microRNA-155在糖尿病肾病肾小球内皮细胞损伤中的作用机制研究
发布时间:2021-05-22 03:03
研究背景糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的常见和严重并发症,20%-40%的糖尿病患者会进展为DN。在西方国家中DN是终末期肾脏病(end stage renal disease,ESRD)的首要原因,也是糖尿病致命的重要原因。在我国,DN患者的发病率也逐年上升,已经成为ESRD的主要病因之一。2010年对中国近10万名成年人流行病学调查结果:中国成年人糖尿病患病率11.6%,患者约1.14亿。糖尿病前期患病率估计为50.1%,患者约4.93亿。以糖尿病肾病患者经过1020年50%发展至ESRD计算,未来1020年我国新增糖尿病肾病引发的尿毒症患者1500万,将给国民身心健康和社会经济发展带来沉重负担。而糖尿病肾病的发病是由多因素共同造成的,发病机制仍不清楚,治疗手段也相对局限,目前的临床治疗只能缓解病情进展而无法逆转或根治疾病。因此研究糖尿病肾病的发病机制,寻找新的治疗靶点对于疾病的早期预防和临床治疗具有重要意义,成为临床和科研工作者的重要任务和国家的重大需求。人肾小球内皮细胞(human renal g...
【文章来源】:兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:62 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
中文摘要
Abstract
前言
实验细胞、仪器及试剂
1 实验细胞来源
2 主要实验仪器与设备
3 主要实验试剂及来源
4 主要实验溶液的配制
实验方法
1 人肾小球内皮细胞的培养
1.1 人肾小球内皮细胞的复苏
1.2 人肾小球内皮细胞的培养与传代
1.3 人肾小球内皮细胞的冻存
2 实验分组
2.1 高糖刺激对内皮细胞炎症因子和细胞凋亡的影响
2.2 高糖刺激下转染miR-155对ETS-1 及内皮细胞炎症因子和细胞凋亡的影响
2.3 高糖刺激下转染ETS-1 siRNA对 VCAM-1、MCP-1 的调控作用
3 人肾小球内皮细胞的转染
3.1 转染试剂配制
3.2 转染具体步骤
4 蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测蛋白表达
4.1 提取细胞总蛋白
4.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
5 细胞免疫荧光
6 统计学处理
实验结果
1 细胞培养、传代与生长情况观察
2 高渗、高糖及miR-155 转染后细胞生长情况的光镜结果
3 高糖刺激对内皮细胞炎症、凋亡的影响
4 高糖刺激下转染miR-155对ETS-1 及内皮细胞炎症、凋亡的影响
5 高糖刺激下转染ETS-1 siRNA对下游效应因子的调控作用
讨论
结论
参考文献
英文缩写注释
文献综述
参考文献
在学期间的研究成果
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]糖尿病肾病发病机制探讨及最新治疗进展[J]. 王鲁奎. 基层医学论坛. 2018(07)
[2]糖尿病肾病的治疗进展浅析[J]. 魏敏,姜泽,杨静博,韩淑英. 中国高新科技. 2018(04)
[3]MiR-204降调Caveolin-1表达降低HRGECs对大分子蛋白的通透性[J]. 杜菲,徐钦洋,蒋荣珍. 现代妇产科进展. 2017(04)
[4]ROBO4过表达抑制高糖条件下人肾小球内皮细胞高通透性的体外研究[J]. 唐璐瑶,刘军辉,候世会,官涛,黄云剑. 解放军医学杂志. 2017(03)
[5]糖尿病肾病的临床危险因素[J]. 刘东伟,潘少康,刘章锁. 中国实用内科杂志. 2017(03)
[6]糖尿病肾病发病的危险因素分析[J]. 李艳丽,廖勇敢,李晓雯,郑海燕,黄明炜,陈思思,汪茜,喻雄杰,丁洪成. 实用预防医学. 2017(02)
[7]肝X受体激动剂上调人肾小球内皮细胞血栓调节蛋白表达的机制和作用[J]. 丁涵露,李怡,冯韵霖,陈瑾,钟翔,王楠,汪伟,张萍,王莉. 中国现代医学杂志. 2016(05)
