硫辛酸对高Hcy、高糖所致小鼠足细胞内质网应激性凋亡的影响

发布时间：2021-04-15 22:51

　　目的：在体外培养条件永生化小鼠足细胞,细胞分化后应用高浓度同型半胱氨酸（high homocysteine, hHcy）、高浓度葡萄糖及硫辛酸处理足细胞,作用48h后观察各组细胞形态及测定凋亡率,同时检测内质网应激反应（Endoplasmic reticulum stress, ERS）标志分子：半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12（Caspase-12）和葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的表达量,探究足细胞凋亡的发生与ERS的关系。方法：1、实验分组：足细胞分化好以后随机分为同型半光氨酸和葡萄糖两大干预组,分别作用48h。其中Hcy组包含3个亚组：正常对照组、hHcy组、硫辛酸+hHcy组；高糖组包含4个亚组：高渗对照组、正常糖浓度对照组、高糖组、硫辛酸+高糖组。其中各试剂浓度如下：hHcy浓度：200umol/l、硫辛酸浓度：500umol/l、甘露醇浓度：25mmol/l、正常葡萄糖浓度：5.6mraol/l、高糖浓度：25mmol/l。需要检测的指标和使用的方法：Annexin V-FITC双染足细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率；RT-PCR技术检测GRP78及Caspase-12mRNA... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

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