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高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞激活的作用与机制

发布时间:2020-12-30 04:27
  背景与目的 糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的严重并发症之一,也是导致终末期肾病(ESRD)最常见的原因[1]。大量的研究证实,DN是一种炎症性疾病,而巨噬细胞的激活和浸润在DN的发生发展中起着重要的作用[2]。外泌体(exosomes)是由膜衍生而来的直径约30-100nm的囊泡,已被证实可由多种细胞分泌,游走于各体液之间,在细胞与细胞间的交流发挥着重要的作用。研究证实,高糖环境下的肾脏固有细胞之间,经由外泌体的传递而发生了密切的信息交流,从而减轻或加重DN[3-6]。目前,关于细胞来源的外泌体对于巨噬细胞激活作用的研究主要集中在干细胞和脂肪细胞。例如,Zhao等的研究发现,脂肪源干细胞分泌的外泌体通过极化M2型巨噬细胞来减轻脂肪组织的炎症和改善肥胖[7]。那么,在DN中,巨噬细胞的激活和肾脏固有细胞分泌的外泌体之间到底有着怎样的联系,目前少见研究报道。本研究以高糖作用下肾小管上皮细胞分泌的外泌体作为研究对象,探讨其对巨噬细胞的作用和机制。为探究DN中肾脏固有细... 

【文章来源】:安徽医科大学安徽省

【文章页数】:65 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞激活的作用与机制


正常糖和高糖条件下肾小管上皮细胞分泌外泌体的形态(磷钨酸负染20000x电镜)

体标志,沉淀物,分子伴侣蛋白,安徽医科大学


安徽医科大学硕士学位论文4.2 Western blot 检测沉淀物是否有外泌体标志蛋白的表达图 2 结果显示,提取的沉淀物均检测到外泌体标志蛋白 CD63、TSG101 的表达,却未检测到内质网分子伴侣蛋白 Calnexin 的表达,表明提取的外泌体中不含细胞组分,纯度较高。证实了该沉淀物即为外泌体。

巨噬细胞,单核细胞,伪足


图 3 THP-1 单核细胞诱导成为巨噬细胞的鉴定Fig 3 THP-1 monocytes differentiation into macrophages注:A:1:THP-1;2:THP-1 macrophage; B:CD68-the classical macrophage marker(Flowcytometry)4.4 THP-1 巨噬细胞经外泌体刺激后的形态改变图 4 显微镜下观察到,无论是经正常糖外泌体刺激,还是高糖外泌体刺激,THP-1巨噬细胞的形态与空白组相比,均发生了改变。由原本的圆形,逐渐长出伪足。在同样的刺激时长下,高糖外泌体刺激组的形态改变尤为明显,具有伪足的细胞数明显多于正常糖外泌体刺激组。

【参考文献】:
期刊论文
[1]Mechanisms of the alternative activation of macrophages and non-coding RNAs in the development of radiation-induced lung fibrosis[J]. Nadire Duru,Benjamin Wolfson,Qun Zhou.  World Journal of Biological Chemistry. 2016(04)
[2]CD97 promotes gastric cancer cell proliferation and invasion through exosome-mediated MAPK signaling pathway[J]. Chao Li,Da-Ren Liu,Guo-Gang Li,Hou-Hong Wang,Xiao-Wen Li,Wei Zhang,Yu-Lian Wu,Li Chen.  World Journal of Gastroenterology. 2015(20)



本文编号:2946985

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