脂肪甘油三酯脂肪酶基因敲除对C57BL/6鼠肾脏结构和功能的影响
发布时间：2020-12-30 19:06
目的研究脂肪甘油三酯脂肪酶（adipose triglyceride lipase,ATGL）基因敲除对C57BL/6鼠肾脏结构和功能的影响。方法将Atgl+/-小鼠通过近亲交配繁殖得到Atgl基因敲除纯合子小鼠(Atgl-/-鼠)和野生型鼠(Atgl+/+鼠),通过观察Atgl-/-鼠和Atgl+/+鼠肾脏结构和功能差异来研究Atgl基因敲除对小鼠肾脏结构和功能影响。实验分为对照组(Atgl+/+鼠)及实验组(Atgl-/-鼠),为保证实验结果的一致性,实验所用所有小鼠均为雄性;810周龄;体质量约20 g;每组8只。ELISA检测各组小鼠尿肌酐及尿白蛋白浓度,通过计算尿白蛋白肌酐比反映肾功能变化。HE染色及透射电镜分别观察各组小鼠肾皮质病理及超微病理改变。油红O染色观察脂肪在各组小鼠肾脏分布。肾脏组织TG定量检测比较两种小鼠肾脏TG含量差异。结果 Atgl-/-鼠尿白蛋白肌酐比显著高于对照组[（4 219.0...
【文章来源】：第三军医大学学报. 2016年10期 北大核心
【文章页数】：4 页
【部分图文】：
图1两组小鼠肾脏大体观
?.05，与Atgl+/+组比较2．2Atgl基因敲除导致肾皮质脂滴聚集增加图1显示两种小鼠肾脏大体比较。Atgl+/+小鼠约0．9cm×0．5cm大小，色泽鲜红;而Atgl-/-小鼠较Atgl+/+小鼠明显缩小，约0．8cm×0．45cm大小，且颜色泛白，提示可能存在较多脂肪。HE染色提示，与对照组相比，实验组肾小管出现明显肿胀，肿胀的肾小管对肾小囊的挤压使得肾小囊体积明显缩小，肾皮质弥漫性存在大量空泡状结构;油红O染色进一步显示这些空泡状结构为脂滴，大量脂滴累及Atgl-/-小鼠肾小球及肾小管，其中以肾小管受累最严重(图2)。肾脏TG定量提示Atgl-/-小鼠每毫克肾脏组织中TG含量较Atgl+/+小鼠高出10倍以上(39．89±5．14)μgvs(2.18±0．58)μg。0.2cmAtgl-/-组Atgl+/+组图1两组小鼠肾脏大体观HE染色油红O染色Atgl+/+组Atgl-/-组图2光镜下观察两组小鼠肾脏组织病理变化(×200)2．3Atgl基因敲除导致足细胞融合及肾小管亚细胞结构改变肾脏透射电镜检测结果显示，在对照组中，肾小球滤过屏障结构完整，足细胞足突形态正常(图3A)，各细胞中均未见脂滴存在，肾小管细胞内线粒体丰富，形态结构正常(图3C)，微绒毛形态正常;在实验组中，足细胞足突出现大量融合(图3B)，肾小球滤过屏障结构受损。大量脂滴堆积于足细胞及肾小管细胞中(图3B、D)，肾小管细胞线粒体棘突可见不同程度消失(图3D)，微绒毛不同程度脱落、萎缩，提示肾小管细胞功能失调，重吸收障碍。肾小球肾小管Atgl+/+组Atgl-/-组2%μm2%μm2%μm2%μm▲:示脂滴;↑:示线粒体;小框为足细胞足突;大框为小框的放大观察图3透射电镜观察两组小鼠肾小球、肾小管超微结构变化3讨论脂肪代谢紊乱导致过多
脂滴累及Atgl-/-小鼠肾小球及肾小管，其中以肾小管受累最严重(图2)。肾脏TG定量提示Atgl-/-小鼠每毫克肾脏组织中TG含量较Atgl+/+小鼠高出10倍以上(39．89±5．14)μgvs(2.18±0．58)μg。0.2cmAtgl-/-组Atgl+/+组图1两组小鼠肾脏大体观HE染色油红O染色Atgl+/+组Atgl-/-组图2光镜下观察两组小鼠肾脏组织病理变化(×200)2．3Atgl基因敲除导致足细胞融合及肾小管亚细胞结构改变肾脏透射电镜检测结果显示，在对照组中，肾小球滤过屏障结构完整，足细胞足突形态正常(图3A)，各细胞中均未见脂滴存在，肾小管细胞内线粒体丰富，形态结构正常(图3C)，微绒毛形态正常;在实验组中，足细胞足突出现大量融合(图3B)，肾小球滤过屏障结构受损。大量脂滴堆积于足细胞及肾小管细胞中(图3B、D)，肾小管细胞线粒体棘突可见不同程度消失(图3D)，微绒毛不同程度脱落、萎缩，提示肾小管细胞功能失调，重吸收障碍。肾小球肾小管Atgl+/+组Atgl-/-组2%μm2%μm2%μm2%μm▲:示脂滴;↑:示线粒体;小框为足细胞足突;大框为小框的放大观察图3透射电镜观察两组小鼠肾小球、肾小管超微结构变化3讨论脂肪代谢紊乱导致过多的脂肪酸及甘油三酯聚集于非脂肪细胞包括心肌细胞、骨骼肌细胞、肝细胞等可对靶器官和细胞造成严重损伤，这种过程被称作脂毒性作用［10］，但其中的分子机制还并不太清楚。文献［11－12］报道，线粒体损伤诱导的活性氧(ＲOS)增加在这个过程中扮演重要作用。线粒体作为细胞的能量中心，也承担着清除多余ＲOS的功能［13］。线粒体功能失调可导致细胞及组织ＲOS活性增加，ＲOS可通过激活下游信号分子诱导细胞失能或死亡［14－15］。ATGL作为
