沉默PHD2对前列腺癌PC3细胞增殖转移及血管生成拟态的影响

发布时间：2021-01-16 16:55

　　目的研究PHD2基因在前列腺癌PC3细胞血管生成拟态形成及细胞增殖、迁移、侵袭中的作用方法1.前列腺癌PC3细胞株体外培养,设计4条PHD2shRNA序列,包装后转染PC3细胞,利用Western Blot及RT-PCR检测沉默效率,选出沉默效果最好的shRNA为实验组。2.实验分为PC3组、PC3+shRNA-NC组和PC3+PHD2shRNA组,利用Western Blot法检测转染后各组PC-3细胞中PHD2及HIF-1α、EphA2蛋白表达变化情况。3.各组细胞进行体外三维培养,显微镜下观察各组PC3细胞中血管生成拟态形成数目的变化情况。4.利用MTT增殖实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验,检测各组PC3细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化情况。结果1.Western Blot及RT-PCR实验结果显示:四组shRNA质粒转染前列腺癌PC3细胞后,PC3细胞中PHD2 mRNA表达水平及蛋白表达水平均明显下降,差异具有统计学意义（P<0.01）。获得实验组PHD2shRNA,沉默效率达80%以上。2.Western Blot实验结果显示:转染48h后,较空白组及阴性... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

pGPU6/GFP/Neo表达质粒图谱

4.2 Real time-PCR 实验检测结果4.2.1 实验分组NO 样本编号 NO 样本编号1 A、PC3 4 D、shRNA 质粒 22 B、NC 5 E、shRNA 质粒 33 C、shRNA 质粒 1 6 F、shRNA 质粒 44.2.2 扩增曲线：结果描述及分析：结果显示PHD2的扩增曲线具有正常扩增曲线的4个特征，而阴性对照组（水）无明显荧光信号显示，提示 RT-PCR 程序运作正常，PHD2基因得到有效扩增。（见图 4.2、图 4.3）

4.2.2 扩增曲线：结果描述及分析：结果显示PHD2的扩增曲线具有正常扩增曲线的4个特征，而阴性对照组（水）无明显荧光信号显示，提示 RT-PCR 程序运作正常，PHD2基因得到有效扩增。（见图 4.2、图 4.3）图 4.2 PHD2 的扩增曲线

【参考文献】：
期刊论文
[1]前列腺癌组织中血管生成拟态形成的分子通路研究进展[J]. 李俊君,常德贵,董良,阳方,俞旭君.  中国性科学. 2017(05)
[2]沉默Epha2对前列腺癌PC3细胞生物学性状与血管生成拟态的影响[J]. 曹阳,李清.  实用癌症杂志. 2016(04)
[3]低氧应激因子PHD2与血管新生相关疾病[J]. 贾慧珍,KASIM Vivi,徐志玲,杨力,吴寿荣.  药学学报. 2014(02)



本文编号：2981186