Syk/JNK/NLRP3信号传导通路在糖尿病肾病中作用的研究

发布时间：2021-03-02 20:14

　　目的糖尿病（diabetes mellitus,DM）是一种临床常见的慢性代谢性疾病,持续高血糖状态会导致代谢紊乱,靶器官和大血管损伤,引起糖尿病足、视网膜病变、肾功能损伤等多种并发症。糖尿病肾病（diabetes nephrophathy,DN）是继发于糖尿病常见的微血管并发症之一,可引起终末期肾病（End stage renal disease,ESRD）,是糖尿病患者死亡的重要因素。有研究报道,核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体参与了糖尿病肾病的发病过程,但其在DN发病分子机制中的作用尚不明确。既往研究发现脾酪氨酸激酶（spleen tyrosine kinase,Syk）参与疟原虫色素诱导的THP-1细胞中NLRP3炎症小体的活性调节,c-Jun氨基末端激酶（JNK）参与了巨噬细胞溶酶体裂解介导的NLRP3炎症小体的活化,但在糖尿病肾病的炎症损伤机制中Syk是否发挥作用及其与JNK、NLRP3炎症小体的关系尚未见报道。因此,本研究通过检测Syk、JNK及NLRP3炎症小体在1型糖尿病大鼠动物模型及高糖诱导的肾脏细胞中的表达,以探究Syk/JNK/NLRP3... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Con组和DN组大鼠肾脏组织HE染色(左：Con组；右：DN组，×400倍)

图 2：Con 组和 DN 组大鼠肾脏组织 PAS 染色(左：Con 组；右：DN 组，×400 倍)4 大鼠肾脏组织中 NLRP3 炎症小体及 IL-1β的表达检测大鼠肾脏组织中 NLRP3 炎症小体以及 mIL-1β的在 mRNA 和蛋白水平的表达情况。RT-PCR 检测结果显示，与 Con 组相比，DN 组大鼠肾脏组织中 NLRP3 炎症小体及 IL-1β mRNA 水平明显增高（P < 0.05，图 3）；WesternBlot 结果及定量分析表明，NLRP3 炎症小体在不同周次的 DN 大鼠体内的蛋白表达均增高，而 Con 组大鼠肾脏组织中 NLRP3 炎症小体并无变化（图 4），并且 NLRP3 炎症小体在第 12、16 周的变化最明显，因此我们选用第 16 周大鼠进行进一步试验，Western Blot 结果显示，与 Con 组相比，DN 组大鼠肾脏组织中不仅 NLRP3 炎症小体表达水平明显增高（P < 0.05，图 5），IL-1β蛋白表达水平也显著上调（P < 0.01，图 5）；免疫组织化学染色结果显示，与Con 组相比，DN 组大鼠肾脏组织中 NLRP3、caspase-1、mature IL-1β的表达水平明显升高（图 6）。

3：两组大鼠肾脏组织中 NLRP3、caspase-1 以及 IL-1β的 mRNA 表达水：A. RT-PCR 方法检测不同周次大鼠肾脏组织中 NLRP3、Caspase-1 以及 IL mRNA 的表达水平；B. 选取第 16 周大鼠为研究对象进一步检测该周次不鼠肾脏组织中 NLRP3、Caspase-1 以及 IL-1β的 mRNA 水平；C. ImageJ 对中进行 NLRP3、caspase-1 以及 IL-1β定量分析，n=6。非配对 t 检验对数据统计分析，数据 mean ± SEM 表示，*P < 0.05，**P < 0.01，***P < 0.001 vs 。

【参考文献】：
期刊论文
[1]血清和糖皮质激素调节蛋白激酶对糖尿病视网膜病变的作用及研究进展[J]. 杨贞,闫爽.  内蒙古医科大学学报. 2017(02)
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[3]Pathophysiological role and therapeutic implications of inflammation in diabetic nephropathy[J]. Desirée Luis-Rodríguez,Alberto Martínez-Castelao,José Luis Górriz,Fernando de lvaro,Juan F Navarro-González.  World Journal of Diabetes. 2012(01)
[4]白细胞介素-1的结构、来源、分布、功能及其与疾病的关系[J]. 刘立峰,刘玉和,沈维高,刘艳波,于洋.  北华大学学报(自然科学版). 2006(05)



本文编号：3059878