对草酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞损伤的影响[J]. 刘权,关晓峰,陶芝伟,王翔,吴基华,刘云龙,何子奇,邓耀良. 广东医学. 2018(03)
[2]羟基磷灰石诱导巨噬细胞炎性反应及凋亡[J]. 刘权,陶芝伟,关晓峰,吴基华,刘云龙,何子奇,邓耀良. 中华实验外科杂志. 2017 (12)
[3]流式细胞术分析PMA诱导THP-1分化为巨噬细胞的表型特征[J]. 彭卓颖,李想,丛喆,薛婧. 中国比较医学杂志. 2017(10)
[4]IL-37通过促进巨噬细胞M2型极化在缺氧/复氧诱导的肝细胞损伤中的保护作用[J]. 朱迪,李婷婷,陈青松,牟童,汤成泳. 复旦学报(医学版). 2017(04)
[5]经典活化型/替代活化型巨噬细胞对血管平滑肌细胞凋亡的影响[J]. 尚茹茹,刘晓红,张锦,吕淑萍,李飞虹. 中国药物与临床. 2016(04)
[6]不同极化类型巨噬细胞参与肾纤维化的动物实验研究[J]. 姜亚丽,孙世仁,赵俊龙,王媛媛,刘晓渭,秦鸿雁. 中华肾脏病杂志. 2015 (03)
[7]低剪切力通过激活Akt信号和增加活性氧簇诱导人血管内皮细胞凋亡(英文)[J]. 张俊霞,王志梅,左广峰,李冰,张俊杰,田乃亮,陈绍良. 南方医科大学学报. 2013(03)
[8]不同激活状态的巨噬细胞培养上清液对7721肝癌细胞增殖和迁移的影响[J]. 黄莉,李山,彭契六,刘银坤,梁宏洁,曹昭,谢丽,翟励敏,秦雪. 临床检验杂志. 2013(02)
[9]RAW264.7细胞M1/M2亚型的诱导和鉴定[J]. 陈涛,梁潇,贺明,乌宇亮,袁祖贻. 中国分子心脏病学杂志. 2011(02)
[10]巨噬细胞在高草酸尿症大鼠肾内结石晶体形成过程中的作用[J]. 关晓峰,邓耀良,黎承扬,孙丙华. 中华泌尿外科杂志. 2010 (02)
本文编号：2945288
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：91 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
巨噬细胞标志物CD68mRNA相对表达量（**P<0.01）
图 1-2：M1 型巨噬细胞标志物 TNF-α、IL-1βmRNA 相对表达量，A:各组细胞 TNF-αmRNA 相对表达情况；B:各组细胞 IL-1βmRNA 相对表达情况（**P<0.01）。Figure1-2：RelativeexpressionofTNF-αandIL-1βmRNAofM1macrophagemarkers,A:Relativeexpression of TNF-α mRNA in each group;B:Relative expression of IL-1β mRNA in each group(** P <0.01 ).1.3 M2 型巨噬细胞标志物 CD206、IL-1ra mRNA 相对表达量M1 型、M2 型巨噬细胞相对 M0 型巨噬细胞 CD206mRNA 相对表达情况：（2.44±0.80）倍、（9.13±2.10）倍，M2 型巨噬细胞 CD206 mRNA相对表达量显著高于 M0 型、M1 型巨噬细胞，差异有统计学意义（**P<0.01），见图 1-3-A。M1 型、M2 型巨噬细胞相对 M0 型巨噬细胞IL-1ra mRNA的相对表达量分别为（：2.41±0.82）倍、（6.33±1.54）倍，M2 型巨噬细胞 IL-1ra 相对表达量显著高于 M0 型、M1 型巨噬细胞，差异有统计学意义（**P<0.01），见图 1-3-B。
图 1-2：M1 型巨噬细胞标志物 TNF-α、IL-1βmRNA 相对表达量，A:各组细胞 TNF-αmRNA 相对表达情况；B:各组细胞 IL-1βmRNA 相对表达情况（**P<0.01）。Figure1-2：RelativeexpressionofTNF-αandIL-1βmRNAofM1macrophagemarkers,A:Relativeexpression of TNF-α mRNA in each group;B:Relative expression of IL-1β mRNA in each group(** P <0.01 ).1.3 M2 型巨噬细胞标志物 CD206、IL-1ra mRNA 相对表达量M1 型、M2 型巨噬细胞相对 M0 型巨噬细胞 CD206mRNA 相对表达情况：（2.44±0.80）倍、（9.13±2.10）倍，M2 型巨噬细胞 CD206 mRNA相对表达量显著高于 M0 型、M1 型巨噬细胞，差异有统计学意义（**P<0.01），见图 1-3-A。M1 型、M2 型巨噬细胞相对 M0 型巨噬细胞IL-1ra mRNA的相对表达量分别为（：2.41±0.82）倍、（6.33±1.54）倍，M2 型巨噬细胞 IL-1ra 相对表达量显著高于 M0 型、M1 型巨噬细胞，差异有统计学意义（**P<0.01），见图 1-3-B。
【参考文献】：
期刊论文
[1]M2型巨噬细胞对草酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞损伤的影响[J]. 刘权,关晓峰,陶芝伟,王翔,吴基华,刘云龙,何子奇,邓耀良. 广东医学. 2018(03)
[2]羟基磷灰石诱导巨噬细胞炎性反应及凋亡[J]. 刘权,陶芝伟,关晓峰,吴基华,刘云龙,何子奇,邓耀良. 中华实验外科杂志. 2017 (12)
[3]流式细胞术分析PMA诱导THP-1分化为巨噬细胞的表型特征[J]. 彭卓颖,李想,丛喆,薛婧. 中国比较医学杂志. 2017(10)
[4]IL-37通过促进巨噬细胞M2型极化在缺氧/复氧诱导的肝细胞损伤中的保护作用[J]. 朱迪,李婷婷,陈青松,牟童,汤成泳. 复旦学报(医学版). 2017(04)
[5]经典活化型/替代活化型巨噬细胞对血管平滑肌细胞凋亡的影响[J]. 尚茹茹,刘晓红,张锦,吕淑萍,李飞虹. 中国药物与临床. 2016(04)
[6]不同极化类型巨噬细胞参与肾纤维化的动物实验研究[J]. 姜亚丽,孙世仁,赵俊龙,王媛媛,刘晓渭,秦鸿雁. 中华肾脏病杂志. 2015 (03)
[7]低剪切力通过激活Akt信号和增加活性氧簇诱导人血管内皮细胞凋亡(英文)[J]. 张俊霞,王志梅,左广峰,李冰,张俊杰,田乃亮,陈绍良. 南方医科大学学报. 2013(03)
[8]不同激活状态的巨噬细胞培养上清液对7721肝癌细胞增殖和迁移的影响[J]. 黄莉,李山,彭契六,刘银坤,梁宏洁,曹昭,谢丽,翟励敏,秦雪. 临床检验杂志. 2013(02)
[9]RAW264.7细胞M1/M2亚型的诱导和鉴定[J]. 陈涛,梁潇,贺明,乌宇亮,袁祖贻. 中国分子心脏病学杂志. 2011(02)
[10]巨噬细胞在高草酸尿症大鼠肾内结石晶体形成过程中的作用[J]. 关晓峰,邓耀良,黎承扬,孙丙华. 中华泌尿外科杂志. 2010 (02)
本文编号：2945288
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