线粒体相关miR-574在高龄男性精子中的作用及机制研究

发布时间：2021-03-03 09:34

　　研究目的:高龄男性的生育健康是一个急需关注的社会问题。本团队在前期研究中发现miR-574在高龄雄鼠精子中高表达。基于miR-574的人鼠同源性,本研究拟进一步分析临床高龄病人及高龄动物模型精子样本中miR-574的表达情况,并通过细胞实验明确其具体的调控机制,在此基础上探索其在临床应用的可能性,以期为评估和改善男性精子质量提供靶点。材料与方法:构建小鼠自然高龄（18月龄鼠）及对照（10周龄鼠）模型,以及D-gal诱导小鼠高龄（8周龄鼠,D-gal诱导42天）及对照（8周龄鼠,生理盐水诱导42天）模型,收集各组精子,并在临床上收集高龄/年轻男性精子样本。提取各组精子总RNA,实时定量PCR法检测miR-574的表达趋势。同时取附睾尾精子,检测其浓度、活力、畸形率,分析这些参数与miR-574表达水平相关性。在小鼠精母细胞系GC2细胞中,通过转染miR-574的模拟剂和抑制剂以过表达或抑制miR-574,检测ROS水平、ATP水平和线粒体膜电位。通过miRNA靶点预测,发现线粒体通路相关基因mt-ND5可能是miR-574的靶基因,用实时定量PCR法和western blot检测其mRN... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－２．?２１７８例男性精液样本按年龄分组进行精液参数分析

?领士学位论文???Ａ?ｍｉ＿?“??Ｓｅｅｄ??Ｍｕｓ?ｍｕｓｃｕｌｕｓ?１?ＧＡＧＵＧＵ＜?－?ｌ?＜．Ｉ?ｆ．?Ｉ?（■?ｉ?ｆ?■?．?Ｉ?＜．?ｉ?＇?．?ｉ?－＇??Ｈｕｍｏ?ｓａｐｉｅｎｓ?「Ｉ?ＧＡＧｌｉＣＪｌＫ?，ｌ?（．?Ｉ?＜．?Ｉ?＜．?＼＜?，１?＜?．１?（．１?ｖ??Ｓｕｓ?ｓｃｒｏｆａ?＇?＼?ＧＡＧＵＧＵＭ?（．?ｉ?＜．?ｉ?？?．Ｍ?．?＼（?．１?＜．?Ｉ?（，！?＾??Ｂ?？ｌｌ?Ａ＾．ｎｕ??ｒ－ｒｒｒ￣￣Ｉ??６?Ｖ?ｌ?＾?？，?。守?Ｉ??Ｍ?＾ｌｉｌ＾ｌｉｌｌｌｌｍ??Ｆ?ｎｓ?Ｇ?Ｈ?１??ｎｓ??？??？??？〇１?Ｉ?１?１００－１?｜?Ｉ?２９－ｉ?（?丨?ｓ?２．０－??！：ｉｉ??图１－４．自然高龄小鼠模型的建立??（Ａ）?ＭｉＲ－５７４在多种物种中高度保守。??（Ｂ）?然高龄小鼠表现出头发稀疏，机能减退和其他衰老特征。??（Ｃ－Ｅ）自然高龄小鼠模Ｍ的体重，睾丸重量和睾丸器官指数。??（Ｆ－Ｉ）自然高龄小鼠模型的精子浓度，精子活力，１）１［向运动能力和血清睾酮含量。??（Ｊ－Ｋ）在自然高龄小鼠模型的举几屮进彳丁?Ｈ＆Ｅ染色和屯／－显微镜观察。??（Ｌ）自然高龄小鼠中精子浓度和ｍｉＲ－５７４表达量的散点图。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４．?Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ?ｏｆ?ｎａｔｕｒａｌ?ａｇｉｎｇ?ｍｉｃｅ?ｍｏｄｅｌ．??（Ａ）?ＭｉＲ－５７４?ｈｉｇｈｌｙ?ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?ｉｎ?ｍｕｌｔｉｐｌｅ?ｓｐｅｃｉｅｓ．??１５??

Ｒ（ａ＋ｂ）?％??°?４０－，?Ｅ?Ｒ２＝０．２７８３?Ｆ?１５．?Ｒ２＝〇２２２６??？＊?Ｐ＝０．０２０３?ｐ＝〇．〇４１４??｜ｓ３〇?；?Ｉ１０－?Ｓ１０?＊??ＩＩ?＿＿?Ｉ?５．?？?全?５．?一?？？?？??｜?，〇－?ｎ?Ｅ?Ｅ??０?？＞?〇｜??〇Ｊ?，?，?，?，??々身?０?２０?４０?６０?８０?１００?０?１０?２０?３０?４０??０°＾?°?Ｓｐｅｒｍ?Ｍｏｔｉｌｉｔｙ?ＰＲ（ａ＋ｂ）?％??图１－６．?ｍｉＲ－５７４在高龄小鼠模型精子中上调，并且与其精子活力降低有关??（Ａ）?ｍｉＲ－５７４在自然高龄小鼠模型精子中的表达。采用ｔ检验比较两组的差异。??＊＊＊?ｐ?＜０．００１??１８??


本文编号：3061040