TRAIL联合膀胱癌特异性重组溶瘤腺病毒对膀胱癌细胞体外作用的研究

发布时间：2021-02-11 17:34

　　目的：通过细胞及分子生物学试验方法,检测TRAIL联合Ad-UPII-E1A后对膀胱癌细胞体外生长的抑制以细胞凋亡的情况,揭示溶瘤腺病毒对TRAIL细胞杀伤能力的影响,对细胞凋亡的影响,初步探讨相关分子机制,为未来TRAIL与溶瘤腺病毒联合治疗膀胱癌的临床应用提供理论基础。方法：用Ad-UPⅡ-ElA联合TRAIL作用于EJ膀胱癌细胞。细胞生存率测定：通过预试验确定实验所需TRAIL的浓度,生长至对数期的EJ膀胱癌细胞中加入Ad-UPⅡ-E1A及TRAIL继续培养,于加药后24,48,72,96小时后分别用噻唑蓝法（MTT）检测,并计算细胞生存率及抑制率,金氏公式法计算分析协同效应。细胞凋亡分析：按照Apoptosis Assay Kit#2说明书对膀胱癌细胞进行处理后,流式细胞仪观察Annexin V-FITC和PI的荧光信号,激发波长Ex=488nm;发射波长Em=530nm,分析正常细胞,凋亡及死亡细胞分布。提取各处理组总RNA,设计并合成相关引物,根据说明书配置并反转录为目的基因,在PCR扩增仪中反应并得到扩增曲线,推测凋亡相关基因Bax的表达。用caspase3活性检测试剂盒... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
目录
第一章 TRAIL联合膀胱癌特异性重组溶瘤腺病毒对膀胱癌细胞体外作用的研究
    縮略词表
    1 前言
        1.1 腺病毒基因治疗
        1.2 TRAIL的免疫治疗
        1.3 溶瘤腺病毒与TRAIL协同作用的研究
    2 材料与方法
        2.1 主要材料和试剂
        2.2 主要试剂的配置
        2.3 主要仪器
        2.4 细胞培养与处理
        2.5 显微照相观察细胞形态
        2.6 细胞生存率测定
        2.7 流式细胞术检测细胞凋亡
        2.8 RT-PCR检测凋亡相关基因Ba×的表达情况及Caspase 3活性检测情况
        2.9 统计学方法
    3 结果
        3.1 显微镜下观察干预后细胞形态的变化
        3.2 MTT细胞抗增殖试验
        3.3 流式细胞仪检测凋亡
        3.4 Real-time PCR检测凋亡相关因子Bax基因的表达情况
        3.5 Caspase 3活性测定
    4 讨论
    参考文献
第二章 综述：BCG和细胞因子治疗非肌层浸润性膀胱癌的研究进展
    1 摘要
    2 前言
    3 BCG灌注疗法
    4 cytokine治疗肿瘤
    5 小结
    参考文献
在学期间的研究成果
致谢



本文编号：3029470