谷胱甘肽硫转移酶基因多态性及DNA甲基化与原发性男性不育的相关性研究
发布时间:2021-07-26 08:48
不孕不育一直是一个世界性的健康问题。据世界卫生组织(WHO)报道,育龄夫妇中有不同程度生育障碍的占1015%。在所有的不孕不育夫妇中由男方因素造成的大约占到50%。引起男性不育的因素很多,如免疫性疾病、内分泌性疾病、精子发生障碍、射精障碍以及环境危险因素等,但还有相当一大部分男性不育处于原因不明状态,临床上称为原发性男性不育症(包括原发性无精子症、少精子症、弱精子症和畸形精子症4类)。人类的精子发生是一个极其复杂的过程,涉及细胞增殖、减数分裂、细胞分化等一系列细胞活动。据估计至少有2000多个基因参与精子发生过程。近年来,随着研究的不断深入,已鉴定了许多与精子发生密切相关的基因。谷胱甘肽硫转移酶(Glutathione S-transferase, GSTs)是一种重要的II相代谢酶,它能催化多种I相酶代谢活化产生的毒性代谢产物与谷胱甘肽(GSH)巯基(-SH)共轭结合,形成亲水性物质排出体外,从而产生解毒作用。人体内GSTs是一个非常庞大的超基因家族,其中GSTM1、GSTM3、GSTT1、GSTT2、GSTP1基因的多态性被认为与人类多种疾病的易感性有较大的相...
【文章来源】:南京医科大学江苏省
【文章页数】:115 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
琼脂糖凝胶电泳图谱
中孵育 60min;(3) 反复冲洗 96 孔板 4 次;孵育完成后,揭开封膜,倒去 96 孔板中的混合物后加满 Wash Buffer(1X),再倒去,如此重复 4 次。最后一次,将 96 孔板倒扣于纸巾上,敲打直到水分扣干。(4) 加入 50 ul 的 hromogen solution A 于 96 孔板的每一个孔中(避光);(5) 加入 50 ul 的 hromogen solution B 于 96 孔板的每一个孔中(避光);(6) 轻轻混匀,置 37°C 培养箱中孵育 15min(避光);(7) 取出 37°C 培养箱的 96 孔板,在每孔中加入 50ul Stop Solution,此时孔中液体的颜色会从蓝色变成黄色(如果没有变色,轻轻叩击 96 孔板使得混合物充分混匀);(8) 在 15min 内于酶标仪的 450nm 处,读取 OD 值;(9) 制作标准曲线(见图 2),计算出每个样本的数值。
血清中GSTM1和GSTT1表达水平
本文编号:3303240
【文章来源】:南京医科大学江苏省
【文章页数】:115 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
琼脂糖凝胶电泳图谱
中孵育 60min;(3) 反复冲洗 96 孔板 4 次;孵育完成后,揭开封膜,倒去 96 孔板中的混合物后加满 Wash Buffer(1X),再倒去,如此重复 4 次。最后一次,将 96 孔板倒扣于纸巾上,敲打直到水分扣干。(4) 加入 50 ul 的 hromogen solution A 于 96 孔板的每一个孔中(避光);(5) 加入 50 ul 的 hromogen solution B 于 96 孔板的每一个孔中(避光);(6) 轻轻混匀,置 37°C 培养箱中孵育 15min(避光);(7) 取出 37°C 培养箱的 96 孔板,在每孔中加入 50ul Stop Solution,此时孔中液体的颜色会从蓝色变成黄色(如果没有变色,轻轻叩击 96 孔板使得混合物充分混匀);(8) 在 15min 内于酶标仪的 450nm 处,读取 OD 值;(9) 制作标准曲线(见图 2),计算出每个样本的数值。
血清中GSTM1和GSTT1表达水平
本文编号:3303240
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