本文编号：2948147
【文章来源】：第三军医大学学报. 2016年10期 北大核心
【文章页数】：4 页
【部分图文】：
图1两组小鼠肾脏大体观
?.05，与Atgl+/+组比较2．2Atgl基因敲除导致肾皮质脂滴聚集增加图1显示两种小鼠肾脏大体比较。Atgl+/+小鼠约0．9cm×0．5cm大小，色泽鲜红;而Atgl-/-小鼠较Atgl+/+小鼠明显缩小，约0．8cm×0．45cm大小，且颜色泛白，提示可能存在较多脂肪。HE染色提示，与对照组相比，实验组肾小管出现明显肿胀，肿胀的肾小管对肾小囊的挤压使得肾小囊体积明显缩小，肾皮质弥漫性存在大量空泡状结构;油红O染色进一步显示这些空泡状结构为脂滴，大量脂滴累及Atgl-/-小鼠肾小球及肾小管，其中以肾小管受累最严重(图2)。肾脏TG定量提示Atgl-/-小鼠每毫克肾脏组织中TG含量较Atgl+/+小鼠高出10倍以上(39．89±5．14)μgvs(2.18±0．58)μg。0.2cmAtgl-/-组Atgl+/+组图1两组小鼠肾脏大体观HE染色油红O染色Atgl+/+组Atgl-/-组图2光镜下观察两组小鼠肾脏组织病理变化(×200)2．3Atgl基因敲除导致足细胞融合及肾小管亚细胞结构改变肾脏透射电镜检测结果显示，在对照组中，肾小球滤过屏障结构完整，足细胞足突形态正常(图3A)，各细胞中均未见脂滴存在，肾小管细胞内线粒体丰富，形态结构正常(图3C)，微绒毛形态正常;在实验组中，足细胞足突出现大量融合(图3B)，肾小球滤过屏障结构受损。大量脂滴堆积于足细胞及肾小管细胞中(图3B、D)，肾小管细胞线粒体棘突可见不同程度消失(图3D)，微绒毛不同程度脱落、萎缩，提示肾小管细胞功能失调，重吸收障碍。肾小球肾小管Atgl+/+组Atgl-/-组2%μm2%μm2%μm2%μm▲:示脂滴;↑:示线粒体;小框为足细胞足突;大框为小框的放大观察图3透射电镜观察两组小鼠肾小球、肾小管超微结构变化3讨论脂肪代谢紊乱导致过多
脂滴累及Atgl-/-小鼠肾小球及肾小管，其中以肾小管受累最严重(图2)。肾脏TG定量提示Atgl-/-小鼠每毫克肾脏组织中TG含量较Atgl+/+小鼠高出10倍以上(39．89±5．14)μgvs(2.18±0．58)μg。0.2cmAtgl-/-组Atgl+/+组图1两组小鼠肾脏大体观HE染色油红O染色Atgl+/+组Atgl-/-组图2光镜下观察两组小鼠肾脏组织病理变化(×200)2．3Atgl基因敲除导致足细胞融合及肾小管亚细胞结构改变肾脏透射电镜检测结果显示，在对照组中，肾小球滤过屏障结构完整，足细胞足突形态正常(图3A)，各细胞中均未见脂滴存在，肾小管细胞内线粒体丰富，形态结构正常(图3C)，微绒毛形态正常;在实验组中，足细胞足突出现大量融合(图3B)，肾小球滤过屏障结构受损。大量脂滴堆积于足细胞及肾小管细胞中(图3B、D)，肾小管细胞线粒体棘突可见不同程度消失(图3D)，微绒毛不同程度脱落、萎缩，提示肾小管细胞功能失调，重吸收障碍。肾小球肾小管Atgl+/+组Atgl-/-组2%μm2%μm2%μm2%μm▲:示脂滴;↑:示线粒体;小框为足细胞足突;大框为小框的放大观察图3透射电镜观察两组小鼠肾小球、肾小管超微结构变化3讨论脂肪代谢紊乱导致过多的脂肪酸及甘油三酯聚集于非脂肪细胞包括心肌细胞、骨骼肌细胞、肝细胞等可对靶器官和细胞造成严重损伤，这种过程被称作脂毒性作用［10］，但其中的分子机制还并不太清楚。文献［11－12］报道，线粒体损伤诱导的活性氧(ＲOS)增加在这个过程中扮演重要作用。线粒体作为细胞的能量中心，也承担着清除多余ＲOS的功能［13］。线粒体功能失调可导致细胞及组织ＲOS活性增加，ＲOS可通过激活下游信号分子诱导细胞失能或死亡［14－15］。ATGL作为
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