硫化氢对腹膜透析大鼠并发腹膜纤维化的防治作用

发布时间：2017-04-12 18:09

  本文关键词：硫化氢对腹膜透析大鼠并发腹膜纤维化的防治作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本研究探讨硫化氢(H2S)是否通过抗炎、抗纤维化作用,改善腹膜透析大鼠腹膜纤维化及腹膜转运功能。方法:1.体内研究:20只雄性SD大鼠随机分为4组:对照组:0.9%生理盐水20 ml/d腹腔注射;硫化氢(H2S)组:Na HS1μmol/kg*d加入0.9%生理盐水中腹腔注射;建模组:4.25%高糖腹透液(PDFs)20 ml/d腹腔注射,第1,3,5,7天加入脂多糖(LPS)0.6 mg/kg腹腔注射;治疗组:高糖组造模同时予Na HS1μmol/kg*d腹腔注射。28天后行腹膜平衡试验(PET),计算超滤量、D2h葡萄糖/D0h葡萄糖,评估腹膜转运功能。取壁层腹膜组织行HE染色、Masson染色等病理染色观察腹膜和胶原纤维厚度;免疫组化检测单核/巨噬细胞标志蛋白(ED-1)、单核巨噬细胞趋化蛋白(MCP-1)、转化生长因子(TGF-β1)、肌纤维蛋白(α-SMA)、纤维黏连蛋白(FN)、胶原蛋白-Ⅲ(Col-Ⅲ)和血小板-内皮细胞粘附因子(CD31)等炎症纤维化、新生血管形成指标的表达。2.体外研究:取正常SD大鼠,分离培养大鼠原代腹膜间皮细胞,取第二代至第四代细胞用于实验研究。将细胞同步化处理后随机分为5组:对照组:细胞培养于正常培养液中;H2S组:细胞培养于正常培养液中,同时予Na HS 300μM;建模组:正常培养液:2.5%PDF(V/V)=1:1;H2S低剂量治疗组:正常培养液:2.5%PDF(V/V)=1:1,同时予Na HS 100μM;H2S高剂量治疗组:正常培养液:2.5%PDF(V/V)=1:1,同时予Na HS 300μM。24小时后提取细胞总RNA、蛋白,RT-PCR检测各组MCP-1、ICAM-1、IL-6炎症因子m RNA的表达;Western-blot检测各组α-SMA、FN等相关纤维化蛋白的表达。结果:1.体内研究:与对照组相比,建模组超滤量明显减少,D2h葡萄糖/D0h葡萄糖比值明显降低(P0.05),而治疗组、H2S组上述变化不明显;HE染色示建模组腹膜结构紊乱,腹膜厚度、腹膜间皮下炎症细胞浸润及胶原沉积较对照组显著增加(P0.05),予Na SH治疗后,腹膜厚度、炎症细胞浸润、胶原沉积等明显减少(P0.05);免疫组化示,与对照组相比建模组ED1、MCP-1、TGF-β1、α-SMA、FN、Col-Ⅲ及CD31等蛋白的表达量显著增加(均P0.05);然而,与建模组相比,治疗组ED1、MCP-1、TGF-β1、α-SMA、FN、Col-Ⅲ及CD31的表达量显著降低(均P0.05)。2.体外研究:与对照组相比,建模组腹膜间皮细胞MCP-1、ICAM-1、IL-6等炎症因子的表达明显增多,α-SMA、FN等蛋白的表达明显上调,予Na HS干预后上述炎症、纤维化因子的表达明显减少,差异有统计学意义。结论:1.高糖腹透液可诱导腹膜纤维化。2.外源性H2S对高糖腹透液引起的腹膜纤维化有防治作用。3.H2S改善腹膜透析大鼠腹膜纤维化的机制是通过抑制炎症反应、降低TGF-β1的表达,进而抑制腹膜间皮细胞EMT、减少胶原蛋白沉积和新生血管形成而实现的。
【关键词】：腹膜透析 腹膜纤维化 炎症 上皮-间充质转分化 硫化氢
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R692
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 前言10-12
• 1 引言12-13
• 2 材料和方法13-27
• 3 结果27-40
• 4 讨论40-43
• 5 结论43-44
• 参考文献44-47
• 综述47-58
• 参考文献53-58
• 中英文缩略词表58-60
• 攻读硕士期间的科研成果60-61
• 致谢61-62

【参考文献】

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1 俞雨生;周岩;周婷婷;陈伊文;李世军;唐政;刘志红;;腹膜透析患者长期生存及相关因素分析——单中心登记系统数据分析[J];肾脏病与透析肾移植杂志;2011年03期

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本文编号：301847