miR-200c及其靶基因EP300参与肾母细胞瘤增殖与侵袭的分子机制

发布时间：2021-03-31 05:32

　　本课题研究目的旨在揭示miR-200c新的表达调控机制,阐明miR-200c/EP300/P27轴在肾母细胞瘤发生发展中的作用机制,为肿瘤诊治提供新的思路及治疗靶点。本课题从肾母细胞瘤组织和细胞miRNA芯片中筛选出miR-200c作为肾母细胞瘤候选miRNA,探讨miR-200c在肾母细胞瘤增殖和侵袭中的作用机制,主要内容:（1）筛选并验证肾母细胞瘤增殖和侵袭相关的miRNA;（2）预测并鉴定miR-200c的靶基因,明确miR-200c通过靶基因在肾母细胞瘤增殖和侵袭中发挥的作用;（3）确定miR-200c靶基因EP300的信号通路,探讨PI3K/AKT/FOXO通路在肾母细胞瘤增殖和侵袭中的作用。研究方法1.肾母细胞瘤组织和细胞中miRNAs筛选及验证。2.mR200c靶基因的预测和鉴定。3.miR-200c对肾母细胞瘤细胞生物学行为的影响。4.miR-200c参与的肾母细胞瘤信号通路的检测。研究结果1.肾母细胞瘤增殖和侵袭相关miRNA的筛选及鉴定（1）送检6张miRNA芯片结果表明,与瘤旁肾组织相比,在肾母细胞瘤组中共筛选出27个表达均下调的miRNA,其中包括miR-200... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：143 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１－２标注为红色的是上调基因，标注为绿色的是下调基因，标注为黑色的是无显著差异基??因

图１－７?２４例肾母细胞瘤组织中ｍｉＲ－２００ｃ的倍比关系Ｎ：正常肾组织，Ｔ：肾母细胞瘤组织??Ｆｉｇｕｒｅ?１－７?ｍｉＲ－２００ｃ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｓ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｔｏ?ｔｈｅ?ｍａｔｃｈｅｄ?ａｄｊａｃｅｎｔ?ｎｏｒｍａｌ?ｔｉｓｓｕｅｓ?ｉｎ??ｔｈｅ?ｎｅｐｈｒｏｂｌａｓｔｏｍａ?ｔｉｓｓｕｅ?ｓａｍｐｌｅｓ．?Ｎ：?ｎｏｒｍａｌ?ｔｉｓｓｕｅ，?Ｔ：?ｎｅｐｈｒｏｂｌａｓｔｏｍａ?Ｔｉｓｓｕｅ??２７??

人胚肾上皮细胞株２９３Ｔ细胞为病理学系自存，人肾母细胞瘤细胞株ＳＫ－ＮＥＰ－１??细胞及Ｇ４０１细胞均购自美国菌种保藏中心（ＡＴＣＣ）细胞库。大肠杆菌感受态ＤＨ－５ａ??购自广州斯佳生物技术有限公司，双荧光素酶报告载体（ｐｓｉＣＨＥＣＫ？－２，图２－１）购??买自Ｐｒｏｍｅｇａ?（北京）生物技术有限公司。??Ｂａｍ?ＨＩ?４４５１??ＳＶ４０?Ｌａｔｅ?｜??ｐｏｌｙ（Ａ）?广??ＨＳＶ－ＴＫ?ｆｔ！??（６２７３ｂｐ）?ｊ＊－Ｋｐｎｌ５ａ??１６７４?Ｎｏｌｌ?ｓｖ４０?ｅａｒｌｙ??１６６３?Ｐｍｅｌ?八?＼?ｅｎｈａｎｃｅｒ／??１６４３?Ｘｈｏｌ?／?＼?＼?ｐｒｏｍｏｔｅｒ??■?Ｓｇｆｌ?［／??Ｎｈｅｌ?６８４??图２－１?ｐｓｉＣＨＩＥＫＣ？－２质粒图谱??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｔｈｅ?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐｓｉＣＨＩＥＫＣ？－２?Ｖｅｃｔｏｒ??２．


本文编号：3110886