[8]内皮细胞损伤在糖尿病肾病发病机制中的作用[J]. 赵鹏鸣,王俭勤,梁耀军. 中国糖尿病杂志. 2016(02)
[9]子痫前期血清通过Caveolin-1增加肾小球内皮细胞通透性[J]. 徐钦洋,杜菲,蒋荣珍. 现代妇产科进展. 2016(01)
[10]糖尿病肾病的相关危险因素分析[J]. 王洁,何媛,于珮. 国际内分泌代谢杂志. 2015 (03)
本文编号:3200857
【文章来源】:兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:62 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
中文摘要
Abstract
前言
实验细胞、仪器及试剂
1 实验细胞来源
2 主要实验仪器与设备
3 主要实验试剂及来源
4 主要实验溶液的配制
实验方法
1 人肾小球内皮细胞的培养
1.1 人肾小球内皮细胞的复苏
1.2 人肾小球内皮细胞的培养与传代
1.3 人肾小球内皮细胞的冻存
2 实验分组
2.1 高糖刺激对内皮细胞炎症因子和细胞凋亡的影响
2.2 高糖刺激下转染miR-155对ETS-1 及内皮细胞炎症因子和细胞凋亡的影响
2.3 高糖刺激下转染ETS-1 siRNA对 VCAM-1、MCP-1 的调控作用
3 人肾小球内皮细胞的转染
3.1 转染试剂配制
3.2 转染具体步骤
4 蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测蛋白表达
4.1 提取细胞总蛋白
4.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
5 细胞免疫荧光
6 统计学处理
实验结果
1 细胞培养、传代与生长情况观察
2 高渗、高糖及miR-155 转染后细胞生长情况的光镜结果
3 高糖刺激对内皮细胞炎症、凋亡的影响
4 高糖刺激下转染miR-155对ETS-1 及内皮细胞炎症、凋亡的影响
5 高糖刺激下转染ETS-1 siRNA对下游效应因子的调控作用
讨论
结论
参考文献
英文缩写注释
文献综述
参考文献
在学期间的研究成果
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]糖尿病肾病发病机制探讨及最新治疗进展[J]. 王鲁奎. 基层医学论坛. 2018(07)
[2]糖尿病肾病的治疗进展浅析[J]. 魏敏,姜泽,杨静博,韩淑英. 中国高新科技. 2018(04)
[3]MiR-204降调Caveolin-1表达降低HRGECs对大分子蛋白的通透性[J]. 杜菲,徐钦洋,蒋荣珍. 现代妇产科进展. 2017(04)
[4]ROBO4过表达抑制高糖条件下人肾小球内皮细胞高通透性的体外研究[J]. 唐璐瑶,刘军辉,候世会,官涛,黄云剑. 解放军医学杂志. 2017(03)
[5]糖尿病肾病的临床危险因素[J]. 刘东伟,潘少康,刘章锁. 中国实用内科杂志. 2017(03)
[6]糖尿病肾病发病的危险因素分析[J]. 李艳丽,廖勇敢,李晓雯,郑海燕,黄明炜,陈思思,汪茜,喻雄杰,丁洪成. 实用预防医学. 2017(02)
[7]肝X受体激动剂上调人肾小球内皮细胞血栓调节蛋白表达的机制和作用[J]. 丁涵露,李怡,冯韵霖,陈瑾,钟翔,王楠,汪伟,张萍,王莉. 中国现代医学杂志. 2016(05)
[8]内皮细胞损伤在糖尿病肾病发病机制中的作用[J]. 赵鹏鸣,王俭勤,梁耀军. 中国糖尿病杂志. 2016(02)
[9]子痫前期血清通过Caveolin-1增加肾小球内皮细胞通透性[J]. 徐钦洋,杜菲,蒋荣珍. 现代妇产科进展. 2016(01)
[10]糖尿病肾病的相关危险因素分析[J]. 王洁,何媛,于珮. 国际内分泌代谢杂志. 2015 (03)
本文编号:3200857
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/mjlw/3200857.html
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