肝再生增强因子对肾小管上皮细胞内质网应激的影响与机制研究

发布时间：2021-07-28 02:43

　　第一部分过氧化氢诱导肾小管上皮细胞内质网应激模型的建立目的:过氧化氢（H₂O₂）刺激人肾小管上皮细胞（HK-2细胞系）构建内质网应激体外模型,检测肝再生增强因子（augmenter of liver regeneration,ALR）在内质网应激过程中的表达。方法:用不同浓度的过氧化氢（100μM,200μM或400μM）处理HK-2细胞6h、12h或24h,检测细胞活力以筛选最适处理条件。流式细胞仪检测细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平。Western blot检测ALR在H₂O₂处理细胞3h、6h、12h、24h和48h后的蛋白表达水平。Western blot检测内质网应激标志蛋白GRP78（glucose-regulated protein 78）在200μM H₂O₂处理细胞12h的蛋白表达水平。结果:H₂O₂对HK-2细胞存活率的抑制呈浓度依赖性。肾小管上皮细胞中... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：87 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

过氧化氢对肾小管上皮细胞活力的影响

重庆医科大学博士研究生学位论文图 1.2 过氧化氢对肾小管上皮细胞活性氧 ROS 水平的影响 Effect of hydrogen peroxide on the level of reactive oxygen species RQuantification of the ROS level in HK-2 cells by DCFH-DA staining(B) The bar graph shows the statistical analysis of FITC fluorescencmeans P < 0.01.胞仪检测 200μM H2O2处理 HK-2 细胞后 FITC 荧光强度得组的平均荧光值为 56±6.807；6h 组、12h 组和 24h 组 FITC.7±17.38、877.3±12.33 和 1588±56.64，反映细胞内 ROS间的延长而累积增多，差异有统计学意义（P<0.05）。氢对 HK-2 细胞 ALR 蛋白表达水平的影响

重庆医科大学博士研究生学位论文用 200μM 的 H2O2分别处理肾小管上皮细胞 3h、6h、12h、24h 和 48h，提白检测 ALR 的蛋白表达水平结果显示（图 1.3），ALR 的蛋白表达水平与对比，3hALR 的蛋白表达水平没有显著差异，6hALR 的蛋白表达水平显著升0.05），12hALR 的蛋白表达水平显著升高（P<0.05）并达到最大值，而后 2hALR 的蛋白表达水平下降。过氧化氢对 HK-2 细胞内质网应激水平的影响


本文编号：3307037