转染KCNMA1的骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠糖尿病性勃起功能障碍的研究

发布时间：2021-07-25 21:59

　　目的将KCNMA1基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植到糖尿病性勃起功能障碍大鼠的阴茎组织内，研究其对大鼠勃起功能的影响。方法慢病毒转染BMSCs后，RT-PCR和Western blot检测细胞KCNMA1的表达；成骨、成脂肪分化液诱导BMSCs分化，化学染色观察分化结果。腹腔注射链脲佐菌素和颈部皮下注射阿朴吗啡，建立糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型。根据大鼠阴茎组织中注射的细胞不同，随机分为4组：Ⅰ组：KCNMA1转染BMSCs组；Ⅱ组：空载体转染BMSCs组；Ⅲ组：单纯BMSCs组；Ⅳ组：PBS对照组；正常大鼠作为正常对照。细胞移植后，用荧光显微镜观察阴茎组织中移植的BMSCs分布定植情况；通过阴茎海绵体内压的测定反映阴茎勃起功能变化；免疫组化检测大鼠阴茎组织中KCNMA1的表达。结果（1）RT-PCR和Western blot结果表明体外成功将KCNMA1重组慢病毒转染入BMSCs，且KCNMA1过表达。（2）成骨成脂分化结果表明经过慢病毒转染的BMSCs仍然具有多向分化能力。（3）大鼠阴茎海绵体内压测定表明：Ⅰ组大鼠勃起功能改善较Ⅱ组和Ⅲ组明显，其差异具有统计学意义（... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

原代细胞第三天（×200）

27附 图图1. 原代细胞 第三天 （×200） 图2. 原代细胞 第八天（×200）Fig. 1 Primary cells on third day Fig. 2 Primary cells on eighth dayA （×200） B （×200）图3. 慢病毒转染骨髓间充质干细胞后，在光镜下（A）和荧光镜下（B）结果。Fig. 3 Lentivirus transfected mesenchymal stem cells under light microscopy (A) and underfluorescence microscopy (B).

Fig. 1 Primary cells on third day Fig. 2 Primary cells on eighth dayA （×200） B （×200）图3. 慢病毒转染骨髓间充质干细胞后，在光镜下（A）和荧光镜下（B）结果。Fig. 3 Lentivirus transfected mesenchymal stem cells under light microscopy (A) and underfluorescence microscopy (B).

【参考文献】：
期刊论文
[1]骨髓间充质干细胞治疗糖尿病性勃起功能障碍的前景[J]. 邱雪峰,陈赟,戴玉田.  医学研究生学报. 2011(03)
[2]大电导钙依赖的钾通道（BKca通道）与疼痛[J]. 刘蔡钺,赵云富,马蓓.  生命的化学. 2010(03)
[3]骨髓间充质干细胞生物学特性及其在组织修复中的应用[J]. 张向荣,刘德伍,郭光华.  中国组织工程研究与临床康复. 2008(08)
[4]BKCa通道的结构与功能[J]. 马彬云,汲娟娟.  生物物理学报. 2007(01)
[5]糖尿病性勃起功能障碍基因治疗研究进展[J]. 邱明,肖明朝,苟欣,杨钰兴.  中华内分泌外科杂志. 2009 (02)



本文编号：3302858