保加利亚乳酸杆菌分解尿毒素的定向诱变

发布时间：2021-06-13 18:48

　　目的：利用先诱导后诱变的方法,筛选出具有高效分解多种尿毒素,并且能稳定遗传的乳酸菌,为慢性肾衰的肠道细菌疗法提供新菌种。方法：1.将原始保加利亚乳酸杆菌菌液置于尿毒症病人血清中反应24小时后,取上层血清测定其对肌酐基础降解能力。2.原始保加利亚乳酸杆菌株的定向诱导：将原始菌株接种于尿毒症病人血清中培养传代,每隔5代检测血清中肌酐浓度,直到出现能降解肌酐的菌株,为阳性菌株。3.最佳诱变剂的选定：测出原始保加利亚乳酸菌的生长曲线一>确定生长对数期一>确定紫外线及硫酸二乙酯的作用时间一>制备悬菌液一>紫外线诱变、硫酸二乙酯诱变、硫酸二乙酯-紫外线复合诱变处理一>稀释后涂布筛选平板培养一>挑取生长良好的菌株置入尿毒症病人血清中反应一>选择能使肌酐浓度下降幅度最大的菌株进行下一轮的诱变,依次类推进行三轮诱变一>经过三轮诱变后,选出降解肌酐强的菌株进行复筛并进行遗传稳定性研究一>确定能使菌株降解肌酐能力提高幅度最大的诱变剂。4.诱导后的保加利亚乳酸杆菌株的诱变：诱导后的阳性菌株制成菌悬液,运用最佳诱变剂进行三轮诱变,经过初筛和复筛,筛选出降解肌... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 实验方法
第二章 实验结果
    2.1 菌株降解肌酐的基础能力及选定最佳诱变剂的结果
    2.2 诱导菌株经最佳诱变剂诱变的结果
第三章 讨论
第四章 结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间主要的研究成果目录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]高降胆固醇保加利亚乳杆菌紫外诱变选育[J]. 帖金鑫,林娟,高婷婷,朱松柏,霍乃蕊.  农产品加工. 2012(08)
[2]不同胱抑素方程对我国慢性肾脏病患者的适用性评估[J]. 黎晓磊,梁敏,杨小兵.  南方医科大学学报. 2010(03)
[3]多抗性保加利亚乳杆菌的诱变和筛选[J]. 芦烨,梁金钟,施铜铃.  乳业科学与技术. 2010(01)
[4]磷霉素产生菌的定向诱变育种[J]. 邓小丽,安海英,张海宏,李广宁,徐慧.  生物技术. 2009(04)
[5]螺旋CT双期增强扫描测定肾小球滤过率[J]. 徐亮,钟建国,龚建平,张伟,朱雪明,张平,宦坚,王建玲,钱铭辉,单玉喜.  江苏医药. 2009(07)
[6]高清除自由基能力保加利亚乳杆菌ZS-2的诱变选育[J]. 张天博,宁喜斌.  中国乳品工业. 2007(09)
[7]应用螺旋CT增强检查测评肾小球滤过功能的初步研究[J]. 刘雪峰,胡亚涛.  中国临床医学影像杂志. 2007(01)
[8]MDRD方程在我国慢性肾脏病患者中的改良和评估[J]. 全国eGFR课题协作组.  中华肾脏病杂志. 2006(10)
[9]亚硝基胍诱变选育丁二酮高产菌株[J]. 于鹏,张兰威,许倩,韩雪.  乳业科学与技术. 2006(05)
[10]瘦体重法推算内生肌酐清除率的临床应用[J]. 邓利荣,齐慧敏,辛岗,王荣福,张春丽,李惊子.  中国实用内科杂志. 2001(09)

硕士论文
[1]以99mTc-DTPA血浆清除率为标准评价肾动态显像法及肾小球滤过率评估方程的应用价值[D]. 刘志华.大连医科大学 2008



本文编号：3228115