终末期肾脏病患者B细胞抗原受体（BCR）H链GDR3的组成和差异性分析

发布时间：2021-05-31 23:15

　　研究背景与目的:以往对终末期肾病（end-stage renal disease,ESRD）患者免疫失调大多数研究都集中在T淋巴细胞免疫,这里我们研究了终末期肾病患者B淋巴细胞重链的组成和变化。免疫组库（immune repertoire,IR）是指在任何指定时间,某个个体的循环系统中所有功能多样性B淋巴细胞和T淋巴细胞的总和。B细胞抗原受体(（B cell receptor,BCR）是B细胞识别抗原的一种膜表面免疫球蛋白（SmIg）,具有抗原结合特异性。BCR由两条重链和两条轻链连接而成,其中重链分为可变区（V区）、恒定区（C区）、跨膜区及胞质区;而轻链则只有V区和C区。V区由VH和VL两个结构域组成,它们各由三个互补决定区（CDR1、CDR2和CDR3）组成,CDR的氨基酸组成和排列顺序呈现高度多样性,在同一个体内,可高达109～1012,构成容量巨大的BCR库,赋予个体识别各种抗原、产生特异性抗体的巨大潜能,这三个CDR均参与对抗原的识别,共同决定BCR的抗原特异性。免疫组库拥有6种主要的肽链,分别为BCR的轻链和重链、TCR的a、β、γ和δ链。免疫组库中每一种免疫蛋白彼此间结构... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１??免疫组择■：测序（Ｉｍｍｕｎｅ?Ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ（ＩＲ－ＳＥＱ））以?Ｔ／Ｂ?淋巴细胞??为研究目标，以多重ＰＣＲ或５’ＲＡＣＥ技术目的扩增决定Ｂ细胞受体（ＢＣＲ）??或Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）多样性的互补决定区（ＣＤＲ区），再结合高通量测序技??

重叠群组装的信息。??Ｉｌｌｕｍｉｎａ测序基本步骤：首先将带接头的模板片段结合到微流板芯片上，然??后在芯片上进行桥接扩增，形成局部的单模板克隆（图１－２）。??１２??

?延伸?退火??图１－２桥式扩增??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｂｒｉｄｇｅ?ｔｙｐｅ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ??然后开始测序，每个循环加入４种不同荧光标记的核苷酸，在ＤＮＡ聚合酶??的作用卜＿按照碱基Ｋ补配对的原则进行模板ＤＮＡ链的延伸。？个反应结柬后，??测序仪激发荧光Ｎ时采集荧光佶号，通过对不同荧光信号的识别辨别不Ｎ碱基。??Ｉ?只別完成后洗脱未结合的碱基洗脱，然＾进入下一个循环，累积多个循环后即??可得到每个模板的ＤＮＡ序列。（图卜３）??１３??


本文编号：3209165